微生物日常工作規範

2022-03-29 11:58:16 字數 4998 閱讀 9706

為了規範微生物的日常工作,達到日常工作實事求是、及時準確、優質服務、質量至上的目標,保證日常工作的順利進行,做如下規定:

微生物檢測意識

1. 樹立正確的無菌觀念和檢測人員的素質,是每乙個微生物檢測人員應具備的素質,好的修養素質和積極的工作態度是保證結果準確的基礎,下面的規定規範都是為檢測服務的,如果檢測人員沒有好的素質,這些規定都是虛設,擺設;希望下面的規範是每位檢測人員想要做得,而不是強加在自己身上的緊箍咒。

1 增強自己得生物安全意識,如何保護自己,如何保護樣品,如何無菌操作,有責任心。

2 實驗原理,實驗原理是實驗的精髓,掌握它,就能夠對整個實驗更好的了解深入,學習研究。

3 實驗條件的把握,對實驗的每個條件是否掌握清楚,實驗的關鍵控制點是否清楚

4 實驗結果的把握,乙個實驗結果的出現,首先應該自我分析,並且具備這種分析能力,對異常如何處理或是進一步驗證。

5 具備研究好學心態,檢測工作是乙個相對只是含量較高的職業,高科技飛速發展的今天,許多當時的先進技術不久就陳舊落後,檢測工作也一樣,優秀的化驗員總是虛心好學,善於研究,總是處在科技的前沿。

6 人員素質,積極向上,樂於助人,對工作負責,工作第一等,努力提高自己的工作質量。

微生物檢測

1.實驗前的準備

1.1無菌間

無菌間是微生物實驗的重要環節,關係到實驗結果的準確性,無菌間的使用規範要嚴格要求,保證實驗環境影響因素降到最低。

使用要求:

1、無菌間在使用前,必須先進行清理、臭氧殺菌時間50min、紫外燈殺菌30min.

3、檢測使用的器皿、樣品等物品的進出,通過緩衝窗進行傳遞,使用完畢後紫外燈殺菌30min,開傳遞窗時禁止兩邊同時開啟;

4、檢測人員進入緩衝間後,先更換拖鞋、佩帶無菌帽和一次性口罩,更換衣服,並將其擺放整齊,方可進入無菌間;

5、進入無菌室過程中,依次開啟和關閉各緩衝間的門,以避免空氣流通帶入外界的雜菌;

6、無菌操作前必須使用75%酒精對手部進行消毒,接種有害菌種時必須戴膠皮手套。

7、進行接種所用的吸管,平皿及培養基等必須經嚴格消毒滅菌,開啟包裝未使用完的器皿,不能放置後再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼後使用,剪刀、鑷子每週進行一次高壓滅菌,吸耳球使用完後可浸泡75%酒精中,有發黑現象要移除。

8、從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種於試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。

9、接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出後及開啟試管塞都要通過火焰消毒。

10、接種環或針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環和針與杆的連線處,接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min,再經火焰燒灼。

11、吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。

12、檢驗結束後,所有帶菌的培養基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快清理出無菌間滅菌洗刷;

13、檢驗結束後,人員離開無菌間前,須將無菌間的衛生徹底清理、並用紫外燈進行殺菌。

14、無菌間所用工器具(剪刀、鑷子、膠頭、塗抹棒、托盤盒等)使用完畢後,擺放整齊。

15、滅菌後的無菌間懸掛「已滅菌」標識,正在使用的無菌間要懸掛「使用中」標識。防止檢測人員在未經過滅菌的無菌間中進行微生物檢測。

監控要求:

1、各無菌間每週利用瓊脂平板在工作台上暴露15min,進行環境菌落檢測,並對檢測結果作好微生物空氣沉降檢測記錄;檢測結果大於15個時,應立即查詢原因進行改進,並用來蘇水進行衛生清理消毒。無菌間塗抹空氣每月不定時由微生物組長進行一次,並計入考核。

其它注意事項:

1. 禁止在無菌間內打手機,由於業務需要可在緩衝間內打手機。

2. 實驗過程中穿著整齊,不要出現露頭髮、鼻孔等現象,禁止在無菌間打鬧、喧嘩。

3. 實驗過程中,物品要擺放整齊,實驗產生的垃圾要單獨存放不要亂放,防止汙染實驗樣品。

4. 紫外燈每週五打掃衛生時要用酒精棉球擦拭,防止灰塵阻擋影響殺菌效果。

1.2實驗器具

實驗器具是微生物實驗的乙個關鍵控制點,實驗器具的無菌是保證實驗結果準確的重要因素。

①培養皿,首先應確認是否經過消毒,確認後進行外觀檢查,觀察是否有破損,有破損處廢棄。平皿報紙開啟後要立即使用,剩餘的要再次滅菌使用;滅過菌的平皿最多儲存3天時間,過長要重新滅菌使用。開啟的平皿整齊的擺放到實驗台上備用,發現有破裂的平皿應廢棄;使用時看是否有平皿內部存有雜質、培養基等異物也應立即廢棄;實驗結束後剩餘平皿應重新滅菌後使用。

