⑵.標準曲線的製作：用吸量管分別吸取0.
5、1.0 、1.5、 2.
0 、2.5 ml 5.00 mg/ml標準蛋白質溶液於5只10 ml 比色管中，用0.
9% nacl溶液稀釋至刻度，搖勻。用1 cm石英比色皿，以0.9%nacl溶液為參比，在280 nm處分別測定各標準溶液的吸光度a278記錄所得讀數。
⑶.樣品測定：取適量濃度的待測蛋白質溶液3 ml，按上述方法測定278 nm處的吸光度。平行測定三份。
五、資料處理：
⒈以波長為橫座標，吸光度為縱座標，繪製吸收曲線，找出最大吸收波長。
max=297nm
⒉以標準蛋白質溶液濃度為橫座標，吸光度為縱座標繪製標準曲線。
⒊根據樣品溶液的吸光度，從標準曲線上查出待測蛋白質的濃度。
樣品吸光度：①0.227，②0.223，③0.222
蛋白質濃度（mg/l）：①0.3630，②0.3560，③0.3540
樣品蛋白質溶液濃度c=(0.3630+0.3560+0.3540)/3=0.3583mg/l
六、實驗注意事項：
⒈石英比色皿比較貴重，且易碎，使用時要小心；
⒉繪製標準曲線時，蛋白質溶液濃度要準確配製，作為標準溶液；
⒊測量吸光度時，比色皿要保持潔淨，切勿用手玷汙其光面。
七、思考題：
紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點？受哪些因素的影響和限制？
答：優點是：方法簡單、靈敏、快速、高選擇性，且穩定性好，不消耗樣品，低濃度的鹽類不干擾測定。
缺點是：儀器昂貴，而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的，測定結果存在著一定的誤差，受光源、溶液的ph值、比色皿材質、緩衝介質溶液等因素的影響和限制。
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