實驗報告
課程名稱：植物生理學實驗指導老師：翁曉燕成績
實驗名稱：植物組織培養實驗型別: 定量
同組學生姓名：胡季巨集
一、實驗目的和要求
三、實驗材料和主要儀器
五、實驗資料記錄和處理
七、實驗討論和心得
二、實驗內容和原理
四、實驗方法和步驟
六、實驗結果和分析
一、實驗目的和要求
掌握植物組織培養的基本理論和技術，明確組培的作用與應用。
二、實驗內容和原理
1、組織培養的理論基礎——細胞全能性。植物的每個細胞都包含著該物種的全部遺傳資訊，從而具備發育成完整植株的遺傳能力。在適宜條件下，任何乙個細胞都可以發育成乙個新個體。
2、利用母液配製培養基——防沉澱、防失活、合適ph、高壓滅菌。
3、選取無菌外植體接種。在無菌條件下，將滅過菌的材料，經適當切割，轉移到培養基上。
4、控制條件下培養，觀察成苗全過程。
三.實驗材料和主要儀器
實驗材料：花菜
主要儀器裝置：無菌（光照）培養室、超淨工作台，高壓滅菌鍋、ph計等。
四、實驗方法和步驟
（一）配製培養基
ms + naa 0.1mg/l + 6-ba 1.0mg/l
母液配製大量元素——n、p、k、ca、mg、s
微量元素——i、b、mn、zn、mo、cu、co
鐵鹽——fe
有機化合物——肌醇 、菸酸、鹽酸吡哆醇 、鹽酸硫胺素、甘氨酸
植物生長調節劑——naa、 6-ba
500ml母液各組分用量及配製方法：
1、先在搪瓷量杯中加入約500ml蒸餾水，依次加入下列組份並攪拌溶解：
大量元素(10×) 50mlcacl2 (100×) 5ml
微量元素 (100×) 5ml鐵鹽(100 ×) 5ml
肌醇 (100 ×)5ml菸酸 0.5mg /ml 0.5ml
鹽酸吡哆醇(0.5mg /ml)0.5ml 鹽酸硫胺素(0.1mg/ml)0.5ml
甘氨酸 (2.0mg /ml) 0.5ml
naa (0.1mg /ml) 0.5ml 6-ba(1.0mg /ml) 0.5ml
蔗糖 15.0g
2、定容到500ml。
3、測 ph 並調到5.8。
4、加瓊脂5.0g，加熱熔化(煮沸2次)，補充蒸餾水至500ml刻度液面。
5、分裝到試管。每人共分裝2管，每管培養基液面高度2-3cm。擰蓋密封。以大實驗台（同學代表名）為批次標記。
6、高壓蒸汽滅菌。121 ℃ 15-20 min 。本滅菌鍋從進到出 2 hr。
7、冷卻凝固，4－10 ℃下貯存，為下次備用。
（二）接種
1. 取愈傷組織和製好的培養基，放在超淨工作台上，以便取用。
2. 點燃酒精燈。用70%的酒精棉球擦拭雙手及檯面。
3. 將鑷子和解剖刀浸於95%酒精中，取出鑷子，在酒精燈外焰上灼燒滅菌，然後夾取一張無菌濾紙置於酒精燈前方。用鑷子取出愈傷組織，於濾紙中間；將解剖刀在酒精燈外焰上灼燒片刻，待刀冷卻後，將愈傷組織切割成0.
5-1cm2的小塊，取2—3塊接種於培養基上（操作時盡量靠近酒精燈火焰）。
4. 接種完畢，清理檯面。
五、實驗資料記錄和處理
培養一周後：
6、實驗結果和分析
結果一周的培養，植物組織經過了脫分化成為愈傷組織，並部分再分化形成一定的植物器官。
七、實驗討論和心得
1.本次實驗要著重注意培養基的配製方法和無菌操作的一些步驟，保證嚴格無菌，使組織培養順利地進行下去。否則非常容易造成汙染，導致實驗失敗。
2.本實驗中所加激素的量也需精確控制，否則會影響愈傷組織的分化。
3.植物組織培養是許多技術，如快速脫毒、轉基因技術等的基礎，掌握組培的技術是十分重要和必要的。
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