2017.12.28崗位培訓課件
微生物知識培訓
一、概述
1、概念： 微生物是一種肉眼不能直接看見，必須借助光學顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百倍、幾千倍甚至幾萬倍才能觀察到的微小生物的總成。
特點：具有形體微小、結構簡單；繁殖迅速、容易變異；種類繁多、分布廣泛等特點。
2、作用：絕大多數微生物對人和動物是有益的，廣泛應用於農業、食品、醫藥、釀造、化工等行業，例如與我們日常生活密切相關的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。
3、危害：微生物中也有一部分能引起人及動、植物發生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染病（感冒、痢疾、結核、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。
從藥品生產的衛生學而言，微生物對藥品的原料、生產環境和成品的汙染是造成生產失敗、成品不合格的重要因素。
4、分類：
（1）細菌 ：細菌是一類細胞細而短、結構簡單、細胞壁堅韌，以二**方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。
（2）真菌：真菌是一類有細胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數為單細胞，多數為多細胞，能進行無性或有性繁殖的一類真核細胞型微生物。
黴菌是絲狀真菌的俗稱，意即「發霉的真菌」，它們往往能形成分枝繁茂的菌絲體，但又不象蘑菇那樣產生大型的子實體。
酵母菌是單細胞真核微生物，酵母菌在自然界中分布很廣，尤其喜歡在偏酸性且含糖較多的環境中生長，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果園土壤中最為常見。
真菌生長的最適的生長溫度為22～28℃，最適的ph值為4～6。其繁殖能力強，但生長速度比細菌慢，常需1‐4週才形成菌落。真菌對熱的抵抗力不強，一般加熱60~70℃1小時即被殺死，對乾燥、日光、紫外線和一些化學消毒劑有抵抗力，但對2.
5％碘酒、10％甲醛則較敏感。
（3）病毒：病毒體積微小，大多數病毒只有採用電子顯微鏡將其放大數千、數萬倍才能看見。
二、消毒與滅菌
1、消毒：殺死物體上病原微生物的方法,並不一定能殺死含細菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。
消毒劑：5%甲酚皂溶液、0.1%新潔爾滅溶液、75%乙醇溶液
2、滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽孢在內的全部病原微生物和非病原微生物。
（1）輻射滅菌法
紫外線作用於dna，使細菌dna的複製和轉錄受到干擾，導致細菌變異或死亡。常用於室內的空氣消毒。
電離輻射對各種細菌均有致死作用。常用於大量一次性醫用塑料製品的消毒和食品的消毒。
微波是一種波長為1mm～1m的電磁波，可穿透玻璃、塑料薄膜及陶瓷等物質，但不能穿透金屬表面。多用於檢驗室用品、無菌室的用具的消毒。
濾過除菌法：用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去，以達到除菌目的。濾菌器含有微細小孔≤0.22微公尺,只允許液體或氣體通過, 而大於孔徑的細菌等顆粒不能通過。
適用範圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。
（2）化學消毒滅菌法
許多從而發揮防腐、消毒及滅菌的化學藥物能影響微生物的化學組成、物理結構和生理活性，作用。潔淨室(區)應定期消毒，使用的消毒劑不得對裝置、物料和成品產生汙染。消毒劑品種應定期更換，防止產生耐藥菌株。
三、gmp與微生物
1、2023年版《中國藥典》四部微生物限度檢查法規定的檢查專案包括需氧菌總數、黴菌和酵母菌總數、控制菌檢查。 除另有規定外，需氧菌培養溫度為30-35℃，黴菌、酵母菌培養溫度為20-25℃，控制菌培養溫度為30-35℃。
2、微生物汙染導致藥物變質的因素有以下幾個方面：
（1）微生物汙染數量：在藥品生產中應將微生物汙染數量控制在最低限度，這就需要採取綜合措施。
（2）微生物生長的營養因素：許多藥物成分，都有微生物生長所需的碳源、氮源或無機鹽類。生產用水（純化水、注射用水）亦能支援微生物生長。
（3）ph值：ph值為中性時最適合微生物生長。某些微生物在ph3.5或ph8.0～9.5仍能生長。
（4）溫度：對於微生物汙染引起藥物變質的溫度，不同的微生物有不同的最適溫度。根據微生物生長的最適溫度不同，可以將微生物分為嗜冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的型別。
對嗜溫微生物來說，可將藥物儲藏在陰冷、乾燥處。
3、微生物汙染途徑
（1）空氣中的微生物
空氣本身並不產生汙染，因為空氣不含必要的水分和營養，不是適合微生物生長繁殖的天然環境，但是一般的大氣環境仍含有不少的細菌、黴菌和酵母菌。
空氣是侵襲我們產品的汙染物的主要媒介。因此保持空氣潔淨是極為重要的。
在藥品生產中，減少空氣中微生物數量的方法有多種，常用的有以下3種方法： 空氣潔淨技術採用的過濾方法：過濾是最常用的方法。
