化學誘導玉公尺單倍體技術規程 黑龍江標準

2022-10-31 21:27:09 字數 2985 閱讀 5321

2本標準依據gb/t 1.1-2009編寫規則起草。

3本標準由黑龍江省農業農村廳提出。

4本標準由黑龍江省農業標準化技術委員會歸口。

5本標準起草單位:黑龍江省農業科學院耕作栽培研究所、黑龍江榮玉農業科技****。

本標準主要起草人:宮秀傑、來永才、錢春榮、于洋、馬寶新、馬延華、李樑、郝玉波、李昕、王俊強、王秋菊、姜輝、何長安、姜宇博、呂國依、葛選良、楊忠良、馬軍韜、趙楊、王陽、童淑媛、杜振宇、孫丹、侯國強、孟凡迪。

化學誘導玉公尺單倍體技術規程

1 範圍

本標準規定了化學誘導玉公尺單倍體技術的術語和定義、材料和備品、誘導處理、誘導後代種植和田間調查、誘導率統計及注意事項。

本標準適用於化學誘導玉公尺單倍體技術。

2 規範性引用檔案

下列檔案對於本檔案的應用是必不可少的。凡是注日期的引用檔案,僅註日期的版本適用於本檔案。凡是不注日期的引用檔案,其最新版本(包括所有的修改單)適用於本檔案。

db23/t 017 玉公尺生產技術規程

db62/t 1060 農作物種子生產技術規程玉公尺自交系

3 術語和定義

下列術語和定義適用於本檔案。

3.1pa1代

化學誘導孤雌生殖獲得的籽粒及其生長植株(不包括後代籽粒)。

3.2pa2代

pa1經自交結實後的籽粒及生長植株(不包含後代籽粒)。

4 材料和備品

4.1 實驗材料和備品準備

500ml燒杯、玻璃棒、100ml容量瓶、25ml量筒、封口瓶、廢液缸、試劑匙、移液管、0.001g天平、猴頭噴霧器、蒸餾水、無水乙醇(ea)。

剪刀、膠皮手套、一次性口罩、眼罩、白大褂、硫酸紙、小硫酸紙袋、大硫酸紙袋大頭針、標籤、記號筆、棉花、鑷子、網袋。

4.2 誘導材料準備

4.2.1 誘導材料選擇

符合育種目標的玉公尺優良雜合種質或遺傳背景廣泛的群體材料。

4.2.2 化學試劑

誘導試劑包括:二甲基亞碸 (dmso) 、馬來醯肼 (mh) 、秋水仙鹼 (col) 、甲醇(mt)。

配製方法:取70mgmh加入燒杯,再加入70mlmt,充分攪拌。待mh完全溶解後,加入0.

1mldmso、1.0gcol和500ml蒸餾水,攪拌,轉移入1000ml容量瓶中,定容至1000ml。放置安全處待用。

4.2.3 誘導材料種植及田間管理

選擇地勢平坦、肥水一致、排灌方便地塊,每份被誘導材料種植不少於100株。田間管理參照db23/t 017執行。

5 誘導處理

5.1 誘導時期和誘導方法

5.1.1 誘導時期

誘導材料雌穗吐絲3cm~5cm時。

5.1.2 誘導方法

誘導材料雌穗吐絲前,用硫酸紙袋將雌穗罩上,去除雌穗。誘導處理時間選擇在清晨4:00-7:

30,操作人員須用75%乙醇將手和剪刀消毒,用剪刀將被誘導材料雌穗頂端剪平,然後用手再修出乙個凹槽,用猴頭噴霧器噴施化學藥劑,每穗噴施化學藥劑2ml,噴施後迅速罩上硫酸紙袋,然後再罩上乙個大硫酸紙袋,用大頭針固定,掛標籤,標記噴施藥劑日期。間隔3天後再噴施一次,噴施方法同上。記錄化學藥劑處理的果穗數量。

5.2 誘導材料的收穫

籽粒成熟及時收穫,單穗分裝編號,待乾燥後,脫粒。記錄每個果穗雌穗小花數和結實數。

6 誘導後代種植和田間調查

6.1 pa1種植和田間調查

6.1.1 pa1種植

選擇地勢平坦、肥水均

一、病蟲害發生低、排灌方便地塊種植。收穫的pa1種子全部播種,人工單粒播種,播深3cm~5cm,播後鎮壓,單株插牌標記。

6.1.2 pa1田間管理

採用人工除草,禁止使用化學藥劑除草。其它田間管理方法參照db23/t 017執行。

6.1.3 pa1田間調查

6.1.3.1 pa1苗期調查

調查未出苗、白化苗和早夭幼苗數量。

6.1.3.2 pa1花期調查

調查雄穗育性、雌穗育性和雌雄開花間隔時間。

6.1.4 pa1自交授粉

雌穗吐絲前用硫酸紙袋將雌穗罩上,對雌雄穗外觀正常、花期相遇的植株進行自交授粉。授粉方法參照db62/t 1060執行。

6.1.5 pa1收穫

單穗收穫並編號。

6.2 pa2種植及田間調查

6.2.1 pa2種植

按穗行種植。穗行插牌標記,種植方式同6.1.1。

6.2.2 pa2田間管理

田間管理方法參照db23/t 017執行。

6.2.3 pa2田間調查

6.2.3.1 pa2苗期調查

調查幼苗色、莖色澤及葉色,進行一致性調查。

6.2.3.2 pa2花期調查

調查株型、雄穗分枝、雌穗花絲顏色、株高、穗位、抽穗期、吐絲期。

6.2.4 pa2自交授粉

田間所有植株均進行自交授粉,授粉方法參照db62/t 1060執行。

6.2.5 pa2收穫

記錄成熟期,同一穗行植株表現整齊一致,所有性狀無分離,即認為是純合二倍體。同一穗行性狀有分離的,則淘汰。按穗行收穫,並編號。

7 誘導率統計

[_=\\frac}_}_}}}_}_}}×100left(\\right)', 'altimg': '', 'w': '621', 'h':

'120', 'omath': 'm1=i=1ngii=1nei×1001'}]

式中:m1為誘導材料結實率;

gi為pa1結實粒數;

ei為處理雌穗小花數;

[_=\\frac}_}_}}}_}_}}×100left(\\right)', 'altimg': '', 'w': '621', 'h':

'120', 'omath': 'm2=i=1nrii=1nei×1002'}]

式中:m2為誘導材料誘導率;

ri為pa2純合穗行數;

ei為處理雌穗小花數;

8 注意事項

本技術規程中化學試劑dmso和col具有一定的毒性作用,在配製溶液和使用化學試劑的過程中,必須帶膠皮手套,帶一次性口罩,穿白大褂,並將藥品放置安全地方。如不慎將dmso沾到**上後,迅速用大量的水以及稀氨水清洗。

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