實驗一母液的配置與儲存
一 、實驗目的
通過配置ms培養基母液，掌握母液的配置和儲存方法
二 、實驗原理
配置培養基時，為了使用方便和用量準確，通常採用母液法進行配置，即按培養基配方中各試劑的用量，擴大若干倍後再準確稱量分別先配製成一系列的母液置於冰箱中儲存，使用時按比例吸取母液進行稀釋配置即可。
三 、實驗材料、試劑和儀器裝置
1.試劑
nh4no3 ,kno3 ,kh2po4 ,cacl2·2h2o ,mgso4·7h2o,feso4·7h2o
na2-edta,mnso4·4h2o,znso4·7h2o,h3bo3,ki,na2moo4·2h2o
cuso4·5h2o,cocl2·6h2o,肌醇，甘氨酸，鹽酸硫胺素，鹽酸吡哆醇，
菸酸，蒸餾水
2.儀器裝置
電子天平，燒杯（50ml、100ml、500ml、1000ml）量筒（1000ml、100ml、25ml），容量瓶(1000ml、500ml、100ml)，試劑瓶，玻璃棒數支，藥芍，稱量紙等。
四、 實驗步驟
1 大量元素母液的配製
先用量筒稱量適當蒸餾水放入500ml燒杯中，按照配方表中用量依次分別稱取：nh4no3 ,kno3 , kh2po4 , mgso4·7h2o, cacl2·2h2o，待第一種化合物完全溶解後再加入第二種化合物，當最後一種化合物完全溶解後，將溶液轉移至500ml容量瓶中，用蒸餾水定容至500ml，然後轉移至細口試劑瓶中，貼上標籤，註明母液名稱，放大倍數，配製日期，配製人，並置於冰箱中儲存備用。
2 微量元素母液的配製
按照配方表中用量用電子天平依次稱取mnso4·4h2o, znso4·7h2o
h3bo3, ki, na2moo4·2h2o，cuso4·5h2o, cocl2·6h2o,按製備母液i的方法逐個溶解，轉移至容量瓶中，然後定容至500ml，轉入細口試劑瓶中，貼上標籤，註明母液名稱，放大倍數，配製日期，配製人，並置於冰箱中儲存備用。
3鐵鹽母液的製備
把feso4·7h2o和na2-edta分別置於適量蒸餾水中，加熱攪拌使之完全溶解，保持加熱，把feso4倒入na2-edta溶液中並攪拌，接近沸騰時停止加熱，冷卻後調ph到5.5，將溶液轉移至500ml容量瓶中，用蒸餾水定容至500ml，轉入細口試劑瓶中，用力振盪1～2min，貼上標籤，註明母液名稱，放大倍數，配製日期，配製人，並置於冰箱中儲存備用。
4有機化合物母液的製備
按配方表中用量依次稱取：維生素b, 菸酸, 甘氨酸，用蒸餾水溶解後定容後，轉入細口試劑瓶中，貼上標籤，註明母液名稱，放大倍數，配製日期，配製人，並置於冰箱中儲存備用。
5植物生長物質母液製備
naa母液:準確稱取10mg,用少量1mol/l naoh溶解後加蒸餾水定容至100ml,即配製成0.1mg/ml的naa母液，轉入細口試劑瓶中，貼上標籤，註明母液名稱，放大倍數，配製日期，配製人，並置於冰箱中儲存備用。
6–ba母液配製方法相似，濃度為2mg/ml。
五、試驗結果分析及注意事項
配製母液時注意藥品只能出不能進。
實驗二培養基的製備與滅菌
一 、 實驗目的
學習母液法配製培養基以及掌握培養基滅菌的方法
二 、 實驗原理
組織培養所用的培養基含有植物生長所必需的各類營養物質，同時也是微生物繁殖的極好場所，因此必須對培養基滅菌處理，以確保無菌操作的順利進行。
三 、 實驗材料、試劑和儀器裝置
1.試劑： 瓊脂，蔗糖，蒸餾水，1mol/l naoh,各類母液
2.儀器裝置：電子天平，燒杯，量筒，移液管，玻璃棒，藥芍，稱量紙，ph試紙，錐形瓶瓶等。
四、 實驗步驟
1.將所需的各種母液按順序放好，將潔淨的各種玻璃器皿放在指定位置
2 .取50ml燒杯乙個，將大量、有機、肌醇、鎂鹽，鈣鹽、按配方表中的用量依次稱取並倒入燒杯中。
