利用定氮儀測定樣品中蛋白質含量的操作方法

2022-09-30 08:09:04 字數 930 閱讀 1023

1、樣品消化:

100ml消化瓶中+樣品(固體0.2~2.0g,液體10~20ml)+催化劑(硫酸鉀6g、硫酸銅0.

2g)+濃h2so420ml,混合加熱至澄清透明的藍綠色溶液,即消化液。將消化液冷卻 ,移入100ml容量瓶定容備用。

2、定氮儀的準備

(1)觀察蒸發爐內水位,不能超過不鏽鋼電極。(如果超過,請先把水排完)

(2)關掉排水閥,開啟主電源,開啟冷卻水,開啟綠色蒸汽開關,然後觀察電流錶。燈電流錶指標公升到4a(安培)左右,關掉蒸汽開關。待其回到0a(安培)後再開啟蒸汽開關。

電流公升到4a(安培)後再關掉,這樣反覆開關(0-20)左右直到蒸氣從塑料管內噴出,讓其噴半分鐘左右,關掉蒸氣開關,儀器進入正常的待機狀態。

3、樣品測定

(1)取錐形瓶+2%硼酸10ml+混合指示劑1-2滴放在定氮儀的托架上,在消化管中加入10ml的樣品消化液放到蒸餾器上,按國標加入naoh和ho,設定好蒸餾時間6分鐘,開啟蒸汽開關進行蒸餾。

(2)蒸餾結束後,先取下硼酸接受瓶,再關掉蒸氣開關,然後戴上手套迅速拿下消化管。

(3)接受瓶中的吸收液用0.05mol/lhcl標準溶液滴定至終點。(平行操作兩次)

4、清洗儀器:

樣品測定結束後,用水清洗鹼幫浦多次後關閉冷卻水;開啟蒸氣開關,開啟排水閥取下消化管,使蒸發爐內水全部排完。

5、結果計算:

c(v樣—v空)hcl ×0.014 × f

蛋白質含量100

m樣×(v檢/v總)

式中: c------鹽酸標準溶液的物質量的濃度(mol/l);

v樣-----樣品消耗鹽酸標準溶液的體積(ml);

v樣-----試劑空白消耗鹽酸標準溶液的體積(ml);

0.014-----氮的毫摩爾質量(g/mmol);

m樣------試樣質量,g;

f------氮換算為粗蛋白質的係數。

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