5 1DNA的粗提取與鑑定導學案

2022-07-07 22:24:02 字數 2307 閱讀 5969

學習目標

1.嘗試對植物或動物組織中的dna進行粗提取。

2.了解dna的物理化學性質。

3.理解dna粗提取以及dna鑑定的原理。

基礎知識:

1.提取dna的方法:

基本思路是對於dna的粗提取而言,就是要利用dna與和等在物理和化學性質方面的差異,提取dna,去除其他成分。

1)dna的溶解性:dna和蛋白質等其他成分在不同濃度的中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當的鹽濃度就能使充分溶解,而使雜質沉澱,或者相反,以達到分離目的。

課本圖5—1是dna在nacl溶液中的溶解度曲線,請根據曲線圖,

【思考】①在什麼濃度下,dna的溶解度最小?dna在nacl溶液中的溶解度是如何變化的?

②如何通過控制nacl溶液的濃度使dna在鹽溶液中溶解或析出?

此外,dna不溶於溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶於酒精。利用這一原理,可以將dna與蛋白質進一步的分離。

2)dna對酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解但是對沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60—80oc的高溫,而dna在以上才會變性。

洗滌劑能夠瓦解 ,但對dna沒有影響。

3)dna的鑑定:在條件下,dna遇會被染成色,因此二苯胺可以作為鑑定dna的試劑。

2.實驗設計

1)實驗材料的選取:凡是含有的生物材料都可以考慮,但是選用的生物組織,成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實驗材料:

魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養基的大腸桿菌

【思考】哺乳動物的紅細胞的特點?

2)破碎細胞,獲取含dna的濾液:動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的 ,同時用攪拌,過濾後收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用溶解細胞膜。

例如,提取洋蔥的dna時,在切碎的洋蔥中加入一定的和進行充分的攪拌和研磨,過濾後收集研磨液。

【思考】①為什麼加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?

②加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什麼?

③如果研磨不充分,會對實驗結果產生怎樣的影響?

④此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分?

3)去除濾液中的雜質:閱讀課本的三個方案,

【思考】為什麼反覆地溶解與析出dna,能夠去除雜質?

方案二與方案三的原理有什麼不同?

4)dna的析出與鑑定:將處理後的溶液過濾,加入與濾液體積 、冷卻的 ,靜置 ,溶液中會出現這就是粗提取的dna。用玻璃棒攪拌,捲起絲狀物,並用濾紙吸取上面的水分。

取兩支20ml的試管,各加入物質的量濃度為的nacl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然後,向兩支試管中各加入4ml的

混合均勻後,將試管置於中加熱5min,待試管冷卻後,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有dna的溶液是否變 。

3.操作提示:

以血液為實驗材料時,每100ml血液中需要加入3g ,防止

加入洗滌劑後,動作要否則容易產生大量的泡沫,不利於後續步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要 ,以免導致dna分子不能形成絮狀沉澱。二苯胺試劑要否則會影響鑑定的效果。

4.結果分析與評價。

疑難點撥:1、dna的溶解度與nacl溶液濃度的關係:當nacl溶液濃度低於0.

14mol/l時,隨濃度的公升高,dna的溶解度降低;當nacl溶液濃度高於0.14mol/l時,隨濃度公升高,dna的溶解度公升高。2、製備雞血細胞液時,要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因:

製備雞血細胞液時,要在新鮮的雞血中加入抗凝劑——檸檬酸鈉,防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中ca2+發生反應,生成檸檬酸鈣絡合物,血漿中游離的ca2+大大減少,血液便不會凝固,因為雞血紅細胞,白細胞都有細胞核,dna主要存在於細胞核中,所以在離心或靜置沉澱後,要棄出上層清液——血漿。3、提取dna的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取dna含量較高的生物材料,否則會由於實驗過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;第二步是dna的釋放和溶解,這一步是實驗成功與否的關鍵,要盡可能使細胞內的dna全部溶解;第三步是dna的純化,即根據dna的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將dna與雜質分開;最後一步是對dna進行鑑定,這是對整個實驗的結果的檢測。

4、在dna的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時,注意動作要輕緩,以免加劇dna分子的斷裂,導致dna分子不能形成絮狀沉澱。5、盛放雞血細胞液的容器,最好是塑料容器。雞血細胞破碎以後釋放出的dna,容易被玻璃容器吸附,由於細胞內dna的含量本來就比較少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的dna就會更少。

因此,實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管,這樣可以減少提取過程的dna的損失。

課堂檢測:點金訓練

DNA的粗提取與固定學案

察右後旗第一中學生物導學案 高年級班姓名主備人 徐棉芬使用時間編號審核人 課題 dna的粗提取與鑑定 學習目標 1.嘗試對植物或動物組織中的dna進行粗提取2.了解dna的物理化學性質3.理解dna粗提取以及dna鑑定的原理 定嚮導學 互動展示 當堂反饋 達標訓練題自評師評 基礎題1.高果糖漿是指能...

實驗十一DNA的粗提取與鑑定

目的要求 1.了解實驗原理。2.學會dna的粗提取和鑑定的方法,觀察提取出來的dna物質。3 通過本實驗培養實驗操作能力和觀察能力。實驗原理 1.dna在nacl溶液中的溶解度,是隨著nacl的濃度的變化而改變的。當nacl的 物質的量濃度為0.14mol l時,dna的溶解度最低。利用這一原理,可...

《DNA的粗提取與鑑定》的教學設計

教學目標 1 知識方面 理解dna的理化特性及根據其理化特性而提取和鑑定的原理。2 能力方面 1 初步掌握dna的粗提取和鑑定的方法。2 在對實驗原理 步驟的理解和分析過程中發展學生的科學思維。3 培養學生的動手能力和學會進行科學實驗的一些基本技能。3 情感態度價值觀方面 在科學實驗過程中培養學生嚴...