1.準備好手套，口罩，帽子，實驗過程中經常更換手套。
2.使用過的槍頭和離心管要及時更換，避免交叉汙染。
3.所用的玻璃器皿（研缽）使用之前在150℃的烘箱幹烘4個小時。
4.操作動作要迅速。
1.取處於生長期中期的新鮮菌液（接種量6%培養8小時）或4℃儲存的菌液一毫公升，在離心機中短暫離心。
2.去除上清液，用槍頭吸取100微公升trnzol-a試劑吹打幾次。
3.在事先烘烤完成的研缽中倒入液氮，將菌液打入研缽的液氮中，快速用力研磨。在保持菌液凍結狀態的情況下，用小匙將菌液轉移至新的離心管中。
1：1加入1mltrnzol-a試劑。
4.將勻漿樣品在15~30℃放置5分鐘，使得核酸蛋白複合物完全分離。
5.4℃，12000rpm（~13400xg）離心10分鐘，取上清。
6.1：0.2的比例加入氯仿，蓋好管蓋，劇烈**15秒，室溫放置3分鐘。
7.4℃ 12000rpm（~13400xg）離心10~15分鐘。樣品分為三層：黃色的有機相，中層和上層無色的水相，rna主要在水相中，把水相（約500微公升）轉移到新管中。
8.在得到的水相溶液中加入等體積的異丙醇，混勻，室溫放置20~30分鐘。
9.4℃ 12000rpm（~13400xg）離心10分鐘，去上清。離心前rna沉澱經常是看不見的，離心後在管側和管底形成膠狀沉澱。
10.加入1ml 75%乙醇（由depc水配製）洗滌沉澱。每使用1mltrnzol-a至少用1ml 75%乙醇對沉澱進行洗滌。
（若要儲存樣品可以停止在此步驟，將樣品儲存於-80℃環境。）
11.4℃ 5000rpm（~2300xg）離心3分鐘。倒出液體，注意不要倒出沉澱，剩餘少量液體短暫離心，然後用槍頭吸出，注意不要吸棄沉澱。
12.室溫放置晾乾（注意不要晾的過幹，rna完全乾燥後很難溶解，大約晾乾2~3分鐘左右即可），根據實驗需要，加入30~100微公升depc水，反覆吹打、混勻，充分溶解rna。
酵母RNA的提取和鑑定
一.實驗原理 酵母核酸中rna含量較多，dna則少於 rna可溶於鹼性溶液，當鹼被中和後，可加乙醇使其沉澱，由此即可得到 製品。二.試劑 1.幹酵母粉。2.2g l氫氧化鈉溶液。3.乙酸。4.95 乙醇。5.5 磷酸。6.濃氨水。7.3，5 羥甲苯試劑 取比重1.19hcll00m1，加入fecl3...
酵母RNA的提取和組分鑑定
試管a 出現白色渾濁現象。有嘌呤鹼存在。試管b 加熱後，出現鮮綠色，且隨著加熱時間延長，顏色越來越深。有核醣存在。試管c 加熱後，出現藍色，且隨著加熱時間延長，顏色越來越深。有磷酸存在。說明rna的組分中有嘌呤鹼 核醣 磷酸。分析 本實驗選用酵母，是因為酵母中rna含量較多，且 便宜。rna可溶於鹼...
RNA提取中各種試劑的作用
無論是人 動物 植物還是細菌組織，trizol法對少量的組織 50 100 mg 和細胞 5 106 以及大量的組織 1 g 和細胞 107 均有較好的分離效果。trizol試劑操作上的簡單性允許同時處理多個的樣品。所有的操作可以在一小時內完成。trizol抽提的總rna能夠避免dna和蛋白的汙染。...