②剪子、鑷子、吸球等每週消毒滅菌橡塑材料用具以煮沸15min滅菌為宜,高溫高壓處理易失去彈塑性,實驗過程中使用的剪刀鑷子要用包平皿的報紙內側擦淨消毒後用於下乙個樣品檢測。吸耳球使用出現發黑等現象應更換新的。

③玻璃器皿,新購置玻璃器具因含有游離鹼,應在清潔液或2%鹽酸內浸泡24小時,再用蒸餾水清洗。檢驗沾染的油跡、汙濁物等器具可用10%naoh浸泡1小時後,用清水沖洗乾淨。每週洗刷盛生理鹽水的三角瓶子,防止水垢太厚影響滅菌和微生物生長。

④實驗完畢後,使用的實驗器具應立即清洗消毒,防止微生物增長汙染或者傷害到人員。所有衛生用具如拖把、掃帚、抹布、垃圾桶等都要根據汙染區、清潔區、無菌區要求嚴格區分開、並專用,不得相互混淆,衛生用具每週定量用1:20"次氯酸鈉"液消毒浸泡、清洗、涼幹,以免汙染。

⑤在進行各種檢驗時,應避免汙染;遇有場地、工作服等汙染時,應立即處理,防止細菌擴散以免造成汙染。凡吸過菌液的吸管或滴管或染菌的培養皿,應立即放入盛有消毒液的容器內或高壓滅菌處理。工作人員必須每天堅持做好環境衛生工作,防止灰塵飛揚,定期對整個操作環境進行消毒。

1.3藥品的使用

微生物藥品是微生物實驗的乙個關鍵控制點,培養基質量的關係到檢測結果準確的重要因素。

1 藥品的採購,實驗藥品缺少時,由藥品管理員上計畫。微生物藥品常規藥品安「箱」進行計算,不常用藥品安「瓶」進行計算,生化鑑定管安「支」進行計算,每種保留至少1個單位庫存量。

2 藥品取用,藥品取用時到藥品管理員取鑰匙,取用後將藥品櫃鎖死,並將鑰匙歸還給藥品管理員。取用人員發現藥品低於1個單位庫量時,及時通知藥品管理員。

3 將近過期藥品(2個月),生化鑑定管可以退貨,其他藥品抓緊時間使用,過期藥品廢除。

4 新藥品使用時,應注意檢查包裝是否有破損?粉末狀藥品是否有結塊?有無雜質?有無變色等異常。

5 藥品稱量按照使用要求配製,並填寫藥品配製記錄。

6 配製好的藥品按照滅菌要求進行,含糖的培養基滅菌總時間不超過45min,滅菌後觀察培養基的顏色、容量等,並搖勻培養基,放置瓊脂沉澱到底部。

7 冷卻完畢的藥品要標記配製日期,並放到冷藏箱進行儲存備用時間不超過3天。

8 使用前,按要求進行溶解,在溶解過程中要防止二次汙染和溶解不充分;溶解後放到45~50度,放置備用時間不超過4h。

9 使用時,進行冷卻溫度控制到45度左右,過高容易殺死微生物,過低培養基凝固。

10 傾倒培養基時應注意無菌操作,並搖勻培養基。傾倒過多,培養基過厚需氧環境不好,過薄培養基容易乾裂影響檢測結果,配製培養基盡可能安樣品量進行配製,使用後的培養基根據情況廢棄或儲存。

其他事項:

1 劃線等平皿如果劃線破裂,可進行乾燥。

2 配製藥品應注意佩戴口罩,防止損害健康。

3 配製過程中注意保持衛生。

4 帶菌的培養基或特殊培養基應滅菌後清洗。

1.4滅菌鍋的使用

滅菌鍋屬於高壓滅菌容器,安全性和滅菌效果是控制的重點,使用規範如下:

