實驗名稱：槐公尺中盧丁和槲皮素的提取分離與鑑定
實驗目的：
1）掌握鹼溶酸沉法提取黃酮類化合物的原理及操作，學會蘆丁的精製與水解方法。
2）能運用化學法、色譜法鑑定蘆丁。
實驗器材：
槐花粗粉石灰乳硼砂燒杯紗布蒸餾水抽濾裝置鹽酸硫酸三角燒杯鎂粉 α-萘酚矽膠ｇ ba(oh)2 fecl3 k3[fe(cn)6] 苯胺-聯苯二甲酸蘆丁標準品
槲皮素標準品葡萄糖標準品鼠李糖標準品
參考文獻：
（一）主要成分的結構及性質
槐花系豆科植物sophora japonica l.的乾燥花蕾。其主要有效成分為蘆丁，蘆丁在槐花花蕾中含量高，《藥典》規定槐花中蘆丁含量不得少於20.
0％。其結構為槲皮素-3-o-芸香糖苷。
（二）基本原理
蘆丁分子中有較多的酚羥基，有弱酸性，可與鹼成鹽而溶於水中，加酸酸化後可沉澱析出，因而用鹼溶酸沉法提取蘆丁。
蘆丁的精製是利用它在冷熱水中的溶解差異進行的。
（三）操作步驟
１．蘆丁的提取
稱取槐花粗粉20g，置500ml燒杯中，加入0.4％硼砂沸水溶液200ml，在攪拌下加入石灰乳，調至ph8～9,加熱微沸20分鐘（注意保持ph8～9），並隨時補充蒸發的水分，趁熱用四層紗布濾過。同樣操作再提取一次，合併兩次濾液。
濾液在60~70c用濃hcl調至ph３~４，靜置過夜使沉澱完全，抽濾，沉澱用蒸餾水洗２~３次，抽乾，置空氣中晾乾，得蘆丁粗品。
2．蘆丁的精製
稱量粗品蘆丁，按1:200的比例懸浮於蒸餾水中，煮沸10分鐘使蘆丁全部溶解，趁熱抽濾，冷卻濾液，靜置析晶。抽濾，結晶置空氣中晾乾或60～70c乾燥，得精製蘆丁，稱重，計算收率。
3．蘆丁的水解
取蘆丁1g，研細後置於250ml三角燒杯中，加入2%h2so4溶液100ml，直火加熱微沸約40分鐘，至析出鮮黃色沉澱不再增加為止，放冷抽濾，濾液保留作糖檢查，沉澱用少量水洗去酸，抽乾水分，晾乾稱重，得粗製槲皮素，然後用乙醇（95%乙醇約15ml）重結晶得精製槲皮素。
4．蘆丁鑑定
(１)化學鑑別分別取蘆丁和槲皮素少許，加乙醇５～６ml使溶解，作以下試驗：
①鹽酸-鎂粉反應取上述溶液１～２ml，滴加２滴濃鹽酸，再加入少許鎂粉，振搖，觀察顏色變化情況。
②molich反應取上述溶液１～２ml，加10％等體積的α-萘酚乙醇溶液，搖勻，沿管壁滴加濃硫酸（注意不要振搖），觀察兩液面產生的顏色變化情況。
（四）基本操作注意點
１．提取中加入硼砂的目的是為了保護蘆丁分子中鄰二酚羥基結構不被氧化破壞，並使鄰二酚羥基不與石灰乳中的鈣離子配合（鈣鹽配合物不溶於水），使蘆丁不受損失。同時還具有調節鹼性水溶液ph值的作用。
２．加入石灰乳的目的既可達到鹼溶解提取蘆丁，又能使槐花含有的大量黏液質、果膠生成鈣鹽沉澱除去。實驗中應嚴格控制鹼提取和酸沉澱時的ph值。鹼水提取時控制ph值8~9，不得超過10，ph值過高，在加熱提取過程中可使蘆丁結構被破壞，造成產率明顯下降；痠沉時加濃鹽酸調ph值２~３，不宜過低，以免蘆丁生成釒羊鹽溶於水而降低收率。
附圖1方法一：水提取蘆丁
槐花粗粉
沸水煮沸10～20分鐘，趁熱濾過，反覆２次
水提取液藥渣
放冷，濾過
濾液沉澱
熱水或乙醇重結晶
蘆丁結晶
方法二：鹼水提取芸香苷
槐花粗粉
加約６倍量已煮沸的0.4%硼砂水溶液，攪拌下
加入石灰乳至ph8～9，並保持該ph值20～30
分鐘，趁熱抽濾，反覆２次
水提取液藥渣
在60～70c用濃鹽酸調ph8～9，攪拌，靜置放冷，濾過
水洗至洗液呈中性，60c乾燥
濾液沉澱
熱水或乙醇重結晶
蘆丁結晶
槐公尺中蘆丁及槲皮素的提取分離及鑑定
槐公尺為豆科植物槐 sophora japonica l 的未開放花蕾。味苦性涼 具清熱涼血 止血之功。常用於 多種出血症 腸風便血 痔血 尿血 衄血 崩漏下血 赤血下痢等。槐公尺常炒炭應用。槐公尺的主要化學成分為蘆丁，其含量可達12 16 其次含有槲皮素 三萜皂苷 槐花公尺甲素 槐花公尺乙素 槐花...
葉綠體中色素的提取和分離 教案
教學內容 通過課堂學習 動手操作，運用邏輯思考，推論所用方法，掌握葉綠體的色素構成及其特徵，並由學生設計實驗與操作，掌握其基本操作方法，不同的分離方法對於實驗效果的影響。教學目標 1.基本知識與技能 了解葉綠體中的色素組成 顏色及紙層析法的原理。2.能力目標 通過實驗掌握葉綠體中色素的提取和分離的基...
實驗報告設計葉綠體中色素的提取和分離
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