什么是微生物檢驗

2023-01-26 10:09:02 字數 5279 閱讀 5641

吳崇食質 12級 1班學號:20122629

微生物是個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。 微生物包括細菌、 病毒、真菌、和少數藻類等。 (但有些微生物是肉眼可以看見的,像屬於真菌的蘑菇、 靈芝等。

病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的 「非細胞生物」 , 但是它的生存必須依賴於活細胞。 根據存在的不同環境分為空間微生物、 海洋微生物等,按照細胞機構分類分為原核微生物和真核微生物。

微生物對人類最重要的影響之一是導致傳染病的流行。 在人類疾病中有 50%是由病毒引起。微生物導致人類疾病的歷史,也就是人類與之不斷鬥爭的歷史。

在疾病的預防和**方面, 人類取得了長足的進展, 但是新現和再現的微生物感染還是不斷發生, 像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的**藥物。 一些疾病的致病機制並不清楚。 大量的廣譜抗生素的濫用造成了強大的選擇壓力, 使許多菌株發生變異, 導致耐藥性的產生, 人類健康受到新的威脅。

一些分節段的病毒之間可以通過重組或重配發生變異, 最典型的例子就是流行**冒病毒。 每次流感大流行流感病毒都與前次導致感染的株型發生了變異, 這種快速的變異給疫苗的設計和**造成了很大的障礙。 而耐藥性結核桿菌的出現使原本已近控制住的結核感染又在世界範圍內猖獗起來。

微生物千姿百態, 有些是腐敗性的, 即引起食品氣味和組織結構發生不良變化。當然有些微生物是有益的,它們可用來生產如乳酪,麵包,泡菜,啤酒和葡萄酒。微生物非常小,必須通過顯微鏡放大約 1000 倍才能看到。

比如中等大小的細菌, 1000個疊加在一起只有句號那麼大。想像一下一滴牛奶,每毫公升腐敗的牛奶中約有 5千萬個細菌,或者講每夸脫牛奶中細菌總數約為 50億。也就是一滴牛奶中可能含有 50 億個細菌。

微生物能夠致病,能夠造成食品、布匹、皮革等發霉腐爛,但微生物也有有益的一面。 最早是弗萊明從青黴菌抑制其它細菌的生長中發現了青黴素, 這對醫藥界來講是乙個劃時代的發現。 後來大量的抗生素從放線菌等的代謝產物中篩選出來。

抗生素的使用在第二次世界大戰中挽救了無數人的生命。 一些微生物被廣

泛應用於工業發酵, 生產乙醇、 食品及各種酶製劑等; 一部分微生物能夠降解塑料、處理廢水廢氣等等,並且可再生資源的潛力極大,稱為環保微生物;還有一些能在極端環境中生存的微生物,例如:高溫、低溫、高鹽、高鹼以及高輻射等普通生命體不能生存的環境, 依然存在著一部分微生物等等。 看上去, 我們發現的微生物已經很多, 但實際上由於培養方式等技術手段的限制, 人類現今發現的微生物還只佔自然界中存在的微生物的很少一部分。

食品微生物檢驗內容一是檢驗食品汙染程度指示菌。 細菌總數即菌落總數, 是食品和生活飲用水檢樣處理後,在特定培養條件下,所得 1g 或者 1mc 檢樣中所含有的細菌菌落個數,這就是判斷食品和生活飲用水汙染程度的關鍵指標。 食品中菌落總數檢驗的意義 :

判定食品被細菌汙染的程度及衛生質量。

2、**食品耐存放的程度和期限。

3、及時反映食品加工過程是否符合衛生要求,為被檢食品衛生學評價提供依據。

4、通常認為,食品中細菌數量越多,則可考慮致病菌汙染的可能性越大, 菌落總數的多少在一定程度上標誌著食品衛生質量的優劣。

菌落總數測定的衛生學意義:

1、食品本身的新鮮程度

2、加工、貯存運輸過程中是否受到汙染——衛生質量

3、衛生學指標:必須配合大腸菌群的檢驗和其他病原菌專案的檢驗,才能作出比較全面準確的評定

大腸菌群系是在 37℃下培養 24h 的一**酵乳糖、產氣、產配以及需氧或者厭氧的革蘭氏染色陰性無芽胞桿菌。 這種菌群主要**於人和牲畜的糞便, 因此, 可以用糞便的汙染指標菌對食品的衛生質量進行評價。 二是檢測食品中治病菌。

在食品微生物相關檢驗標準中已經明確規定某些微生物的數量, 因此在對食品汙染程度指示菌檢測的同時, 還應該對一些治病菌進行測定, 如沙門氏菌、 金黃色葡萄球菌等。

食品微生物檢驗的意義 :

