草酸鉀-磷酸氫二鈉溶液:稱取30g草酸鉀,磷酸氫二鈉7g,溶於1000ml水中。
指示劑:
次甲基藍溶液:10g/l。
乙酸鋅溶液:稱21.9g乙酸鋅加3ml冰醋酸,加水溶解並稀釋到100ml
10.6%亞鐵***溶液:稱取10.6g 亞鐵***,溶於水中,稀釋至100ml。
指示劑:次甲基藍溶液:10g/l。
乳糖標準溶液:
準確稱取經 92 ~ 94 ℃ 乾燥2小時乳糖0.75g,精確到0.2mg。加水溶解後移入250 ml容量瓶中定容。
4、儀器:
5.提取
(1)常用的提取劑:有水及乙醇溶液。
6、測定方法:
(1)樣品處理:
取適量樣品2.50-3.00g,加100ml水分數次溶解並洗入250 ml 容量瓶中,慢慢加入 4 ml乙酸鉛溶液和 4 ml草酸鉀-磷酸氫二鈉溶液,加水至刻度,搖勻後靜置數分鐘。
用乾燥濾紙過濾,棄初濾液,收集濾液備用。
預滴定:
準確吸取鹼性酒石酸銅甲液和乙液各5ml,置於250 ml 錐形瓶中,加水20ml,加玻璃珠3粒。從滴定管滴加約15ml乳糖標準溶液,加熱使其在2分鐘內沸騰,準確沸騰15秒鐘,加入3滴次甲基藍溶液,徐徐滴加乳糖標準溶液,直至溶液藍色剛好褪去為終點。記錄消耗乳糖標準溶液的總體積。
精確滴定:
準確吸取鹼性酒石酸銅甲液和乙液各5ml,置於250 ml 錐形瓶中,加水20ml,加玻璃珠3粒。從滴定管滴加比預滴定少0.5-1.
0ml乳糖標準溶液,加熱使其在2分鐘內沸騰,準確沸騰2分鐘,加入3滴次甲基藍溶液,然後徐徐滴加乳糖標準溶液,直至溶液藍色剛好褪去為終點。記錄消耗乳糖標準溶液的總體積。平行操作3次,取其平均值。
a1—實測乳糖數, mg;
v1—滴定時消耗乳糖溶液體積,ml;
m1—稱取乳糖的質量,g。
al1-由乳糖溶液滴定毫公升數查表所得的乳糖數,mg。
f1-費林氏液的乳糖校正值。
(3)乳糖的**:
預滴定:吸取鹼性灑石酸銅甲液及乙液各5.00ml,置於250ml錐形瓶中,加水20 ml,加玻璃珠3粒。
從滴定管中放出15ml樣品溶液於三角瓶中,加熱使其在2分鐘內至沸,準確沸騰15秒鐘,加入3滴次甲基藍溶液,然後徐徐從滴定管中滴入樣品溶液,待溶液藍色剛好褪去為終點。記錄樣品溶液消耗的體積。
精確滴定: 吸取鹼性灑石酸銅甲液及乙液各 5.00 ml,置於250 ml 錐形瓶中,加玻璃珠3粒,再加20ml蒸餾水。
從滴定管中加入比預滴時樣品溶液消耗總體積少0.5-1 ml的樣品溶液,加熱使其在2分鐘內沸騰,準確沸騰2分鐘,加入3滴次甲基藍溶液,然後徐徐滴入樣品溶液至藍色剛好褪去為終點。記錄消耗樣品溶液的總體積。
同法平行操作3份,取平均值。
(5)結果計算:
7、說明與討論:
①此法所用的氧化劑費林氏液的氧化能力較強,醛糖和酮糖都可被氧化,所以測得的是總還原糖量。
②本法是根據一定量的費林氏液(cu 2 +量一定)消耗的樣液來計算樣液中還原糖含量,反應體系中cu 2 + 的含量是定量的基礎,因此在樣品處理時,不能用銅鹽作為澄清劑,以免樣液中引入cu2+,得到錯誤的結果。
③ 費林氏液甲液和乙液應分別貯存,用時才混合,否則酒石酸鉀鈉銅絡合物長期在鹼性條件下會慢慢分解析出氧化亞銅沉澱,使試劑有效濃度降低。
④ 滴定必須在沸騰條件下進行,其原因一是可
以加快還原糖與cu2+的反應速度;二是次甲基
藍變色反應是可逆的,還原型次甲基藍遇空氣
中氧時又會被氧化為氧化型。此外,氧化亞銅
也極不穩定,易被空氣中氧所氧化。保持反應
