一.實驗原理
酵母核酸中rna含量較多，dna則少於２％。rna可溶於鹼性溶液，當鹼被中和後，可加乙醇使其沉澱，由此即可得到ｒｎａ製品。
二.試劑
1.幹酵母粉。
2.2g／l氫氧化鈉溶液。
3.乙酸。
4.95%乙醇。
5.5%磷酸。
6.濃氨水。
7. 3，5-羥甲苯試劑：取比重1.
19hcll00m1，加入fecl3·6h20100mg及二羥甲苯100mg，混勻溶解後，置於棕色瓶中，此試劑必須在臨用前新鮮配製。市售的3，5-二羥甲苯不能使用，必須用苯純化結晶l-2次，並用活性炭脫色方可使用。
8. 50g／l硝酸銀溶液。
9.鉬酸銨試劑：20ml水溶解2.5克鉬酸銨，加5mo1/lh2so430ml，用水稀釋置100ml，此試劑可在冷處儲存乙個月不變質。
10.氨基萘酚磺酸：取195ml150g/lnahco3溶液(溶液必須透明)加入0.
5克純煉的氨基萘酚磺酸及200g／lna2so4溶液5m1。並在熱水浴中攪拌使固體溶解(如不能全部溶解，可再加200g／lna2so4溶液，每次數滴，但加入量以1m1為限)，此為濃溶液，置冷處可儲存2-3周。如顏色變黃時，須重新配製。
測定時，將上述濃溶液用蒸餾水稀釋10倍．
注：市售的氨基萘酚磺酸為暗紅色，可純煉如下：在100m1熱水(90oc)中溶解15克nahso4 及1克na2so4，加入l g商品氨基萘酚鹼酸，攪勻使其溶解(少量雜質不溶)，乘熱過濾，再迅速使其冷卻。
加1m1濃鹽酸(12mol/l)，則有白色氨基萘酚磺酸沉澱析出。過濾並用水洗固體數次，再用乙醇洗滌，直至純白為止。最後用乙醚洗滌，並將固體放置在暗處，使乙醚揮發。
將此純煉的氨基萘酚磺酸儲存於黃色瓶中。
三.實驗操作
1.rna的提取：置1ｇ幹酵母粉於50m1三角瓶中，加入2ｇ/l naoh溶液10ml，沸水浴加熱30分鐘，並經常攪拌。
待冷卻後加入乙酸數滴，使提取液呈酸性（石蕊試紙），離心10-15分鐘(4000轉／分)。將上清液倒入三角瓶中，加入95%乙醇5ml，
邊加邊攪。加畢，靜置，待完全沉澱，離心l0分鐘，即可得到核酸鈉的白色沉澱。
2.核酸的水解：在含有核酸鈉的離心管中加入5%磷酸4m1，用玻棒攪勻，於酒精燈加熱至沸，1-2分鐘即可。
3.取水解液，按下表所列程式分別鑑定核酸中的嘌呤鹼、磷酸、核醣及脫氧核醣。
嘌呤鹼的鑑定：取試管兩隻，分別標明測定管與對照管，依次加入下列試劑：
注：加濃氨水使呈鹼性可用ph試紙檢定。
加入agno3後，觀察有何變化。靜置5分鐘後，再比較兩管中之沉澱
磷酸的鑑定：取試管兩支，分別標明測定管與對照管，然後依次加入列各試劑：
放置數分鐘，觀察兩管顏色有何不同。
核醣的鑑定：取試管兩支，分別標明測定管與對照管，然後依次加入下列各試劑：
將兩試管放入沸水浴內加熱10分鐘，比較兩管顏色。
脫氧核醣的鑑定：取兩試管分別標明測定管與對照管，然後依次加入下列各試劑:
將兩管同時放入沸水浴內，10分鐘後，觀察兩管顏色之差別。
上述成分的定量測定可參照「動物組織中核酸的提取及測定」
酵母RNA的提取和組分鑑定
試管a 出現白色渾濁現象。有嘌呤鹼存在。試管b 加熱後，出現鮮綠色，且隨著加熱時間延長，顏色越來越深。有核醣存在。試管c 加熱後，出現藍色，且隨著加熱時間延長，顏色越來越深。有磷酸存在。說明rna的組分中有嘌呤鹼 核醣 磷酸。分析 本實驗選用酵母，是因為酵母中rna含量較多，且 便宜。rna可溶於鹼...
釀酒酵母RNA的提取
1.準備好手套，口罩，帽子，實驗過程中經常更換手套。2.使用過的槍頭和離心管要及時更換，避免交叉汙染。3.所用的玻璃器皿 研缽 使用之前在150 的烘箱幹烘4個小時。4.操作動作要迅速。1.取處於生長期中期的新鮮菌液 接種量6 培養8小時 或4 儲存的菌液一毫公升，在離心機中短暫離心。2.去除上清液...
RNA提取中各種試劑的作用
無論是人 動物 植物還是細菌組織，trizol法對少量的組織 50 100 mg 和細胞 5 106 以及大量的組織 1 g 和細胞 107 均有較好的分離效果。trizol試劑操作上的簡單性允許同時處理多個的樣品。所有的操作可以在一小時內完成。trizol抽提的總rna能夠避免dna和蛋白的汙染。...