一、將冷凍乾燥的樣品用液氮研磨成粉末，轉移到離心管，加入65℃預熱的2ml ctab抽提液，65℃保溫30 min 以上，間或輕搖混勻；12 000 r／min室溫離心10 min，取上清液；
二、加入等體積的苯酚：氯仿：異戊醇(25：
24：1)，輕輕混勻15 min以上，12 000 r／min室溫離心10 min，用剪去端部約0．8 cm的1 ml吸頭小心將上層液相轉移至一乾淨的eppendorf管中；加入等體積的氯仿：異戊醇（24：
1），顛倒混勻，12000 r/min 離心5 min 。
三、加入2/3體積( )的-20℃預冷的異丙醇，輕輕搖動5 min，顛倒混勻至有白色絮狀沉澱出現，在4℃下12000 r／min離心l0 min，沉澱出dna，去上清；
四、沉澱用75％乙醇／和0.2mol／l kac洗滌2次，每次12000 r／min室溫離心10 min；
五、加入預冷的無水乙醇，輕輕上下顛倒，l2 000 r／min室溫離心20 min，棄乙醇，自然晾乾；加入200μl 去離子水，輕輕敲打使沉澱溶解；
六、加入l μl 10 mg／ml rnase 37℃水浴，保溫l h，去除rna；
dna 提取物於-20℃冰箱貯藏備用．
一、母液配製方法
1、1m tris-hcl 1l配製量
配製方法稱量121.1g tris 置於1l燒杯中。
加入約800ml的去離子水，充分攪拌溶解。
按下表量加入濃鹽酸調節所需要的ph值。
ph值濃鹽酸
7.470ml
7.660ml
8.042ml
將溶液定容到1l。高溫高壓滅菌後，室溫儲存。
注意：應使溶液冷卻後加調定ph值，因為tris溶液的ph值隨溫度的變化差異很大，溫度每公升高1℃，溶液的ph值大約降低0.03個單位。
2、5m nacl 配製量 1l
配製方法稱取292.2gnacl置於1l 燒杯中，加入約800 ml的去離子水後攪拌溶解加去離子水將溶液定容到1l 後，適量分成小份,高溫高壓滅菌後，4℃儲存。
3、0.5m edta 配製量 1l
配製方法稱取186.1g na2edta.2h2o，置於1l 燒杯中。
加入約800ml的去離子水，充分攪拌。
用naoh調節ph值至8.0（約20g naoh）（注意：ph值至8.0時edta才能完全溶解）加去離子水將溶液定容至1l。適量分成小份後，高溫高壓滅菌。室溫儲存。
二、ctab緩衝液配製方法
ctab緩衝液1000ml終濃度
tris-hcl （1mol/l ph8.0100ml100m mol/l
nacl （5mol/l280ml1.4mol/l
edta （0.5mol/l ph8.040ml20m mol/l
ctab20g2% (w/v)
加去離子水將溶液定容至1l。高溫高壓滅菌後，室溫儲存。
計算方法：溶質守恆，溶質的質量在溶液稀釋前後不發生改變。
100m mol/l=0.1 mol/l
20m mol/l =0.02 mol/l
w/v表示質量-體積百分比
ctab法是一種快速簡便的提取植物總dna的方法，
其原理是：採用機械破碎植物細胞，然後加入ctab分離緩衝液將dna溶解出來，再經氯仿－異戊醇抽提除去蛋白質，最後得到dna。
ctab法的版本有很多，不過大同小異。以下是我使用的方法：
1.將植物組織洗淨，用75％的酒精表面消毒4-5min，用去離子水沖洗3次；
2. 將樣品放在滅過菌的研缽中，加入液氮搗碎，迅速轉入1.5ml離心管中，加入600mlctab（或同時加入石英砂和ctab研磨，然後轉入1.5ml離心管中）；
3. 65℃水浴1h（每20min反轉搖勻一次）；
4. 加等體積的氯仿－異戊醇（體積比24：1），或加入苯酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），顛倒混勻；
5. 6500rpm離心30min，取上清於新管中；
6. 重複4，5步驟；
7. 向上清中加入2倍體積的無水乙醇（或2/3體積的異丙醇）沉澱dna，-20℃放置20min或更長時間，或過夜；
9. 加75％的乙醇清洗dna，每次12000rpm 2min，去上清；
10. 風乾後加入40ul的te緩衝液溶解dna；
11. 取2ul溶液電泳檢測。
植物總DNA的提取
採用常規ctab法抽提植物基因組dna，步驟如下 1 取約0.3 g植物葉片，在液氮中研磨成粉末 2 迅速將粉末轉移到2 ml的離心管中，加入4倍體積 w v 預熱的ctab提取緩衝液 含2 巰基乙醇 溫和混勻 3 65 保溫30 60 min，期間不時搖動，使其充分混勻 4 12,000 rpm離...
植物基因組DNA提取試劑盒 北京天根
1 取植物新鮮組織約100 mg或乾重組織約30 mg，加入液氮充分研磨。2 將研磨好的粉末迅速轉移到預先裝有700 l 65 預熱緩衝液gp1的離心管中 實驗前在預熱的gp1中加入巰基乙醇，使其終濃度為0.1 迅速顛倒混勻後，將離心管放在65 水浴20 min，水浴過程中顛倒離心管以混合樣品數次。...
2019質粒DNA的轉化和提取
質粒dna的轉化 1 lb平板 將滅菌後的固體培養基 加入了抗生素 倒入90 mm的培養皿中 約10 ml 氨卞青黴素 amp 儲存液濃度50 mg ml 工作濃度為60 g ml 卡那 kan 儲存液濃度50 mg ml 工作濃度為25 g ml 四環素 tet 儲存液濃度5 mg ml 工作濃度...