1. 革蘭氏染色
實驗原理：革蘭氏染色法將菌分為g-和g+細菌。是由這兩類細菌細胞壁的結構和組成不同決定的。
g+的細胞壁的成分主要是肽聚醣形成的網狀結構，用乙醇脫水時細胞壁脫水使肽聚醣形成的網狀結構的孔徑縮小，這樣的通透性降低。使得結晶紫—碘的複合物不易被洗脫下來而保留在細胞內仍保留初染劑的藍紫色。g-的細胞壁肽聚醣層較薄，當脫色處理時，類脂被乙醇溶解，細胞壁通透性增大，使得結晶紫比較容易洗脫下來，用復染劑染後，細胞被染成紅色。
步驟：製片---初染---媒染---脫色----復染---鏡檢---混合塗片染色
注意事項：1.選用活躍生長期的菌種以防造成假陰性2.塗片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性3脫色適中
2. 無菌技術操作及簡單染色
實驗原理：高溫對微生物有致死效應。因此在微生物的轉接過程中，一般在火焰旁進行，並用火焰直接灼燒接種環，以達到滅菌目的，但一定要保證冷卻後進行轉接，以免燙死生物。
細菌的簡單染色：塗片---乾燥---固定---染色---水洗---乾燥---鏡檢
3. 微生物大小的測定
實驗原理：微生物大小的測定需借助特殊的測量工具---顯微測微尺，它包括目鏡測微尺和鏡台測微尺兩個相互配合使用部件。鏡台測微尺是乙個在特製載玻片**封固的標準的刻度尺，其尺度總長為1 mm，精確分為大格，每個大格有分為10個小格，沒一小格0.
01mm。刻度線外有一直徑為@3.，粗線為0.
1mm的圓：以便調焦時尋找線條。目鏡測微尺是一塊可放入接目鏡內的圓形小玻片，其**有精確的等分刻度，一般有兩種。
由於不同的顯微鏡或不同的目鏡和物鏡組合放大倍數不同，目鏡測微尺每一小格代表的實際長度也不一樣。一次用目鏡測微尺側微生物大小時，必須先用鏡台測微尺校正，以求每一小格代表的長度，即可計算出細胞的實際大小。
步驟：目鏡測微尺的安裝---校正目鏡測微尺----菌體的大小測定----放回測微尺
目鏡測微尺每格長度(um)=（兩重合線間鏡台測微尺格數*10）/兩重合間目鏡測微尺格數
4.培養基的配製
基本原理：培養細菌一般用牛肉膏蛋白腖培養基，這是一種應用十分廣泛的培養基，蛋白腖主要提供氮源和維生素，牛肉膏為微生物提供碳源，磷酸鹽和維生素，氯化鈉提供無機鹽。高氏1號培養基是用來培養和觀察放線菌形態特徵的合成培養基。
此培養基的特點是含多種成分已知的無機鹽，這些無機鹽可相互作用產生沉澱，因此，在混合培養基成分時，一般是按配方的順序依次溶解各成分，甚至需要滅菌，再按比例混合。馬丁氏培養基是一種分離真菌的選擇性培養基。特點是加入的孟加拉紅和鏈黴素能有效抑制細菌和放線菌的生長，對真菌無抑制作用，從而達到分離真菌的目的。
步驟：按成分依次加入---加自來水---加熱使瓊脂溶解---分裝---加塞---包紮---滅菌---檢查
5.酵母菌的染色和顯微鏡的直接計數
實驗原理1：由於細胞個體比較大，採取塗片的方法有可能損傷細胞，一般通過美蘭染液水浸片法或水—碘液浸片法觀察酵母菌形態及出芽生殖方式。同時採用美蘭染液水浸片法還可以對酵母菌的死活細胞進行鑑定。
美蘭對細胞無毒，其氧化型呈藍色，還原性呈無色。由於新城代謝，活細胞內有較強的還原能力，使美蘭由藍色氧化性轉變為無色的還原型，染色後活細胞呈無色。死細胞或代謝能力差的衰老細胞內還原能力弱，染色後細胞呈藍色。
實驗原理2：顯微計數法是將少數待測樣品懸浮液置於一種特定的具有確定容積的載玻片上，於顯微鏡下觀察計數的方法。血細胞計數板是一塊特製的載玻片，其上由四條槽構成3個平台。
中間較寬的平台又被橫槽隔成兩半，每一邊的平台上刻有乙個方格網。每個方格網共分成9個大方格，中間的大方格分成25個中方格，而每個中方格又分成16個小方格。每個大方格邊長為1mm時，無論哪種計數板每一大格中小格都是400個。
乙個大格的面積時1平方mm，計數室容積時0.1立方mm。通常數5個中格的總菌數，求每個中格平均值。
就可得到總菌數。
步驟：製備懸液---鏡檢---滴加懸液---觀察---計數----清洗
6.絲狀微生物的培養
實驗原理：放線菌用插片法
步驟： 倒平板---接種---插片----培養---鏡檢
黴菌用載玻片培養觀察法
步驟： 培養小室的滅菌----瓊脂塊的製作---接種---培養---鏡檢
三點法接種
7．高壓蒸汽滅菌
實驗原理：滅菌的主要因素是高溫，通過高壓而使水的沸點公升高，得到高於100度的溫度，導致蛋白質凝固變性而滅菌。
注意事項：當壓力為0時才能開啟排氣閥，取出培養物。
微生物檢查中無菌操作注意事項
一 關於採用酒精棉球消毒的注意事項 1.用酒精棉球擦拭雙手，包括手掌 手背，尤其是手指，更換乙個酒精棉球擦拭酒精燈附近 約10cm 桌面。2.點燃酒精燈，在酒精燈附近拆器皿包裝，並對器皿做相應標記。3.用酒精棉球再次擦拭雙手，開始實驗操作。4.消毒用酒精棉球濕度以不擠壓出酒精為宜。二 關於酒精燈正確...
微生物實驗指導
實驗一微生物培養基的配製和滅菌 培養基是將微生物生長繁殖所需要的各種營養物質，用人工方法配製而成的各種營養基質。它具有微生物正常生活所需的各種養料和適宜的環境條件 1 適當組分和比例的營養物質 2 適宜的ph值 3 合適的滲透壓 4 保持無菌狀態。所以培養基是培養微生物所必需的最主要材料。培養基的配...
微生物實驗報告
功能微生物的 篩選 培養與選育 生科院0901 21090917 2010年11月30日 概要 以產抗生素細菌的篩選和選育為目標，通過培養基製備及滅菌 菌種的分離純化 菌種的鑑定 培養條件的優化以及誘變育 種五個實驗，學習相關的實驗技術和方法.關鍵詞 分離純化 滅菌 酶活性 誘變 一 材料與方法 1...