安捷倫維護 hplc 液相色譜中的鹽帶來的問題？ 一、如何處理 hplc 中的鹽帶來的問題？ 很多問題是由於流動相含有鹽成分造成的。
建議在清洗時將水加熱後再沖洗， 這樣既可以將鹽溶解的更好， 也可以溶解一些脂溶性物質， 會減少很多問題的發生,包括管路堵塞,鹽析出， 基線噪音…… 液相幫浦的日常維護
二、安捷倫 1100 及 1200 液相幫浦的日常維護幫浦是液相色譜的核心， 幫浦將流動相從溶劑瓶輸送到液相流路系統中， 並要在高壓下保持流量和壓力的穩定。 幫浦的狀態正常是液相色譜準確分析的基礎， 所以平日一定要重視對幫浦的維護。 下面就安捷倫 1100/1200 液相色譜幫浦的日常維護進行簡要的介紹。
1. 流動相的準備為了防止顆粒性物質對幫浦元件的磨損，流動相（特別是水相）應該新鮮配置並且過濾。上機前對流動相進行適當的超聲脫氣，以保證更好的**脫氣和**混合的效果。
2. 比例閥溶劑通道的分配四元幫浦的比例閥有 a、 c、 四個通道， b、 d 建議將鹽溶液接在下面的通道或 d） （a ， 將有機溶劑接在上面的通道（b 或 c）上,也就是有機通道最好在鹽溶液通道的上面。且建議用水定期沖洗所有比例閥通道除去可能在閥口析出的鹽結晶。
3. 過濾白頭的維護過濾白頭位於排氣閥內，是一種聚四氟乙烯材質的微孔過濾芯，用於過濾流動相中的微粒，是經常需要維護的地方。當系統壓力有異常增高時，首先需要檢查過濾白頭是否阻塞了。
判斷的方法是：開啟排氣閥，以純水作流動相，將流速設為 5ml/min，如果幫浦壓超過 10bar，則說明過濾白頭需要更換了。對過濾白頭的預防性維護通常可以是 1~2 個月更換 1 次， 更換時同時檢查一下過濾白頭前面的密封金墊，如果發現變形，也應及時更換。
如果過濾白頭更換過於頻繁，則需要認真檢查一下流動相的品質， 確保流動相上機前過濾， 確保使用了合適的過濾膜。 如果流動相有長菌現象，除了配置新的溶劑，還應對相應的溶劑管線和脫氣機通道進行徹底的清洗。
4. 柱塞杆與柱塞密封圈的維護柱塞密封圈套在柱塞桿上用於隔離幫浦與外界，工作時，它和柱塞杆進行頻繁的往復摩擦，使用一段時間後，會有一定的磨損，因而密封圈需要定期更換以保證系統的密封性。更換活塞密封墊時檢查活塞桿上是否有劃痕。
有劃痕的活塞將導致輕度滲漏，並降低密封墊的使用壽命。應盡早更換有劃痕的活塞。 柱塞密封圈有反相和正相之分，反相密封圈為黑色，石墨 teflon 材質；正相呈橘黃色，聚乙烯材質，更適用於正相溶劑。
1100/1200 標配的是反相密封圈，正相應用時，需要更換為正相密封圈。 鹽溶液對柱塞密封圈的壽命有著很大的影響，使用有鹽溶液作為流動相的體系時，要注意鹽溶液通道的清洗，千萬不能讓鹽溶液在系統中過夜，常常乙個晚上析出的鹽粒就會造成系統堵塞，對幫浦產生較大的損害。為了延長密封圈和柱塞杆的壽命，在經常使用較高濃度的緩衝鹽溶液的情況下，建議安裝柱塞清洗附件。
柱塞清洗的原理在於：柱塞幫浦在工作時，雖然有密封圈密封，但由於毛細作用，還是會有一些流動相滲入到密封圈與柱塞杆之間。如果流動相中有緩衝鹽，當柱塞杆壁上的溶劑揮發掉後，極細小的鹽粒留了下來。
這樣的鹽粒就象砂紙一樣磨損著柱塞杆和柱塞密封圈， 會大大降低柱塞杆和密封圈的壽命。 柱塞清洗附件是在柱塞杆的中間加入了乙個可以有水流過的腔體， 通過水不斷的流動， 就可以帶走滲進來的鹽溶液，防止了鹽粒的析出，保護了柱塞杆和柱塞密封圈。通常我們往柱塞清洗的水裡加入 10％的異丙醇，可以減小水的張力，便於清洗液流動，並且抑制長菌。
但有一點要注意的是，裝有柱塞清洗附件的幫浦頭，清洗液流量可以很小（如沒分鐘幾滴），但一定不要讓清洗通道裡乾涸，如果水流光了，應該盡快換上新的溶液。否則會減少柱塞杆和密封圈的壽命。 5.
