補骨脂素的提取 分離與鑑定

2022-08-16 21:42:07 字數 943 閱讀 1313

四、實驗內容

(一)提取

稱取補骨脂粗粉200g,放入1000ml燒瓶中,加入50%乙醇500ml,熱回流1h, 過濾,**乙醇至無醇味,放置過夜,傾去上清液,得棕黑色粘稠物。將棕黑色粘稠物加80ml甲醇溶解,加少許活性炭,回流l0min,趁熱抽濾,濾液**甲醇至小體積,放置析晶。

(二)精製

將上述粗品加適量甲醇(3:100的比例)溶解,加少許活性炭,回流l0min,趁熱抽濾,濾液放冷析晶,濾取結晶,少量甲醇淋洗,80c以下乾燥即得補骨脂素精品。

(三)補骨脂素和異補骨脂素的分離

取色譜用中性氧化鋁40g,裝於直徑1.6cm*30cm的色譜柱中。取補骨脂素精品甲醇液約1-2ml,加樣,以石油醚-乙酸乙酯(1:

2)作洗脫劑,洗脫,每20ml為一餾分,各餾份**溶劑後,用薄層板檢查,和標準品對比,於紫外光燈下觀察螢光與顏色。

(四)鑑定

1.呈色反應

(1)異羥肟酸鐵反應取補骨脂素精品少量,置於試管中,加入7%鹽酸羥胺甲醇溶液2滴~3滴,再加10%氫氧化鉀甲醇溶液2滴~3滴,於水浴上加熱數分鐘,冷卻,用鹽酸調至ph3~4,加1%三氯化鐵試液1滴~2滴,觀察溶液顏色。

(2)開環閉環試驗採樣品少許加稀氫氧化鈉溶液1m1—2m1,加熱,觀察現象;再加稀鹽酸試液幾滴,觀察所產生現象。

(3)螢光採樣品少許溶於氯仿中,用毛細管點於濾紙上,於紫外光燈下觀察螢光與顏色。

2.薄層色譜鑑定

薄層板:矽膠g—cmc-na板。

點樣:補骨脂素精品乙醇液、乾柱色譜分得的兩樣品乙醇液、補骨脂素對照品乙醇液及異補骨脂素對照品乙醇液。

展開劑:石油醚一乙酸乙酯(2:3)。

展開方式:上行展開。

顯色:在紫外光燈(365nm)下觀察螢光斑點。

觀察記錄:記錄圖譜,計算rf值。

五、思考題

1. 從中藥中提取香豆素類成分還有哪些方法?

2.異羥肟酸鐵反應的機理是什麼?

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