1、是衡量食品衛生質量的重要指標,也是判定被檢食品能否食用的科學依據。 2、 可以判斷食品加工環境及食品衛生的情況, 為衛生管理工作提供科學依據 . 。

3、可以有效地防止或減少食物中毒和人畜共患病的發生。 4、保證產品的質量, 避免不必要的損失。 食品微生物檢驗是食品質量監測的重要組成部分。

食品微生物檢驗的範圍 :

1、 生產環境的檢驗 :車間用水、 空氣、 地面、 牆壁等中的微生物檢驗。 2、 原輔料的檢驗 :包括食用動物、穀物、新增劑等一切原輔材料的檢驗。

3、食品加工、儲藏、銷售環節的檢驗:包括食品從業人員的衛生狀況檢驗、 加工工具、運輸車輛、包裝材料的檢驗等。

4、 食品成品的檢驗:要的是對出廠食品、 可疑食品及食物中毒食品的檢驗。 食品微生物檢測技術方法。

很長時間以來, 開展的此項檢測活動, 是按照瓊脂平板的措施來進行的, 通常要兩到三天的時間才可以完成。 最近, 許多的專家和組織都不斷地對工藝以及措施進行深化分析, 獲取了非常高的成就, 對許多措施進行了改進, 切實提公升了檢測的精準性以及安穩性特徵, 而且獲取了許多全新的工藝,具體有如下的措施:

1.採用電阻抗法。具體的講,它是指細菌繁衍的時候,將會使培養基中的火分電惰性物質如碳水化合物、 蛋白質和脂類等, 代謝為具有電活性的小分子物質,其能增加培養基的導電性,進而導致阻抗出現改變,因此,可以通過檢測培養基的電阻抗變化情況來判定細菌在培養基中的生長繁殖特性, 即可檢測出相應的細菌。

2.採用快速酶觸反應及代謝產物的檢測。細菌在生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶, 所以根據其特性來選用相對應的底物和指示劑, 而且合理的記載資訊。

3.採用分子生物學技術。它涵蓋兩項內容:

1 核酸探針技術。結合鹼基互補相關的概念,使用獨特的措施來對物體進行標註。 2 聚合酶鏈式反應 (pcr技術。

其原理為通過加熱使雙鏈 dna 經裂解成兩條單鏈, 成為引物和 dna 聚合酶的模板; 接下來把氣溫變低, 使寡聚核苷酸引物與 dna 分子上的互補序列退火。 通常狀態中,當退火的氣溫非常高的話,它的擴增特性就十分的優秀。

4.採用免疫學方法檢測細菌抗原和抗體的技術。具體有三項措施:

1 螢光抗體檢測技術 (ifa,它又有兩種,分別是直接的以及間接地。其中第一種是直接在樣本上滴加已知特異性螢光標記的抗血清,然後對其清洗,進而獲取資訊。 而後一種措施是在檢樣上滴加已知細菌特異性抗血清, 等到發生反映之後再仔細地清洗,再加入螢光標記的抗體後在螢光顯微鏡下觀察結果。

2 免疫酶技術 (eia,其是將抗原、抗體特異性反應和酶的高效催化作用原理結合,此法非常的獨特, 而且功效非常好。 通過共價結合將酶與抗原或抗體結合, 形成酶標抗原或抗體, 或通過免疫方法使酶與抗酶抗體結合, 形成酶抗體複合物。 3 免疫磁珠分離法 (ims,即應用抗體包被的免疫磁珠,用乙個磁場裝置收集鐵珠。

5.採用儀器法。 1 微型全自動螢光酶標分析儀 (mini-vidas,其主要採用具有優異的敏感性和特異性的酶聯螢光技術 (elfa, 得到的螢光和抗原的比例是一種順向的關係。

2 全自動微生物分析系統 (vietk-ams。它能夠一次對非常多的樣本開展分析, 而且檢測的時間不需要非常久, 通常在兩到三個小時即可, 此法的效率非常好,同時也將成為檢測行業全行的發展趨勢。

食品微生物檢驗的步驟有:

(1採集樣品;取樣前要了解所採樣品的**、加工、儲藏、包裝、運輸等情況,取樣時必須做到:使用的器械和容器需經滅菌,嚴格進行無菌操作;不得加防腐劑; 液體樣品應攪拌均勻後才去取樣, 固體樣品應在不同部位採取以使樣品具代表性;取樣後及時送檢。

國際食品微生物標準委員會 (icmsf制定的食品微生物學分析取樣方法,目前已在國內外被逐步推廣採用。 icmsf 根據以下原則來規定不同的取樣數:①各種微生物本身對人的危害程度各有不同; ②食品經不同條件處理後, 其危害程度可分為 3種情況:

危害度降低;危害度未變;危害度增加。依據 icmsf 取樣方法規定,其中:n :