3 .取 50ml燒杯乙個，將微量和鐵鹽按配方表中的用量稱取並倒入燒杯中。
4.取瓷盆乙個，加入300ml蒸餾水，置於電磁爐上加熱，稱量瓊脂6克，白砂糖 40 克，依次倒入瓷盆中，待瓊脂和白砂糖完全溶解後，將稱量好的所有母液倒入瓷盆中，用玻璃棒不斷攪拌，並定容至 1 l。
5 .用1mol/l naoh調ph 至 5.8
6. 把培養基分裝到廣口瓶中，用牛皮紙包紮好，待滅菌。
7.培養基滅菌
五、 試驗結果分析及注意事項
配製培養基前先大致估計一下藥品數量，不夠時提前配製。
培養基滅菌時注意要放乾淨冷空氣。
實驗三無菌植株的建立
一 、 實驗目的
通過實驗，初步掌握外植體材料消毒及在超淨工作台上接種的方法與注意事項
二 、 實驗原理
植物細胞具有全能型，其外植體接種在無菌的人工培養基上，能長成完整的無菌植株。
三 、 實驗材料、試劑和儀器裝置
超淨工作台、培養基，大號鑷子，剪刀，酒精燈，噴霧器
四、 實驗步驟
1.準備開啟超淨工作台，用紫外燈燒2h,關閉紫外燈，將滅菌溶液，無菌水，豌豆，大燒杯等放入超淨工作台，在台上點燃2個酒精燈。
2.滅菌在超淨工作台上取經浸泡處理的豌豆，先用84消毒液搖晃清洗清洗3次，每次5分鐘，後用0.5%hgci搖晃清洗，處理2次，每次5分鐘。後用無菌水搖晃清洗3次。
3.接種將滅菌處理好的材料在超淨工作台上用鑷子靠近酒精燈的外焰放入傾斜的錐形瓶杯中，每個瓶內裝5粒豌豆，接種過程中錐形瓶應一直保持傾斜，直到接種完畢蓋上棉塞。
4.接種完畢後，用棉線綁好用鉛筆標上製作人編號。
五、 試驗結果分析及注意事項
注意事項： 做本次實驗時在豌豆滅菌時注意公升汞、酒精滅菌時間應嚴格注意，過長會對種子活性造成影響
實驗**見圖1。
實驗四豌豆根、莖、葉愈傷組織的建立
一 、實驗目的
通過誘導豌豆根、莖、葉形成愈傷組織學習愈傷組織的建立方法
二 、實驗原理
細胞全能性，已經分化的植物細胞在適宜條件下可脫分化形成愈傷組織。
三 、實驗材料、試劑和儀器裝置
超淨工作台、無菌豌豆苗、培養基、剪刀、噴霧器
四、實驗步驟
準備歩驟同實驗三
接種在超淨工作台外用酒精將裝無菌豌豆苗的錐形內滅菌。用滅菌後的彎頭剪刀分別剪取長勢良好，無病菌汙染的豌豆的根、莖、葉每個錐形內各接一種，每種接3瓶。
標記將接種好的錐形瓶標記，根為r,葉l,莖s。標記好後放置在暗處。
五、 試驗結果及注意事項
注意事項 1、接種根時注意取接近根尖但不能直接是根尖部分
2、接種時總體為接種材料大小越少越好，越有利於愈傷組織的形成
3、接種時可以適當按壓材料使之更有利於愈傷組織的形成。
實驗結果見圖2圖2
植物組織培養實驗報告
植物組織培養實驗一 培養基的配製 學院 風景園林院學號 131001226 姓名 張晟菓1 實驗目的 1.掌握植物組織培養實驗室常用玻璃器皿的清洗及包紮方法。2.掌握培養基的配置方法。3.掌握高壓蒸汽滅菌的操作方法。二 實驗原理 鑑於微生物種類及代謝型別的多樣性，用於培養微生物的培養基的種類也很多。...
植物組織培養實驗指導
2014.3 附錄培養基母液的配製 實驗老師準備 一 實驗目的 掌握培養基母液配製的方法。二 實驗原理 配製培養基時，為了使用方便和用量準確，通常採用母液法進行配製，即將所選培養基配方中各試劑的用量，擴大若干倍後再準確稱量，分別先配製成一系列的母液置於冰箱中儲存，使用時按比例吸取母液進行稀釋配製即可...
植物組織培養實驗指導
2013.3 附錄培養基母液的配製 實驗老師準備 一 實驗目的 掌握培養基母液配製的方法。二 實驗原理 配製培養基時，為了使用方便和用量準確，通常採用母液法進行配製，即將所選培養基配方中各試劑的用量，擴大若干倍後再準確稱量，分別先配製成一系列的母液置於冰箱中儲存，使用時按比例吸取母液進行稀釋配製即可...