主動閥的維護主動閥是流動相進入幫浦體的門戶。如果我們發現流量為零，流量不穩，或幫浦壓波動特別大，常常都是因為主動閥漏或是堵了。主動閥裡面裝有乙個小的單向閥芯，我們將其取下，在異丙醇內超聲清洗一下，一般能解決這樣的問題。
如果超聲不能解決問題的話， 可以更換該閥芯。 對於經常使用緩衝鹽體系的使用者， 手頭常備乙個這樣的閥芯是非常有用的， 往往可以及時解決問題，大大的降低停機帶來的損失。 6．出口閥的維護出口閥內部也有，如果有鹽粒或其它雜質滲入其中，也會造成出口閥的堵或漏，常常表現為壓力的異常波動。
通常我們可以用異丙醇或 60 度左右的熱水沖洗系統， 如果無效，在異丙醇中超聲清洗它常常會解決這樣的問題。 三、保留時間重現性不好，可能的原因有哪些？ 保留時間重現性不好，可能的原因有哪些？
重現性不好保留時間不重現還會影響到峰面積的重現性，導致實驗無法進行。引起這種現象因素很多， 建議檢查以下幾個方面： - 確認流動相是新鮮配置的，比例沒有錯誤。
- 確認色譜柱是好的。
- 檢查一下溶劑瓶裡的溶劑過濾器沒有長菌，沒有被堵塞。 - 如果使用梯度洗脫方法，請確認平衡時間足夠長。 - 仔細觀察柱前壓的變化，如果壓力穩定，就可以判斷幫浦的系統沒有問題，請更換新的色譜柱試試。
- 如果是壓力不穩定，一定會影響保留時間。 四、柱前壓不穩定，壓力上下波動的常見原因？ 柱前壓不穩定，壓力上下波動的常見原因？
上下波動的常見原因
引起這種故障最常見的原因是幫浦裡有氣泡，建議用以下的方法排除。 - 如果系統沒有配置脫氣機（二元幫浦），溶劑一定要經常超聲脫氣。 - 脫氣機的效率不夠，特別是用甲醇/水的系統最容易發生。
可以將 a，b 通道串聯；c，d 通道串聯用來延長脫氣的時間，效果非常明顯。 主動閥閥芯汙染。 可以將閥芯取下，用甲醇超聲清洗。
五、為什麼排氣閥裡的過濾芯經常堵塞？ 為什麼排氣閥裡的過濾芯經常堵塞？
如果是排氣閥裡的過濾芯堵塞引起的壓力公升高， 請仔細檢查一下換下來的過濾芯。 正常情況下，乙個過濾芯可以使用 6 個月左右，如果經常更換就有問題。 - 如果過濾芯的顏色發黑， 說明是被柱塞密封墊磨損下來的碎屑堵塞的， 請確認流動相使用的緩衝鹽的濃度是否太高了，是否使用了柱塞清洗裝置。
緩衝液在幫浦頭內部析出的鹽的結晶會加速密封墊的磨損。 - 如果過濾芯的顏色是乳白色的，非常乾淨。說明過濾芯很有可能是被流動相汙染了。
請檢查一下是否使用了過期的溶劑（水，有機溶劑），或質量不好的溶劑。請馬上更換別的品牌的溶劑或使用純淨水（推薦：娃哈哈純淨水）。
如果流動相經過了濾膜過濾，請確認是否使用了正確的，優質的濾膜。建議先不要使用濾膜過濾流動相，看看是否可以解決過濾芯堵塞的問題。 - 如果存放緩衝液或水的溶劑瓶不經常清洗， 該通路會生長藻類， 藻類會汙染整個流路系統和脫氣機的腔體，藻類及其代謝產物也會堵塞過濾芯。
如果發生了這種情況，建議用 60 度的熱水清洗溶劑瓶，並用異丙醇清洗整個管路和脫氣機。 建議一定要用棕色瓶存放緩衝溶液，避光，並且定期清洗溶劑瓶。
六、峰面積或峰高重現性不好，偏差大，可能的原因有哪些？ 峰面積或峰高重現性不好，偏差大，可能的原因有哪些？
如果 hplc 系統配有自動進樣器，這種情況主要是自動進樣器的問題。 - 首先確認柱前壓是穩定的，保留時間的重現性好。 - 將自動進樣器的抽樣速度降低到 50ul/min 以下 (預設值是 200ul/min)。
如果樣品粘度較
