4、試劑的配製:
(1) 6%的澱粉肉湯:稱取牛肉膏0.3g、蛋白腖1.
0g、氯化鈉0.5g和臺盼藍(trypan blue)0.3g,分別加入到100ml蒸餾水中溶解,再加上可溶性澱粉6g,混勻後煮沸滅菌,置於4c儲存,使用時溫浴溶解。
(2) 0.17mol/l氯化鈉溶液:稱取4.967g氯化鈉溶於500ml蒸餾水中。
(3) 0.32mol/l葡萄糖溶液:稱取28.83g葡萄糖溶於500ml蒸餾水中。
(4) 0.32mol/l甘油溶液:量取11.7ml甘油(c3h5(oh)3 1.26g/ml) 加蒸餾水500ml混勻
(5)。0.32mol/l乙醇溶液:量取9.33ml無水乙醇加蒸餾水至500ml混勻。
(6) 500u/ml肝素:取安瓿裝肝素注射液一支(12500u),用注射器抽出2ml肝素加入到23ml生理鹽水中混勻,4c儲存。
(7) 1%雞紅細胞懸液:取雞血1ml(加肝素抗凝)加入到99ml生理鹽水中。
(8) 10%兔紅細胞懸液:取10ml兔血(加肝素抗凝)加入到90 ml生理鹽水中混合均勻
【 內容與方法 】
一、紅細胞膜通透性的觀察
每組一套實驗器材,注意各種試劑的標籤。試管要根據實驗所要裝的溶液種類來編號,移液管也要對應編號,切勿混淆弄錯,交叉使用,以保證實驗結果的準確性。
1、輕輕搖勻裝有10%的人紅細胞懸液的小瓶,隔著瓶看不見後面紙上的字,說明該紅細胞懸液是不透明的。
2、觀察人(或兔)紅細胞在低滲溶液中的溶血現象:
將0號試管加入0.3 ml人紅細胞懸液,在加入3 ml蒸餾水,輕輕搖勻,注意溶液顏色的變化,隔著試管看後面紙上的字,能否看清楚?說明什麼問題?記好時間。
3、觀察人(或兔)紅細胞對各種物質的選擇通透性:
① 在1號試管中加入0.3ml人(或兔)紅細胞懸液,再加入3ml 0.17mol/l的氯化鈉,輕輕搖勻。觀察是否溶血。
② 分別將下列三種等滲液按上述方法進行實驗,並記下溶血時間。
0.3ml人(或兔)紅細胞懸液+3ml 0.32mol/l乙醇(2號試管)。
0.3ml人(或兔)紅細胞懸液+3ml 0.32mol/l葡萄糖(3號試管)。
0.3ml人(或兔)紅細胞懸液+3ml 0.32mol/l甘油(4號試管)。
將實驗結果填入下表:
二、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動觀察
在實驗前兩天,每天每只小鼠腹腔注射6%澱粉肉湯1ml(含台酚藍),實驗前先給每只小鼠腹腔注射1%雞紅細胞懸液1ml。25分鐘後再向腹腔注射0.5ml生理鹽水。
3分鐘後用頸椎脫臼法處死小鼠。剪開腹腔,用注射器或吸管吸取腹腔液,滴一滴在載玻片**,蓋上蓋玻片,在顯微鏡下觀察。
在低倍鏡下找到許多圓形或不規則形狀的巨噬細胞,移至視野**,換高倍鏡觀察,發現細胞質中有數量不等的藍色圓形小顆粒(吞入含台酚藍澱粉肉湯所形成);還可以見到少量黃色橢圓形有細胞核的雞紅細胞。在視野中可見到巨噬細胞吞噬雞紅細胞的不同階段。有的紅細胞緊貼在巨噬細胞表面;有的紅細胞已部分被吞入;有的巨噬細胞已吞入1個或多個紅細胞,形成了吞噬泡。
圖3-1 細胞的吞噬活動
1. 紅細胞與巨噬細胞接觸 2. 3. 正在被吞噬的紅細胞
4已經被吞噬的紅細胞,並形成吞噬體
【 作業與思考 】
1、繪製小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的過程圖。
2、按上面的**記錄溶血實驗結果,並分析原因,指出哪些溶液中含有非通透性離子。
3、細胞的吞噬活動對人體有何意義?
4、物質跨膜(細胞膜)運輸有哪些方式?請比較它們的異同點。
細胞膜 系統的邊界
4 密切聯絡生活實際,從學生的已有經驗出發,注意知識的延伸和連續性。介紹哺乳動物成熟紅細胞的特點,拓展學生的知識面,增加學生對哺乳動物紅細胞的了解,體驗實驗材料的正確選擇對於科學研究的重要性,以及製備細胞膜的方法中所蘊涵的科學原理。補充細胞壁並不能將細胞與外界分隔開,植物細胞系統的邊界仍然是細胞膜,...
細胞膜 系統的邊界
第1節細胞膜 系統的邊界 一 教學目標 1.簡述細胞膜的成分和功能 2.進行用哺乳動物紅細胞製備細胞膜的實驗,體驗製備細胞膜的方法。3.認同細胞膜作為系統的邊界,對於細胞這個生命系統的重要意義。二 教學重點和難點 1.教學重點 1 細胞膜的成分和功能。2 細胞膜對於細胞這個生命系統的重要意義。2.教...
3 1細胞膜 系統的邊界
第3章細胞的基本結構 主備課人 馬紅軍 一 知識結構 細胞膜的成分 細胞膜 系統的邊界將細胞與外界環境分隔開 細胞膜的功能控制物質進出細胞 進行細胞間的資訊交流 二 教學目標 1 簡述細胞膜的成分和功能。2 進行用哺乳動物紅細胞製備細胞膜的實驗,體驗製備細胞膜的方法。3 認同細胞膜作為系統的邊界,對...