線栓法製備大鼠局灶性腦缺血模型（mcao）
一、 mcao模型製備
選用體質量（260-330）g大鼠，用2%戊巴比妥納ip麻醉（45mg/kg），仰臥固定於手術台上。減去頸部毛髮，75%酒精棉球擦拭消毒。於頸正中偏右1cm處切口（口長2cm左右），剪開淺筋膜，分離乳突泡，顯露右側胸鎖乳突肌，鈍性分離胸鎖乳突肌與胸骨舌骨肌間的肌間隙，暴露右側頸總動脈（cca）和迷走神經。
鈍性撕開頸動脈鞘，分離cca，注意避免損傷迷走神經。分離右側頸外動脈（eca）、頸內動脈（ica），結紮eca近心端［不必至顱底找出ica顱外段的分支翼顎動脈（ppa），並將其分離結紮］，結紮cca近心端，並在其分叉處打一活結備用。用動脈夾夾住ica，在cca分叉處剪一小口，插入預先處理好的魚線（0.
26mm），將預製的活結稍打緊（防止魚線脫出）。鬆開夾住ica的動脈夾，將魚線緩慢向ica插入（向內上方的角度插入，否則易誤入ppa），目視魚線頭部進入ica，而不是ppa（如果誤入ppa，因魚線不能入顱，插入長度一般不超過10 mm則被阻）。繼續將魚線緩慢向ica入顱方向推進，插入長度約（18.
5±0.5）mm(從cca分叉處計算)，微遇阻力時停止。紮緊預製活結，以防止ica內的線栓移動和出血，最後逐層縫合淺筋膜、**（暴漏線頭1cm，剪除魚線多餘末端）。
慶大黴素肌注預防感染,術後保溫至動物清醒。
阻斷3h後實行再灌注，再灌注（抽出魚線約1cm）24h或48h後處死大鼠，進行相關指標的測定。
二、mcao模型的評價
1）大鼠甦醒後，按longa評分法（神經學檢查分5個等級，0分：正常，無神經功能缺損；1分：左側前爪不能完全伸展，輕度神經功能缺損；2分：
行走時，大鼠向左側轉圈，中度神經功能缺損；3分：行走時，大鼠身體向左側傾倒。重度神經功能缺損；4分：
不能自發行走，有意識喪失。大於0分者入選
2）homer's徵陽性
3）右側眼球灰白發暗（插到位後大鼠心跳呼吸加快）
4）取腦時無蛛網膜下腔出血
5）腦組織ttc染色有缺血病理改變
三、測定指標
1、參考bederson評分法略作修改，作為評分標準，具體如下：
（1） 提尾懸空大鼠，手術對側前肢無屈曲、腕屈及同時腕屈與肘屈分別計為0、1與2分。
（2） 大鼠行走路徑向手術對側無偏移、有偏移及偏移呈圓形甚至原地旋轉分別計為0、1與2分。
（3） 刺激大鼠手術對側頰須，反應靈敏、不靈敏及沒有反應分別計為0、1與2分。
（4） 動物軀體向手術對側無扭轉、偶爾扭轉及頻繁扭轉分別計為0、1與2分。
（5） 總分為8分。
指標觀察：分別於再灌注6h及24h進行1次神經病學評分，以24h內2次評分的平均值作為評價指標。
2、缺血3h再灌注24h或48h時，各組大鼠麻醉，斷頭取腦，放於-20度變硬，由前向後做2mm連續冠狀切片（5個）（去除嗅球、小腦和低位腦幹，然後水平切4刀分成5片。第一刀在腦前極與視交叉連線中點，第二刀在視交叉部位，第三刀在漏斗柄，第四刀漏斗柄與腦葉尾極之間），置於2%ttc溶液中，37度恆溫**孵育30min後濾除2%ttc溶液。用10%甲醛中避光固定（初步24h左右），拍照，用motic images plus 2.
0 顯微圖象分析系統計算梗塞面積（粉紅色為未受損的正常組織，而梗塞區則因線粒體損害不染色，呈白色）。因為腦水腫對其梗塞體積有影響，故採用公式對其修正。具體公式如下：
腦梗塞灶體積（mm3）=總梗塞面積×腦片厚度（2mm）
水腫修正後的腦梗塞灶體積（mm3）=梗塞體積×對側半球體積/同側半球體積
梗塞率（%）=水腫修正後的腦梗塞灶體積/雙側大腦半球體積×100%。
或者將每個腦平面（5片10面）投射到密度均一的鋁箔上，剪下梗塞面積，以「重量求面積法」計算缺血組織重占總腦重的百分比作為梗塞範圍的大小。
3、腦指數和腦組織水分含量
3.1腦指數：斷頭取腦，冰冷生理鹽水洗淨，濾紙吸盡水分，稱重。指標測定：腦指數=腦濕重/體質量（mg/g）
3.2 腦組織水分含量：用乾濕重法測定腦組織水分含量。取對側腦切片，稱取濕重，染色後，放入105℃烘箱12h烘至恒重，稱取乾重，計算腦組織含水量。
指標測定：腦組織含水量=（腦片濕重-腦片乾重）/腦片濕重×100%
mcao模型分析
線栓法的另乙個缺點是模型的操作需要乙個熟練過程，不同的操作者之間的誤差很大，只有熟練者才能複製出穩定的梗死灶。
影響因素
1、體溫實驗中溫度過高或過低均會影響神經細胞損傷。37℃,並在溫度感測器塗上潤滑膏或凡士林,插入直腸記錄身體深部體溫的變化。
2、血糖腦缺血時動物血糖輕度公升高，而高血糖本身就可使腦梗死的面積明顯增加。為了控制動物血糖
水平,在實驗前禁食12~24小時,但不禁水。
3、體重》350 g的大鼠顱內血管增粗，難以充分阻斷血流；體重<240 g的大鼠有時難以插入栓線，因此大鼠的體重以260~320 g為宜。
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