液沸騰可防止空氣進入,避免次甲基藍和氧化
亞銅被氧化而增加耗糖量。
⑤滴定時不能隨意搖動錐形瓶,更不能把錐形瓶從熱源上取下來滴定,以防止空氣進入反應溶液中。
⑥次甲基藍也是一種氧化劑,但在測定條件下氧化能力比cu2+弱,故還原糖先與cu2+反應,稍過量的還原糖才與次甲基藍反應,使之由藍色變為無色,指示劑達終點。
⑦預滴的目的:
通過**可知道樣液大概消耗量,以便在正式測定時,預先加入比實際用量少 0.5-1 ml 左右的樣液,只留下 0.5-1 ml 左右樣液在續滴定時加入,以保證在短時間內完成滴定工作,提高測定的準確度。
⑧在測定過程中要嚴格遵守標定或製表時所規定的操作條件,如熱源強度(電爐功率)、錐形瓶規格、加熱時間、滴定速度等。
⑨測定時先將反應所需樣液的絕大部分加入到費林氏中與其共沸,僅留1ml左右由滴定方式加入,而不是全部由滴定方式加入,其目的是使絕大多數樣液與鹼性酒石酸銅在完全相同的條件下反應,減少因滴定操作帶來的誤差,提高測定精度以及判定終點。
三、蔗糖的測定
1.原理
樣品用水提取,提取液經澄清處理以除去蛋白質等雜質,再用鹽酸進行水解,使蔗糖轉化為轉化糖(還原糖)。然後按還原糖測定方法分別測定水解前後樣品液中轉化糖含量,兩者差值即為由蔗糖水解產生的轉化糖量,乘以乙個換算係數即為蔗糖含量。
2. 試劑
① 用 0.2%蔗糖標準溶液標定斐林試劑。
②鹽酸溶液:體積比1:1。
③酚酞指示液:0.5%。
④300g/l氫氧化鈉溶液:
蔗糖葡萄糖+果糖
342 180 180
1分子轉化糖換算成蔗糖為342/360=0.95
0.95為蔗糖換算係數。
a2—實測轉化糖數, mg;
v2—滴定時消耗蔗糖溶液體積,ml;
m2—稱取蔗糖的質量,g。
al2-由乳糖溶液滴定毫公升數查表所得的轉化糖數,mg。
f2-費林氏液的蔗糖校正值。
蔗糖的測定:樣品處理方法同上。
1.轉化前轉化糖的量:
2.樣液的轉化及滴定:
取濾液50ml→100ml容量瓶中→鹽酸水解→ 預滴定→ 精確滴定。
計算結果:
試樣中蔗糖含量(g/100g):
x=(l2-l1)×0.95
四、總糖的測定:
乳與乳製品中的總糖通常是指具有還原性的糖和在測定條件下能水解為還原性的蔗糖的總量。
總糖是乳品生產中常規分析專案。
總糖的測定公式=蔗糖+乳糖
11醣類代謝
第十一章醣類代謝 第一節概述 一 特點 糖代謝可分為分解與合成兩方面,前者包括酵解與三羧酸迴圈,後者包括糖的異生 糖原與結構多醣的合成等,中間代謝還有磷酸戊糖途徑 醣醛酸途徑等。糖代謝受神經 激素和酶的調節。同一生物體內的不同組織,其代謝情況有很大差異。腦組織始終以同一速度分解糖,心肌和骨骼肌在正常...
第二節 醣類
教學目標 1.使學生掌握醣類的主要代表物 葡萄糖 蔗糖 澱粉 纖維素的組成和重要性質,以及它們之間的相互轉變和跟烴的衍生物的關係.2.了解合理攝入營養物質的重要性,認識營養均衡與人體健康的關係。3.使學生掌握葡萄糖蔗糖澱粉的鑑別方法.教學重點 難點 認識醣類的組成和性質特點。教學方法 討論 實驗 調...
2 4細胞中的醣類和脂質教案
內容與解析 本節課要學的內容 組成細胞的醣類和脂質指的是 組成細胞的成分葡萄糖 核醣 脫氧核醣 蔗糖 纖維素 糖原 以及脂肪 磷脂 固醇,其核心是 醣類和脂質的種類及功能,理解它關鍵就是要理解 單醣 二糖 多醣的概念以及脂肪 磷脂 固醇。教學的重點是 醣類和脂質的功能,解決重點的關鍵是 醣類各分類之...