1. 取50~100mg的組織,加入1 ml trizol試劑，用勻漿器打勻(trizol 先放於冰上)。
2. 將勻漿室溫放置5 min。
3. 加入200 μl 氯仿,劇烈**混勻30s，冰上靜置3 min。
4. 12000 rpm，4℃ 離心15 min。
5. 將上清液小心轉移到新的1.5 ml離心管中（取400 μl ），加入等量體積的異丙醇，上下顛倒幾次混勻，室溫下放置15 min。
（此步中注意：不要吸取任何中間層物質，寧缺勿爛。）
6. 12000 rpm， 4℃ 離心15 min 。
7. 小心移去上清液，防止rna沉澱丟失。
8. 用70%乙醇（depc處理的水配製）洗滌1次，加入700 μl乙醇，將rna沉澱彈起，漂洗。（此時rna是不溶解的）
9. 8000 rpm，室溫離心10min。
10. 盡可能徹底地吸走上清，防止rna沉澱丟失。
11. 真空離心乾燥3~5分鐘，或放在室溫下使乙醇完全揮發掉。
12. 沉澱用30 μl depc-h2o溶解。如發現沉澱難溶，68 ℃處理10 min。
13. rna檢測
(1)測定樣品在260 nm和280 nm的吸光值
按1od=40 μg/ ml rna計算rna的產量。
od260/od280在1.8-2.0 。
(2)進行甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳,確定
rna的完整性和汙染情況。
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