液相色譜柱壓公升高原因

2022-05-22 01:48:04 字數 689 閱讀 8961

色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓公升高一般是由於柱床內產生了雜質,造成流體阻力加大所致。**其原因,大致有以下幾方面:

1、流動相的前處理

雜質堵塞色譜柱進口濾片,導致壓力公升高。這往往是由於流動相沒有過濾,或雖已過濾但過濾不徹底,使固體雜質滯留於濾板上所造成的。

2、樣品的沉澱

當溶解樣品的溶劑與流動相不一致時,樣品進入色譜柱,有時可能因溶解度降低而沉澱出來,造成壓力公升高。

3、晶體的析出

使用含有緩衝液的流動相時,緩衝液中的無機鹽可能會殘留在體系之中,它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出,造成流體阻力加大、壓力公升高。

4、細菌或黴菌孳生

黴菌在流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長堵塞濾板,導致壓力公升高。所以在使用磷酸鹽緩衝液時一般要現配現用。

5、溶質吸附

當溶質在柱子上有較強的吸附,且所用的流動相難以將它們洗脫時,累積的未洗脫溶質也會造成阻力增大和壓力公升高。

6、流動相更換過度較快

當改變流動相體系時,不徹底的更換使不同性質、互不混溶的流動相存在於同乙個體系之中,也會造成壓力公升高。

7、壓力脈衝

執行過程中,有時會產生系統內壓力的突然公升降。如此所形成的壓力脈衝會造成多孔填料的崩壞和柱床結構的微小變化,填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大,造成壓力公升高。

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