斜面接種
將微生物從乙個斜面培養基接種至另乙個斜面培養基上的方法，稱為斜面接種法。其方法步驟如下：
首先，點燃酒精燈。將菌種和斜面培養基的兩隻試管平行放在左手上，用拇指與其它四指夾住，並使中指位於兩試管之間，兩試管的管口齊平。
其次，用右手先將棉塞擰轉鬆動，並稍拉出一些，以利接種時拔出。
第三，右手持接種針，在酒精燈將針凡糠稚蘸烀鵓。針頭以上凡是接種時可能進入試管的部分，均應用火灼燒。
以下操作都要使試管口靠近火旁。
第四，用右手的小指與掌間拔掉左手上兩隻試管上的棉塞，同時迅速將試管口在酒精燈上燒灼3秒鐘左右，使管口上可能沾染的少量雜菌得以燒死。
第五，將燒過的接種針伸入菌種管內，先將針頭接觸培養基上沒有菌的部位（如斜面的頂端），使其冷卻，以免燙死被接種的菌體。然後輕輕接觸菌體，取出少許，慢慢將接種針抽出試管，接種針抽出時不要使針頭部分碰到管壁和管口，取出後，不可使針頭通過火焰，更不可觸及其它無關物品或桌面。
第六，迅速將接種針伸進另一試管，在培養基上輕輕劃線，接種菌體於其上。劃線時，要由底部起劃較密的平行線，一直劃到頂部，以充分利用斜面面積，但不要將培養基劃破。
第七，燒灼試管口，將棉塞塞上。塞棉塞時，不要移動試管迎接棉塞，以免試管在移動中納入可能含菌的空氣。
第八，將針頭在火焰上燒灼滅菌。放回原處後，騰出手將棉塞塞緊。
高壓滅菌鍋的使用
1．首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。
2．放回滅菌桶，並裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3．加蓋，並將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓鬆緊一致，勿使漏氣。
4．用電爐或煤氣加熱，並同時開啟排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣完全排盡後，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上公升。當鍋內壓力公升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。
本實驗用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分鐘滅菌。
5．滅菌所需時間到後，切斷電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，開啟排氣閥，旋鬆螺栓，開啟蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，開啟排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由於內外壓力不平衡而衝出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生汙染。
6．將取出的滅菌培養基放入 37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用。
滅菌鍋使用注意事項
a 待滅菌的物品放置不宜過緊；b 必須將冷空氣充分排除，否則鍋內溫度達不到規定溫度，影響滅菌效果；c 滅菌完畢後，不可放氣減壓，否則瓶內液體會劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導致容器爆裂。須待滅菌器內壓力降至與大氣壓相等後才可開蓋；d 現在已有微電腦自動控制的高壓蒸氣滅菌鍋，只需放去冷氣後，儀器即可自動恆壓定時，時間一到則自動切斷電源並鳴笛，使用起來很方便。
細菌簡單染色技術
5.1塗片取兩塊潔淨無油的載玻片，在無菌的條件下各滴一小滴生理鹽水(或蒸溜水)於玻片**，用接種環以無菌操作，分別從枯草芽孢桿菌、藤黃微球菌和大腸桿菌斜面上挑取少許菌苔於水滴中，混勻並塗成薄膜。若用菌懸液(或液體培養物)塗片，可用接種環挑取2～3環直接塗於載玻片上。
注意滴生理鹽水（蒸餾水）和取菌時不宜過多且塗抹要均勻，不宜過厚。
5.2乾燥室溫自然乾燥。也可以將塗面朝上在酒精燈上方稍微加熱，使其乾燥。但切勿離火焰太近，因溫度太高會破壞菌體形態。
5.3固定如用加熱乾燥，固定與乾燥合為一步，方法同乾燥。塗片、乾燥和熱固定。
5.4染色將玻片平放於玻片擱架上，滴加染液1～2滴於塗片上(染液剛好覆蓋塗片薄膜為宜)。呂氏鹼性美藍染色1～2min，石炭酸複紅(或草酸銨結晶紫)染色約1min。
5.5水洗傾去染液，用自來水從載玻片一端輕輕沖洗，直至從塗片上流下的水無色為止。水洗時，不要水流直接沖洗塗面。水流不宜過急、過大，以免塗片薄膜脫落。
5.6乾燥甩去玻片上的水珠自然乾燥、電吹風吹乾或用吸水紙吸乾均可以（注意勿擦去菌體）。
5.7鏡檢塗片乾後鏡檢。塗片必須完全乾燥後才能用油鏡觀察。
微生物考試
一 高壓蒸氣滅菌器 一 原理 二 構造 三 使用方法 四 注意事項 五 應用 二 恆溫箱 溫箱 一 構造及原理 二 應用 四 液氮罐 一 原理 二 應用 三 冰箱 一 分類 二 應用 五 恆溫水浴箱 水浴箱 一 原理 二 應用 六 離心機 一 構造及原理 二 操作方法 三 應用 七 醫用淨化工作台 ...
微生物實驗指導
實驗一微生物培養基的配製和滅菌 培養基是將微生物生長繁殖所需要的各種營養物質，用人工方法配製而成的各種營養基質。它具有微生物正常生活所需的各種養料和適宜的環境條件 1 適當組分和比例的營養物質 2 適宜的ph值 3 合適的滲透壓 4 保持無菌狀態。所以培養基是培養微生物所必需的最主要材料。培養基的配...
微生物實驗報告
功能微生物的 篩選 培養與選育 生科院0901 21090917 2010年11月30日 概要 以產抗生素細菌的篩選和選育為目標，通過培養基製備及滅菌 菌種的分離純化 菌種的鑑定 培養條件的優化以及誘變育 種五個實驗，學習相關的實驗技術和方法.關鍵詞 分離純化 滅菌 酶活性 誘變 一 材料與方法 1...