大，降低抽樣速度可以極大地改善粘度較大的樣品的進樣精度。 - 如果進樣針或針座有輕微的堵塞，對進樣精度的影響也非常大。 - 如果是手動進樣器， 請確認一定要使用 agilent 配的標準進樣針， 且進樣器的廢液出口要與進樣口水平，避免虹吸的影響。
如果是滿 loop 進樣，建議注射 5 倍 loop 的進樣體積。
七、自動進樣器的針頭或針座經常堵塞，如何處理？ 自動進樣器的針頭或針座經常堵塞，如何處理？
- 如果針頭或針座經常堵塞， 請檢查使用的進樣瓶隔墊。 質量不好和已經破損的隔墊易產生很多碎屑。進樣時，這些細小的碎屑很容易將針頭，針座堵塞。
使用 agilent 的正規隔墊並且經常更換舊的隔墊就可以避免這類問題。 - 如果樣品是經過離心處理的，是用針頭吸取上清液進樣, 請將針頭進樣位置提高。 - 如果針頭或針座發生了堵塞， 可以用以下簡單的辦法處理：
通過 chemstation 診斷介面的更換針頭，針座的程式將其取下，反接到幫浦的出口，用反吹的辦法將其疏通。 大部分是可以順利解決的。 八、紫外檢測器（dad，vwd）訊號波動大，噪音大，光強度檢測通不過，如何處理？
紫外檢測器（dad，vwd）訊號波動大，噪音大，光強度檢測通不過，如何處理？ 檢測器
引起這種問題的因素很多，要一步一步排除，直到找到問題真正原因。 - 確定柱前壓穩定；溶劑（高純度的有機溶劑， 水）使用正確，流動相脫氣良好； - 檢查檢測器的氘燈是否已經到了使用壽命，是否更換過新的氘燈。 - 用異丙醇清洗整個系統，更換過濾芯，排除汙染源。
- 清洗流動池和有關的透鏡（需要工程師去現場服務）
鬼峰」 如何排除？ 九、hplc 出「鬼峰」，如何排除？
hplc 出「鬼峰」 大部分發生在反相體系（甲醇， 乙腈， 水），是溶劑被汙染造成的。還有一種原因是進樣系統有殘留。 - 先執行乙個空白梯度洗脫的方法，從 100%水過渡到 100%有機溶劑，如果「鬼峰」出現， 可以判斷是水被汙染了（水中有藻類 algae 的汙染）。
如果是使用純水機製作的水，這種現象是最常見的。建議使用者更換「娃哈哈」 純淨水。 - 進樣系統有殘留很容易判斷，建議加強或改善洗針程式，延長沖洗 loop 的時間。
十、如何檢視燈的使用時間或用新燈後如何重置"0"? 如何檢視燈的使用時間或用新燈後如何重置"0"?
安捷倫1290液相色譜 操作者使用說明
安捷倫1290液相色譜 g6200系列飛行時間質譜聯用儀 操作規範 一 開機準備 1.根據進度事先同協管員 劉燊 135 預約取得門卡。2.選擇合適的色譜柱，若要更換，必須得到管理員 鄒巨集斌 許可。3.事先檢查溶劑瓶盤上包括洗針溶劑以及流動相溶劑是否能夠使用，以及是否夠用，若需更換流動相，需提早同...
安捷倫液相常見問題
1.常見色譜故障 壓力波動 可能原因 溶劑進口過濾芯堵塞 溶劑未脫氣 幫浦的密封墊老化 出口單向閥失效 主動閥失效。最常見原因 幫浦內有氣泡 2.常見色譜故障 壓力過低 可能原因 溶劑進口過濾芯堵塞 連線管路洩漏或其它備件 幫浦頭密封墊 溶劑或流速改變 主動閥失靈 四元比例閥失靈 單向出口閥失靈 色...
液相色譜問題總結
hplc色譜常見問題 1.用hplc進行分析時保留時間有時發生漂移，有時發生快速變化，原因何在？如何解決？2.液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什麼？3.hplc靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 4.做hplc分析時，柱壓不穩定，原因何在？如何解決？5.我最近更換了另一種牌號的ods柱，雖然分離情...