酵母RNA的提取和組分鑑定

2021-09-23 01:13:57 字數 816 閱讀 9625

試管a:出現白色渾濁現象。有嘌呤鹼存在。

試管b:加熱後,出現鮮綠色,且隨著加熱時間延長,顏色越來越深。有核醣存在。

試管c:加熱後,出現藍色,且隨著加熱時間延長,顏色越來越深。有磷酸存在。

說明rna的組分中有嘌呤鹼、核醣、磷酸。

分析:本實驗選用酵母,是因為酵母中rna含量較多,且**便宜。rna可溶於鹼性溶液,所以本實驗用0.

04mol/lnaoh溶液來提取。rna不溶於乙醇,可用酸性乙醇使rna從溶液中沉澱出來,再用乙醇洗滌沉澱,可得到rna粗製品。

研磨和naoh使酵母細胞破裂,rna主要存在於細胞質中,所以rna被釋放出來,同時,naoh使蛋白質變性。

加入酸性乙醇,一方面可以中和naoh,另一方面,使rna從溶液中沉澱下來。

rna含有核醣、嘌呤鹼、嘧啶鹼和磷酸等組分,加入硫酸煮沸可使其水解,從水解液中可以測出上述組分的存在。

(1)、強酸使核酸分子的有機磷消化為無機磷,使之與鉬酸銨結合成磷鉬酸銨(黃色沉澱)

po43- + 3nh4+ + 12moo42- + 24h+ ===(nh4)3po4.12moo3.6h2o + 6h2o

當有還原劑(如維生素c)存在時,mo6+被還原成mo4+,再與試劑中的其它moo42-結合成mo(moo4)2,呈藍色,稱鉬藍。所以試管c中會出現藍色。

(2)、rna與硫酸共熱,生成的核醣進而脫水轉化為糠醛,三氯化鐵作為催化劑,可與地衣酚反應,生成綠色化合物,所以試管b**現綠色。

(3)、嘌呤鹼可與硝酸銀反應產生白色的飄零銀化合物沉澱。所以試管a**現渾濁現象。

(4)、不檢測嘧啶鹼,是因為與嘌呤鹼相比,它難以被水解下來,同時它難檢測且現象不明顯。

酵母RNA的提取和鑑定

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