一．顯微鏡使用油鏡觀察時需要注意什麼問題，加松柏油的作用：
1、油不要滴太多 ，不要塗開2、在調節焦距的時候要特別注意與載玻片之間的距離不要弄壞工具 3、調節時應該從下往上調節4、在使用油鏡之前，必須先經低、高倍鏡觀察，然後將需進一步放大的部分移到視野的中心。 5、用左眼觀察目鏡，並慢慢轉動細調節器至物象清晰為止。 如果不出現物象或者目標不理想要重找，在加油區之外重找時應按：
低倍→高倍→油鏡程式。在加油區內重找應按：低倍→油鏡程式，不得經高倍鏡，以免油沾汙鏡頭。
6、油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標本上的香柏油擦去，然後再用乾擦鏡紙擦乾淨。作用：用油介質代替空氣介質，增強介質的折射率，使得物像更清晰。
二．簡單染色概念，所用染料特徵：利用單一染料對細菌進行染色，使經染色後的菌體與背景形成明顯的色差，從而能更清楚地觀察到其形態和結構。此法操作簡便，適用於菌體一般形狀和細菌排列的觀察。
常用鹼性染料進行簡單染色，這是因為在中性、鹼性或弱酸性溶液中，細菌細胞通常帶負電荷，而鹼性染料在電離時，其分子的染色部分帶正電荷，因此鹼性染料的染色部分很容易與細菌結合使細菌著色。經染色後的細菌細胞與背景形成鮮明的對比，在顯微鏡下更易於識別。常用作簡單染色的染料有美藍、結晶紫、鹼性複紅等。
三．物鏡的同焦現象及意義：在一般情況下，當物像在一種物鏡中已清晰聚焦後，轉動物鏡轉換器將其他物鏡轉到工作位置進行觀察時，物像將保持基本準焦的狀態，這種現象稱為物鏡的同焦 (parfocal) 。利用這種同焦現象，可以保證在使用高倍鏡或油鏡等放大倍數高、工作距離短的物鏡時僅用細調節器即可對物像清晰聚焦，從而避免由於使用粗調節器時可能的誤操作而損壞鏡頭或載玻片。
四．用不同倍數物鏡觀察微生物：放線菌、酵母菌、多細胞真菌相對較大，用放大40倍的物鏡就可以看了，細菌小，一般都用油鏡。
五．革蘭氏染色的重要步驟：塗片，固定，脫色（最重要）。脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性。
使用老齡菌種產生的後果：著色不均勻，不易區分陰陽性菌，老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。
革蘭氏染色需要注意哪些問題：1.選用活躍生長期菌種染色，老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。
2.塗片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性。3.
脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性。
初染前加碘液後果：因為革蘭氏碘液（媒染劑）的作用是增加結晶紫染料和細胞之間的親和性或附著力，即以某種方式幫助染料固定在細胞上，使不易脫落。初染之前加的話，就會先和染料結合成大分子，使得染料分子不能穿過細胞壁進入細菌的質膜，達不到初染的效果
脫色後，復染前，革蘭氏陰陽性菌的顏色，不復染能否區分陰陽性菌：理論上革蘭氏陽性菌呈紫色，陰性菌無色。復染的目的就是增加無色陰性菌與背景的反差，以便區別於紫色的陽性菌
製片完全乾後才能用油鏡觀察：由於油鏡必須浸沒在香柏油裡面使用，而如果製片沒有完全乾燥，加了油之後，水和油之間便會形成分層，在水油介面之間光線反射給顯微鏡觀察造成麻煩，且水還會汙染物鏡
不用熱固定及熱固定溫度過高的後果：
如果加熱時間過久，那麼菌體可能已經成為灰燼，無法染色，溫度過高，菌種變形。
固定的目的有三個： 1）殺死微生物，固定細胞結構。 2）保證菌體能更牢的粘附在載玻片上，防止標本被水沖洗掉。 3）改變染料對細胞的通透性，因為死的原生質比活的原生質易於染色。
六．製備培養基的一般程式;
稱量——溶解——調ph值——溶瓊脂——過濾分裝——包紮標記——滅菌——倒平板
培養基滅菌的目的：防止培養基汙染;防止外界雜菌汙染。
七．高壓蒸汽滅菌的原理和方法：高壓蒸氣滅菌法是一種迅速而有效的滅菌方法。使用高壓蒸氣滅菌器，利用加熱產生蒸氣，隨著蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之公升高，通常壓力在103.