指一批產品取樣個數; c :指該批產品中檢樣菌數超過限量的檢樣數; m :指合格菌數限量; m :

指附加條件後判定為合格的菌數限量。

(2樣品送檢;採集好的樣品應及時送到食品微生物檢驗室,一般不應超過 3h , 如果路程較遠, 可將不需冷凍的樣品保持在 1~5℃的環境中, 勿使凍結, 以免細菌遭受破壞。樣品送檢時,必須認真填寫申請單,以供檢驗人員參考。

檢驗人員接到送檢單後,應立即登記,填寫序號,並按檢驗要求,立即將樣品放在冰箱或冰盒中,並積極準備條件進行檢驗。

(3樣品處理

樣品處理應在無菌室內進行, 若是冷凍樣品必須事先在原容器中解凍, 解凍溫度為 2~5℃不超過 18h 或 45℃不超過 15min 。

a. 固體樣品

用無菌刀、 剪或鑷子稱取不同部位的樣品, 剪碎放入滅菌容器內, 加一定量的水混勻,製成 1: 10混懸液,進行檢驗。在處理蛋製品時,加入約 30個玻璃球,以便**均勻。

生肉及內臟,先進行表面消毒,再剪去表面樣品,採集深層樣品。

b. 液體樣品

原包裝樣品用點燃的酒精棉球消毒瓶口, 再用經石炭酸或來蘇兒消毒液消過毒的紗布將瓶口蓋住, 用經火焰消毒的開關器開啟。 搖勻後用無菌吸管吸取; 含有二氧化碳的液體食品, 按上述方法開啟瓶蓋後, 將樣品倒入無菌磨口瓶中, 蓋上消毒紗布,將蓋開一小縫,輕輕搖動,使氣體逸出後進行檢驗;將冷凍食品放入無菌容器內,融化後檢驗。

每種指標都有一種或幾種檢驗方法, 可根據不同的食品、 不同目的來選擇恰當的檢驗方法。通常所用的常規檢驗方法為現行國家標準,或國際標準,(如 fao 標準、 who 標準等,或食品進口國的標準(如美國 fda 標準、日本厚生省標準、歐共體標準等。

食品衛生微生物檢驗室接到檢驗申請單, 應立即登記, 填寫試驗序號, 並按檢驗要求立即將樣品放在冰箱或冰盒中,積極準備條件進行檢驗。

一般陽性樣品發出後 3d (特殊情況可適當延長方能處理樣品;進口食品的陽性樣品,需儲存 6個月方能處理。陰性樣品可及時處理。

(5結果報告

樣品檢驗完畢後,檢驗人員應及時填寫報告單,簽名後送主管人核實簽字, 加蓋單位印章,以示生效,並立即交給食品衛生監督人員處理。

(6注意事項:

1 、 實驗需在潔淨臺進行 2、操作前用 75%酒精擦潔淨臺面及四周,放好需用的實驗器材及各種溶液, 開紫外燈消毒 30 分鐘,在關掉紫外燈 30 分鐘後方能進入.進入無菌室前應用肥皂洗手,然後用 75%酒精球棉將手擦乾淨。 3、 進入無菌間必須穿的專用工作服、 帽及拖鞋、 口罩,應放在無菌室緩衝間, 工作前經紫外線消毒後使用 。

4、操作開始前用 0.1%的新潔爾滅或 75%的酒精對手、手臂及所要用到的超淨臺檯面進行消毒 。 5、使用的吸管、平皿及培養基等必須經消毒滅菌,開啟包裝未使用的器皿, 不能放置再用,消毒用器皿放置不得超過一周。

6、從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位及試管或平皿邊。 7、接種樣品必須在酒精燈前操作,接種樣品時,吸管從包裝中取出後及開啟試管塞都要通過火焰消毒。 8 、 實驗完畢 , 清潔操作檯面 。

9 、用過的器材進行整理 , 汙染細菌的器材需經高壓滅菌或煮沸消毒。 11、實驗過程中,及時用 0.1%的新潔爾滅溶液對手、手臂及可能被汙染了的區域進行消毒 。

12、換下的隔離衣、帽等進行紫外線,拖鞋放回原處。 13、用畢,再開紫外燈消毒 30 分鐘。

微生物檢驗操作規程

為規範檢驗程式,提高檢驗結果的準確性,要求微生物檢驗員嚴格按照本操作規程檢驗。樣品準備 準確稱取10g 1g樣品,剪碎後加入到200ml已滅菌的生理鹽水中,充分混勻,靜置10分鐘,待生理鹽水樣液自然沉降後取上清液作菌落計數,液體樣品可用原液直接做樣液。如果被檢樣品含有大量吸水樹脂材料而導致不能吸出足...

檢驗科微生物實習小結

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