實驗十一DNA的粗提取與鑑定

2022-06-01 05:15:02 字數 2948 閱讀 8197

目的要求

1.了解實驗原理。

2.學會dna的粗提取和鑑定的方法,觀察提取出來的dna物質。

3.通過本實驗培養實驗操作能力和觀察能力。

實驗原理

1. dna在nacl溶液中的溶解度,是隨著nacl的濃度的變化而改變的。當nacl的

物質的量濃度為0.14mol/l時,dna的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在na

cl溶液中的dna析出。

不溶於酒精溶液,但是細胞中的某些物質則可以溶於酒精溶液。利用這一

原理,可以進一步提取出含雜質較少的dna。

遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色,因此,二苯胺可以作為鑑定dna的試劑。

注意事項

1.步驟3析出含dna的黏稠物中,蒸餾水要沿燒杯內壁緩緩加入,不能一次快速

倒入。  2.實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法

不同。  實驗用具

雞血細胞液(5~10ml);體積分數為95%的冷酒精,蒸餾水,質量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液,物質的量濃度分別為2mol/l和0.015mol/l的nacl溶液,二苯胺試劑;燒杯(100ml,1個, 50ml, 500ml,各2個),漏斗,試管(20ml,2個),玻璃棒,滴管,量筒(100ml,1個),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺,鐵環,三角架,酒精燈,石棉網,載玻片,試管夾。

課時安排一課時

課前準備

製備雞血細胞液,方法是:將質量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液100ml,置於500ml燒懷中,注入新鮮的雞血(約180ml),用玻璃棒攪拌,使其充分混合,以免凝血。

靜置於冰箱內一天,使血細胞自行沉澱。(也可以用離心機離心2 min**速1000轉/分)。用吸管吸去上清液。

板書:(課前寫好)

實驗十一 dna的粗提取與鑑定

實驗原理:

1.析出溶解在nac1溶液中的dna。

2.用冷酒精提取出含雜質較少的dna。

在沸水浴時被二苯胺染成藍色。

方法步驟:

1.提取細胞核物質:順時針方向攪拌,稍快,稍重。 5 min

2.溶解dna:

3.析出含dna的黏稠物:蒸餾水300ml,逆時針方向攪拌,緩慢

4.過濾:取黏稠物

5.再溶解:順時針方向攪拌,較慢。3 min

6.過濾:取濾液。

7.提取出含雜質較少的dna,逆時針方向攪拌,稍慢。5 min

8.dna的鑑定:沸水浴5min

教學過程:

引言:上節課我們通過幾個驗證性實驗,證明了dna是主

要的遺傳物質。那麼dna是什麼樣的物質呢?今天我們就通過

實驗將它提取出來,進行觀察和鑑定。

首先請一位同學說一說實驗原理。(答:略)

問:通過預習,你知道選用什麼實驗材料?課前準備是怎樣做的?

(答:雞血細胞液。製備方法:略。)

問:在製備雞血細胞液時,所用的檸檬酸鈉有什麼作用?

(答:防止血液凝固。)

製備過程中,一定要用剛宰殺的雞的新鮮血,並且要與抗凝劑充分混合,防止凝血。我們採用靜置一天的方法,獲得雞血細胞液。

下面大家在動手做實驗之前先要明確幾個需要注意的問

題:  1.要嚴格按照實驗指導的方法步驟去操作。

2.實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌,使用時玻璃棒不要碰到燒杯底,在不同的步驟中玻璃棒的用法不同,每一步的用法參照黑板上的指導去操作,

3.在dna的鑑定中,所用的二苯胺是一種有毒性的試劑,大家在使用時注意不要讓藥液接觸到**或身體的其他部位,也不要近距離觀察。

下面在實驗進行過程中,要思考每一操作步驟要達到什麼目的。

(教師巡視,指導)

在進行步驟1時,利用攪拌的5分鐘做如下提問:

問:為什麼要加蒸餾水?加入蒸餾水後細胞將會怎樣?

(答:讓細胞內溶液的濃度大於周圍溶液的濃度,細胞會吸水以至脹破。)

問:為什麼要用力攪拌?

(答:可以加速血細胞和細胞核的破裂。)

所以下一步驟過濾將濾去的是細胞膜和核膜等物質。

(在進行步驟3時,要向全班明確。)

這一步驟是這個實驗成敗的關鍵,注意加蒸餾水的方法和使用玻璃棒的方法,千萬不能太快太猛,防止打碎dna。

(教師巡視,指導)

觀察濾取出來的黏稠物的顏色。有的同學提取的黏稠物較少,原因可能是在溶解dna時不充分,也可能是析出黏稠物時攪拌的快了。

(教師巡視,指導)

將黏稠物再溶解時一定要充分,多攪拌。以免有dna損

失。  (教師巡視,指導。)

加入冷酒精時動作要慢。

當玻璃棒上出現絲狀物纏繞時,繼續慢慢攪拌。至不再增加時,取出吸乾上面的水分。仔細觀察絲狀物呈什麼顏色?

(答:黃色。)

這些絲狀物要用二苯胺鑑定。使用二苯胺時要注意不要接觸到藥液。進行沸水浴時,在實驗室較為通風的地方集體進行。

(利用沸水浴的5 min)

問:步驟3中加入蒸餾水的目的?與步驟1有什麼區別?

(答:步驟3中加蒸餾水是使nacl溶液的濃度逐漸降至

0.14mol/l,使dna的黏稠物析出。而步驟1加蒸餾水是為了

讓細胞吸水脹破。)

很好。問:步驟7為什麼要加50ml的冷酒精?

(答:因為dna不溶於冷酒精,而其他物質可以溶解在酒

精中,使含雜質較少的dna絲狀物可以析出。懸浮於溶液中。)

現在大家從水浴鍋中拿出試管,比較兩個試管中溶液的顏色有什麼不同?

(答:有絲狀物的試管變成藍色,另一試管還是原來顏色。)

問:這一鑑定結果說明什麼問題?

(答:提取出的絲狀物是dna。)

那麼你看到的絲狀物的粗細是不是dna分子的直徑呢?

(答:不是。dna分子直徑只有2nm。絲狀物是多個dna

分子聚在一起形成的)

下面請同學們將實驗用具,按原樣擺放整齊,實驗桌要保持清潔。課下將實驗報告冊填好。

今天我們通過實驗將dna提取出來進行了觀察和鑑定,那

麼dna的化學組成,分子結構和複製是怎樣的?我們下節課再

繼續研究。

DNA的粗提取與鑑定實驗教學設計

一 教學背景分析 教材分析 生物體的性狀之所以能夠遺傳給後代,是由於生物體內具有dna或rna這些遺傳物質。通過必修2 遺傳與進化 的學習,學生已經學習了證明dna是主要的遺傳物質的實驗證據。那麼dna究竟是什麼樣的呢?本課題通過嘗試對植物或動物組織中的dna進行粗提取,了解dna的物理化學性質,理...

《DNA的粗提取與鑑定》的教學設計

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5 1DNA的粗提取與鑑定導學案

學習目標 1.嘗試對植物或動物組織中的dna進行粗提取。2.了解dna的物理化學性質。3.理解dna粗提取以及dna鑑定的原理。基礎知識 1 提取dna的方法 基本思路是對於dna的粗提取而言,就是要利用dna與和等在物理和化學性質方面的差異,提取dna,去除其他成分。1 dna的溶解性 dna和蛋...