4kpa(相當舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )時，器內溫度可達121.3℃，維持15～30min，可殺滅包括芽胞在內的所有微生物。
此法常用於一般培養基、生理鹽水、手術器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌。
加水——裝料——加蓋通電——排氣——公升壓——保壓——降壓——取料
高壓蒸汽滅菌法的注意事項：第一，無菌包不宜過大(小於50cm×30cm×30cm)，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹**。消毒前，開啟貯槽或盒的通氣孔，有利於蒸汽流通。
而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品乾燥。消毒滅菌完畢，關閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態。第二，布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。
阻礙蒸汽進入包裹**，嚴重影響滅菌效果。第三，定期檢查滅菌效果。經高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1週為宜。
確定純培養菌落：純培養的確定除觀察其菌落特徵外，還要結合顯微鏡檢測個體形態特徵後才能確定，有些微生物的純培養要經過一系列分離與純化過程和多種特徵鑑定才能得到。對單個菌落進行劃線分離。
劃線分離注意：分割槽劃線，每次滅菌，快速劃線。
八．保證無菌操作;1）保證工作台無菌，在超淨工作台進行2）者手消毒3）種環使用前消毒4）物品標記
九．黴菌染色中酸石炭酸棉藍染色液作用:a)細胞不變形；(b)具有殺菌防腐作用，且不易乾燥，能保持較長時間；(c)溶液本身呈藍色，有一定染色效果。
十．血球計數板計數時能否用油鏡計數;計數時滴在血球計數板上的是菌懸液，相當於在鏡頭和計數板直接加了一層水。水層會降低視野的亮度和顯微鏡的解析度，造成影象不清晰；無法聚焦。
計數誤差**：試劑，儀器，方法誤差。減少計數誤差：樣品純淨，樣品混勻，濃度適中，潔淨計數板。
十一.芽孢染色原理：
芽孢染色法是利用細菌的芽孢和菌體對染料的親合力不同的原理，用不同染料進行著色，使芽孢和菌體呈不同的顏色而便於區別。
芽孢壁厚、透性低，著色、脫色均較困難。因此，用著色力強的染色劑（如孔雀石綠）在加熱條件下進行染色時，染料不僅可以進入菌體，而且也可以進入芽孢，進入菌體的染料可經水洗脫色，而進入芽孢的染色的染料則難以透出，若再用復染液（如沙黃水溶液）染色後，芽孢仍然保留初染劑的顏色，而菌體被染成復染劑的顏色，即菌體和芽孢分別染成紅色和綠色易於區分.a
十二.乾熱（熱空氣滅菌）紫外滅菌的方法，特點，注意事項：
乾熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內的蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。乾熱滅菌所需溫度高（160-170c），時間長（1-2h）。
但乾熱滅菌溫度不能超過180c,否則，包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。
1）乾熱滅菌要注意物品不要堆放過緊，以免妨礙空氣流通，滅菌物品不要接觸電熱乾燥箱內壁的鐵板，以防包裝紙烤焦**。注意溫度的時間控制，70c以下放物、取物2）乾熱滅菌要注意物品不要堆放過緊，以免妨礙空氣流通， 加熱後排除冷空氣，到時降壓回零取物。3）濾除菌要注意各部件滅菌，壓濾時，壓力要適當，不可太猛太快，濾膜要注意清洗儲存。
4）乾熱滅菌過程中，嚴防恆溫調節的自動控制失靈而造成安全事故。電熱乾燥箱具有可以觀察的視窗，滅菌過程中玻璃溫度較高，注意避免燙傷。
紫外滅菌是用紫外線燈進行的。紫外線殺菌機制主要是因為它誘導了胸腺嘧啶二聚體的形成和dna鏈的交聯，從而抑制了dna得複製。另一方面，由於輻射能使空氣中的氧電離為[0],再使o2 氧化生成臭氧或使水氧化生成過氧化氫。
兩者均有殺菌作用。紫外線穿透力不大。不能直視紫外線燈光，更不能在紫外線燈光下工作。
十三.基礎，鑑別，選擇培養基的區別和用途: 1．基礎培養基含有一般細菌生長繁殖需要的基本的營養物質。
最常用的基礎培養基是上面提及的天然培養基中的牛肉膏蛋白腖培養基。這種培養基可作為一些特殊培養基的基礎成分。2.
鑑別培養基是一類含有某種特定化合物或試劑的培養基。某種微生物在這種培養基上培養後，它所產生的某種代謝產物與這種特定的化合物或試劑能發生某種明顯的特徵性反應，根據這一特徵性反應可以將某種微生物與其他中微生物區別開來。主要用於不同型別微生物的快速鑑定，如用來檢查細菌能否產生硫化氫的醋酸鉛培養基。
3.選擇培養基利用微生物對某種或某些化學物質的敏感性不同，在培養基中加入這類物質，抑制不需要的微生物生長，而利用所需分離的微生物生長，從而達到分離或鑑別某種微生物的目的，如分離真菌的馬丁氏培養基。既有選擇作用又有鑑別作用的培養基，如鑑別腸道桿菌的遠藤氏培養基。
2023年經濟師考試中級人力資源備考習題 6
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經濟師《中級人力資源》複習指導 人力資源規劃
一 人力資源規劃的含義 中級經濟師考試人力資源規劃，有時也叫人力資源計畫，是系統評價人力資源需求，從而擬定一套措施，使組織穩定地擁有一定質量和必要數量的人力，求得人員需求量和人員擁有量之間在組織未來發展過程中的相互匹配，以實現包括個人利益在內的組織目標的活動。人力資源規劃是企業實現戰略目標的保證，同...
中級經濟師《人力資源管理》習題
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