過濾介質種類很多，例如：纖維素、玻璃棉或人造纖維等。空氣淨化裝置可用於整個房間如無菌操作室，也可只限於操作區域區域性如超淨工作台。
化學消毒方法採用消毒劑作用於室內空氣和物體表面。紫外線照射方法採用紫外線對室內空氣進行照射。
（2）製藥用水中的微生物
工藝用水在製藥企業防止汙染及作為製藥用水方面至關重要。因為它不僅直接用於產品的生產，而且也用於清洗裝置和用於冷卻。藥品微生物汙染的關鍵環節在於工藝用水，因為水是微生物生長代謝的乙個必要成分。
中國藥典收載了純化水和注射用水的質量標準。
※2023年版《中國藥典》二部純化水
經薄膜過濾法處理，採用r2a瓊脂培基,3035℃培養不少於5 天，依法檢查，1ml供試品中需氧菌總數不得過loocfu。
常用的對水消毒的方法，以下3種：
化學消毒劑方法對水的消毒以化學消毒劑方法較常用，效果也最好。常使用次氯酸鈉或通氯氣。
膜過濾法適用於水系統的連續迴圈處理。
紫外線照射法在水系統中應用紫外線照射消毒，適用於需要特殊處理的水（如光學透明度要求高），一般在末端之前。
（3）廠房建築與裝置表面的微生物
廠房建築物的內表面，以及裝置表面、容器內外表面等，都可以是微生物寄生存的地方。表面因塵埃微粒和微生物由空氣傳播的回降而受到汙染。
乙個表面看起來很乾淨，而實際上已經被千百萬個微生物所汙染，除非已經做了正確的消毒滅菌。
（4）人體的微生物
微生物廣泛分布於自然界，人體與自然環境接觸，當然也不能例外。凡是人體體表**與外界相通的腔道如口腔、鼻腔、腸道、眼結膜、泌尿生殖道等均存在不同種類的微生物，其中有些微生物可以長期寄居在人的體表、**和黏膜上。
人員汙染的途徑和方式：人的頭髮和**；水滴；衣著、化妝品和珠寶手飾
生產過程中人們所引起的混雜和誤差
（6）微生物汙染導致藥物變質的因素
藥品的生產、儲存、使用的全過程，都有因微生物汙染而導致藥物變質的因素。而藥物變質，一般需要很高的微生物汙染程度。也就是說，微生物面廣、量大的繁殖才出現顯著的易被覺察的損壞現象。
①微生物汙染數量：控制在最低限度
②微生物生長的營養因素：碳源、氮源或無機鹽
③ph值：ph值為中性時最適合微生物生長
④溫度：可以將微生物分為嗜冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的型別
（7）防止微生物汙染的原則
了解汙染源對藥品生產全過程可能造成汙染的**，進行深入的了解研究，從而設計乙個完好的生產工藝，制定規章制度和標準操作規程，從各個環節採取消毒和衛生措施來防止微生物汙染，使產品達到所要求的衛生學質量，包括穩定性及各種微生物引數。
在藥品生產過程中，應按gmp要求不斷進行各項微生物微生物監測。 例如：對潔淨室空氣中的浮游菌、沉降菌的監測；對無菌裝置清潔滅菌的驗證；對非無菌藥品進行細菌和活菌數測定和病原菌的限制性檢查等。
（8）藥品生產人員衛生注意事項
建立生產人員健康檔案
培養藥品生產人員良好的個人衛生習慣
潔淨區生產人員要求
潔淨區工作人員要盡可能少而精
操作人員在潔淨區動作要避免劇烈運動
避免不必要的移動
四、潔淨區環境監測
（1）潔淨室劃分為abcd四個級別
（2）潔淨室測量的級別和專案
測試專案都與潔淨度相關，潔淨室必測專案：風速、風量、高效過濾器檢漏、潔淨度、壓力等；
與潔淨度和氣流相關，非必測試專案：自淨時間測試、壓差等；
與氣流無關的測試，屬於環境因素：照度、均勻度、雜訊、溫濕度等。
（3）潔淨室微生物測試方法
靜態測試適應範圍：潔淨室投入生產前。
動態監測適應範圍：非無菌製劑生產監測。
連續監測適應範圍：無菌製劑生產監測。
※ggbt16294-2010 醫藥工業潔淨室(區)沉降菌的測試方法
屬於被動式取樣法，對空氣環境破壞小；
取樣工具：90mm平皿培養基：tsa或sda
衡量方法：放置時間4小時 cfu/4小時
※gbt16293_2010醫藥工業潔淨室浮游菌檢測方法
屬於主動式取樣法取樣工具：浮游菌取樣器培養基：tsa或sda
衡量方法：取樣體積 cfu/m3
五、結論：
環境監控是一種重要的方式，以保證潔淨室或無菌生產區域受到適當水平的控制。監測是定性的活動，即使應用於無菌生產這種最關鍵的活動中，批產品接受與否的結論也不應該僅僅依賴與環境取樣的結果。
本質上沒有人員操作的環境通常在起始階段僅有非常低的汙染率，並且在使用中維持非常低的微生物汙染率。
潔淨室操作人員必須努力維持適當的環境質量，並不斷改進人員操作和環境控制。
微生物總結
二 免疫學基本理論要點 免疫學的主要內容 共7章，重點在1 抗原 2 免疫球蛋白 5 免疫應答 章 1 免疫概念以及免疫系統的功能 免疫 指機體免疫系統識別自身與異己抗原，並通過免疫應答排除抗原性異物，以維持機體生理平衡的功能。p5 免疫系統功能 免疫防禦 排斥外來抗原性異物 免疫自穩 清除衰老 損...
微生物小結
微生物綜合實驗小結 0743002222 陸健 本組組員 謝桂琴王前堂陸健 本次微生物綜合實驗分為三部分，分別是抗生素效價測定 水中細菌總數測定以及濾膜法測定水中大腸桿菌菌群。實驗中主要涉及的微生物實驗知識有培養基製備 抑菌實驗 平板菌落計數 濾膜法過濾菌體等基本實驗技能。第乙個實驗抗生素效價測定時...
微生物觀察
深圳大學實驗報告 課程名稱生命科學基礎實驗 實驗專案名稱 微生物的顯微觀察 學院機電與控制工程 指導教師何曉陽 報告人 陳攀穗學號 2014110150 實驗報告提交時間 2015.4.8 一 實驗目的與要求 1.了解常見的微生物及其與人類生產生活的關係加深對微生物分布廣泛性的認識 2.學習細菌 酵...