牛奶中蛋白質測定實驗方案 甲醛值滴定法

2022-04-27 09:45:02 字數 1606 閱讀 6117

實驗設計方案

——12製藥1班陳文照陳穎峰

甲醛值滴定法快速測定牛奶中蛋白質含量

一、 實驗原理:

牛奶中蛋白質含量與游離氨基酸含量呈良好的正相關。氨基酸為兩性電解質,在接近中性的水溶液中,全部解離為雙極離子。當甲醛溶液加入後,與中性的游離氨基酸中非解離型氨基反應,生成單羥甲基和二羥甲基誘導體,使氨基酸失去氨基特性,游離的羧基(-cooh)可以用標準鹼溶液滴定,根據鹼溶液的消耗量得出游離氨基酸含量,乘以經驗常數計算出蛋白質的含量。

二、 實驗儀器與試劑

儀器鹼式滴定裝置,1個500ml細口瓶,1個250ml細口瓶,分析天平,3個250ml錐形瓶,1個1ml移液管,1個2ml移液管,1個10ml移液管,1個50ml量筒,1個膠頭滴管。

樣品純牛奶40ml

試劑飽和草酸鉀溶液:330g/l;酚酞指示液:5g/l,用乙醇溶液配製; 質量分數為50%的naoh溶液(約19mol/l);中性甲醛水溶液。

三、 實驗測定方法

1、0.1mol/l naoh標準滴定溶液的配製:用潔淨量筒取1.1ml質量分數為50%的naoh溶液(約19mol/l)於細口瓶中,加入蒸餾水200ml,蓋好橡皮塞,搖勻;

2、0.05mol/l naoh標準滴定溶液的配製:用潔淨量筒取1.1ml質量分數為50%的naoh溶液(約19mol/l)於細口瓶中,加入蒸餾水400ml,蓋好橡皮塞,搖勻;

3、naoh溶液濃度的標定:稱三份鄰苯二甲酸氫鉀khp0.4g至250ml錐形瓶中,加入30ml無co2水溶解,加入2滴酚酞→用待標的naoh溶液來滴定至微紅色,30s不褪色,即終點,記錄用去naoh溶液的體積,計算器準確濃度。

(平衡三份)

4、定量滴定:實驗時準確吸取奶樣10.0 ml於編號分別為①、②、③三個三角瓶中,向三個三角瓶加入0.

5 ml飽和草酸鉀溶液[優點:1]和0.5 ml酚酞指示液,振盪均勻,約2 min後用0.

1 mol l氫氧化鈉標準溶液滴定至粉紅色。然後加入2 ml中性甲醛溶液,再用0.05mol l氫氧化鈉標準滴定溶液滴定至粉紅色,記錄滴定消耗的0.

05 mol l氫氧化鈉標準滴定溶液的毫公升數。

四、 實驗資料記錄

表一氫氧化鈉標準溶液滴定

計算:cnaoh/moll-1=(m/m)khp/v(naoh)×10-3其中:mkhp=204.2

表二蛋白質含量滴定

五、 實驗結果計算

牛奶中蛋白質的含量

x(g/100 ml)=c×v1×0.014×6.38×1005.006v×100

式中:c—氫氧化鈉標準滴定溶液的濃度,單位為mol l;

v1—加入中性甲醛溶液後,滴定試樣消耗氫氧化鈉標準滴定溶液的體積,單位為ml; 0.014—1ml 1 mol l氫氧化鈉標準溶液相當於氮的克數;

6.38—氮換算為蛋白質的係數;

100 5.006—經驗常數,由本方法實測值與國標法(凱氏定氮)測定值相比較計算得出;

v—樣品的體積,ml成品。計算結果保留三位有效數字。

五、實驗方法優點:

1.本方法與現行的國標方法(凱氏定氮法)相比,牛奶中蛋白質的測定時間縮短為3~5 min,提高工作效率約50倍,適用於牛奶中蛋白質的快速定量檢驗。

2.加入草酸鉀可以使其與乳中的鈣生成不溶性穩定化合物,消除鈣離子的影響,有利於終點的判斷。

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