安全事項:由於滅菌鍋屬高壓容器,壓力表要及時計量,操作過程中人員不得離開現場,如有異常問題及時通知相關人員,機修,管道。

1 檢查高壓滅菌鍋的外觀是否正常,壓力表、溫度計是否歸零,各管路閥門是否為關閉狀態。

2 排放物品,注意不要過滿;關鍋並將標示牌轉到已滅菌,調節閥打到排氣狀態。

3 開啟總閥門,開啟排水法,進行管道排水,約1-2min當聽到無水聲時,關閉排水法。

4 開啟進氣閥和出氣閥,進行排氣,此過程是對鍋內空氣進行排氣,防止空氣存在影響滅菌效果。

5 排氣等夾層壓力達到0.5mpa,將調節閥調到滅菌狀態進行滅菌,培養基121℃15min;稀釋液121℃30min;其他特殊培養基安滅菌要求進行滅菌;含糖培養基在鍋內時間不要超過45min.注意事項由於溫度為手控,所以滅菌過程中要注意溫度的變化。

6 滅菌完畢後,填寫滅菌記錄,並關閉進氣閥,排氣閥不用關閉,並等溫度降低60度左右,壓力降到0;如果壓力過大時開鍋有可能打不開,另乙個容易造成液體倒吸使瓶塞蹦出。

7 開鍋後,及時將培養基取出搖勻後冷卻(必要時冷水冷卻),物品取出後負責人要及時清鍋,防止其他物品汙染滅菌物品。

8 滅菌結束後,將排水閥開啟,防止管道積水。

其他注意事項:

1 溫度計無變化:1.溫度計損壞,2.電源未開啟,3.探針堵塞,4.調節閥損壞不進氣。

2 鍋門打不開:1.壓力過大,2.調節閥損壞,內部負壓。

3 管道漏氣:找管道維修。

4 滅菌鍋的每週清潔汙物及凝結水同時清洗;滅菌鍋要保持乾淨並無殘留物(尤其濾器)以防止生鏽保證最大熱傳遞和橡膠用具以蒸沸15min滅菌為宜,高溫高壓處理易失去彈性。

5 容積控制:採取稱中法測定蒸發量,體積100vml稀釋起重量為101vg,高壓夠體積偏差不超過1%。

1.5培養箱的使用

培養箱的溫度、濕度控制是微生物控制的關鍵點。使用規範如下:

1 外觀檢查,有無噪音,是否放平穩,有無故障。

2 檢查溫度設定是否為檢測要求溫度?顯示溫度與設定溫度是否在允許波動範圍內;

3 為了保持培養箱內部濕度,可在培養箱內放乙個盛水的小燒杯,防止培養基乾燥。

4 培養箱內物品擺放整齊,但不要過緊密,防止溫度,空氣等環境之間的差異對檢測結果的影響,並關好箱門(輕開輕關)。

5 每天對培養箱內溫度計和顯示溫度進行比較,填寫儀器裝置使用記錄,對較大差異的查詢原因進行處理。

6 保持好培養箱內衛生,對有異味的培養箱進行通氣,並每週對培養箱進行消毒殺菌,培養後的平皿及時清理,防止黴菌或其他微生物累積。

7 冰箱每週進行除霜清理,存放的物品做好記錄,對不用的物品及時清理。

2.樣品接收

2.1送檢樣品的處理

微生物接受樣品,就是檢驗工作開始之時,樣品接受、交接環節是檢驗工作的第一環節,關係到檢驗工作質量和效率。

樣品接收時,必須一看、二摸、三聞、四核

1. 首先檢視樣品外包裝以及樣品外觀情況。

2. 觸控樣品的物理狀態,尤其是冷藏冷凍樣品的溫度感、凍結狀態。

微生物總結

二 免疫學基本理論要點 免疫學的主要內容 共7章,重點在1 抗原 2 免疫球蛋白 5 免疫應答 章 1 免疫概念以及免疫系統的功能 免疫 指機體免疫系統識別自身與異己抗原,並通過免疫應答排除抗原性異物,以維持機體生理平衡的功能。p5 免疫系統功能 免疫防禦 排斥外來抗原性異物 免疫自穩 清除衰老 損...

微生物小結

微生物綜合實驗小結 0743002222 陸健 本組組員 謝桂琴王前堂陸健 本次微生物綜合實驗分為三部分,分別是抗生素效價測定 水中細菌總數測定以及濾膜法測定水中大腸桿菌菌群。實驗中主要涉及的微生物實驗知識有培養基製備 抑菌實驗 平板菌落計數 濾膜法過濾菌體等基本實驗技能。第乙個實驗抗生素效價測定時...

微生物觀察

深圳大學實驗報告 課程名稱生命科學基礎實驗 實驗專案名稱 微生物的顯微觀察 學院機電與控制工程 指導教師何曉陽 報告人 陳攀穗學號 2014110150 實驗報告提交時間 2015.4.8 一 實驗目的與要求 1.了解常見的微生物及其與人類生產生活的關係加深對微生物分布廣泛性的認識 2.學習細菌 酵...