辣椒紅素的提取 分離及鑑定

2022-02-28 09:26:04 字數 811 閱讀 5225

3、製備層析板:取4塊載玻片(7.5cm×2.

5cm),洗淨後用蒸餾水淋洗,再用少量乙醇淋洗,晾乾;在50ml燒杯中加6ml水和3g矽膠g,用玻璃棒攪勻(切勿劇烈攪拌,以防帶入氣泡,影響薄板質量)。迅速將調好的勻漿倒在兩塊玻璃板上,拿住玻片的兩端,前後左右輕輕搖晃,使勻漿均勻鋪在玻片上。將鋪好的薄層板水平放置晾乾,然後放入烘箱,緩慢公升溫至110℃,恆溫半小時後取出放在乾燥器中備用。

4、薄層層析分離:取少量粗產品放入小試管中,加入10滴二氯甲烷溶解,用毛細管取此溶液在矽膠g板上點樣,斑點直徑不超過0.2cm,再將此板放入盛有二氯甲烷展開劑的層析缸中進行層析。

當展開劑達到該板的指定前沿時,取出層析板,用吹風機吹乾或晾乾,將該板與紅辣椒色素的薄層色譜圖比較,並計算辣椒紅素的rf值。

5、柱層析分離:取12g矽膠(60~200目)放入小燒杯中,加入適量的二氯甲烷攪拌均勻後,裝填到層析柱中,在裝入0.5~1cm厚的無水硫酸鈉,並使柱中二氯甲烷液面高於硫酸鈉的上表面。

開啟層析柱活塞,慢慢放出二氯甲烷,當液面降至硫酸鈉上表面時關閉活塞,用長滴管加入已用二氯甲烷溶解好的粗色素,上樣時色帶要窄,並避免樣品溶液粘附在層析柱的內壁,上樣後用二氯甲烷洗脫。隨著洗脫的進行清晰地看到3個譜帶,由下至上依次為β-胡蘿蔔素、辣椒玉紅素和辣椒紅素。分別用3個25ml錐形瓶收集流出液,其中第三個錐形瓶內為辣椒紅素。

6、辣椒紅素的鑑定:

(1) 最大吸收波長λmax:取上述辣椒紅素溶液5滴於一試管中,加入5ml正已烷,並以正已烷為空白在紫外分光光度計上測其不同波長下的吸光度,找出其λmax。

(2)紅外光譜:取上述辣椒紅素溶液少量,在紅外光譜儀上做紅外光譜圖,並將譜圖與標準辣椒紅素紅外光譜圖作比較。

辣椒紅素的提取 分離及鑑定

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