實驗三黃連中鹽酸小檗鹼的提取分離與鑑定

2021-08-26 14:38:40 字數 1906 閱讀 5079

小檗鹼又稱黃連素,是在高等植物中分布比較廣泛的、有明顯生理活性的化學成分。主要存在於黃連、黃柏、三顆針等中草藥中。小檗鹼具有顯著的抗微生物、抗原蟲的作用,臨床用其鹽酸鹽(即鹽酸黃連素)**細菌**染如痢疾、急性腸胃炎、呼吸道感染等症。

黃連為毛茛科黃連屬植物黃連(coptis chinensis franch。),三角葉黃連(c。deltoidea c。

y。cheng et hsiao)或雲連(c。teetoides c。

y。 cheng)的根莖,含有小檗鹼(1)、巴馬汀(2)、黃連鹼(3)、甲基黃連鹼(4)、藥根鹼(5)等生物鹼,其中以小檗鹼含量最高,可達10%左右,小檗鹼以鹽酸鹽的形式存在於黃連中。

目前製藥工業提取小檗鹼主要以三顆針為原料。三顆針**於小檗科小檗屬(berberis)多種植物,其根皮含生物鹼約2%,主要含小檗鹼、小檗胺、藥根鹼、巴馬汀等生物鹼。

小檗鹼 (berberine)屬異喹啉類生物鹼,自水和乙醇中結晶出來的小檗鹼為黃色長針狀結晶,含5個結晶水,在100℃乾燥時即失去結晶水,轉為棕黃色,加熱至110℃時,其顏色加深變暗色。mp.145℃至160℃即分解。

游離小檗鹼能緩緩溶於水,在熱水及熱乙醇中易溶,而在冷乙醇中溶解度為1:100,但難溶於苯、氯仿、丙酮等溶劑。醇式和醛式小檗鹼則具有一般生物鹼的通性,難溶於水,易溶於有機溶劑。

小檗鹼的鹽類除中性硫酸鹽、磷酸鹽外,一般在水中的溶解度均較小。小檗鹼及其鹽類在水、乙醇中的溶解度如下表:

小檗鹼還能與苯、氯仿、丙酮等溶劑結合成分子縮合物,有完好的結晶狀態,可作為小檗鹼的識別之用。如用過量的氫氧化鈉處理小檗鹼鹽類,使其轉變為醇式小檗鹼,就能與丙酮縮合成結晶型的丙酮小檗鹼。

一、實驗目的

1. 學會從黃連中提取、精製鹽酸小檗鹼的方法;

2. 學會小檗鹼的化學與色譜檢識方法。

二、實驗原理

利用小檗鹼的硫酸鹽在水中的溶解度較大,而鹽酸鹽幾乎不溶於水的性質,先將藥材中的小檗鹼轉變為硫酸鹽用水提出;再使其轉化為鹽酸鹽,結合鹽析法降低其在水中的溶解度,制得鹽酸小檗鹼。

三、實驗內容

(一)鹽酸小檗鹼的提取

1.潤濕

取黃連粗粉50g置燒杯中,加0.3%硫酸約10ml潤濕,放置30

min2.裝筒(分次裝入滲漉筒並排氣)

3.浸漬

用0.3%硫酸浸泡過夜

4.滲漉

收集9—10倍量的滲漉液

等待空餘時間:

10g矽膠g + 30ml(0.8 % cmc-na)研勻,鋪板

(二)分離

1.取滲漉液,加40% naoh調ph至11~12,放置過夜;

2.抽濾,將濾液加濃鹽酸調ph值2~3,加入6% nacl,攪拌均勻,放置過夜;

3.抽濾(盡量抽乾),濾取結晶,即得鹽酸小檗鹼粗品。

(三)精製

1.將上述粗品放入25倍量沸水中,於水浴上加熱使溶解,趁熱過濾液在65℃時加濃鹽酸調ph值2~3,放置過夜

2.抽濾(盡量抽乾),濾取結晶,即得鹽酸小檗鹼精品。

(四)檢識

1. 取自製精製鹽酸小檗鹼 50mg,加水 5ml,緩緩加熱溶解後,加氫氧化鈉試液2滴顯橙紅色,放冷,加丙酮4滴,即發生渾濁,放置後,生成黃色沉澱,即為丙酮小檗鹼。

2. 取自製精製鹽酸小檗鹼少許,加入稀硫酸8ml溶解,攪拌均勻,分置兩支試管中,一支加漂白粉少量,即顯櫻紅色;另一支加入2滴濃硝酸,也顯櫻紅色。

3. 取自製精製鹽酸小檗鹼少許,加稀硫酸12m1使溶解,分置於三支試管中,分別加入碘化汞鉀試劑、碘化鉍鉀試劑及矽鎢酸試劑,觀察其產生的現象。

4. 鹽酸小檗鹼的薄層層析

吸附劑:矽膠g硬板(未活化)

樣品:①自製精製鹽酸小檗鹼乙醇溶液

②鹽酸小檗鹼標準品乙醇溶液

展開劑:①氯仿-乙醇(9:1)

②甲醇-丙酮-乙酸 (4:5:1)

顯色劑:先置於紫外光燈(365nm)下檢視,再噴霧改良碘化鉍鉀試劑,觀察斑點顏色,並與標準品對照。

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