早期胚胎的體外培養
體外受精的早期胚胎在體外發育的中，往往會停止在某一階段不再發育，這種現象稱為：發育阻滯。此外體外培養環境下不能及時清除有害物質（如細胞內h2o2），不斷積累也會造成細胞中毒，使胚胎阻滯。
發育阻滯是體外培養中的乙個主要障礙，通過改進培養液成分和建立體細胞共同培養體系，在不少動物中已克服，使胚胎順利發育到囊胚階段。
1. 培養條件：
（1） 能量底物
胚胎培養液一般不含葡糖糖，代之以乳酸和丙酮酸為能量**物。研究表明早期胚胎對葡萄糖的利用是有限的，而主要以乳酸和丙酮酸為能量代謝的底物，所以，培養液中低劑量葡萄糖的新增是必需的。
（2） 氨基酸
體外培養液中加入氨基酸有利於克服胚胎的發育阻滯，不僅能促進胚胎的早期發育，而且能增強其植入後的發育能力。
（3） 血清
血清是胚胎培養中新增的主要的蛋白質源物質，在保持細胞的生存、促進生長、維持細胞酸鹼度和滲透壓的穩定等方面有重要作用。但血清的成分很複雜，包括生長因子、激素、維生素、礦物質、細胞因子以及其他一些還未確定的物質。
（4） 細胞因子
自然情況下，不少細胞因子能促進胚胎發育，無血清培養液中加入細胞因子能促進胚胎發育，增強蛋白質的合成和囊胚的孵化。
（5） 抗氧化作用
胚胎代謝過程中產生的反應氧能改變細胞內的一些分子，對胚胎的發育有阻滯效果。胚胎細胞內有一些抗氧化酶能起到抗氧化作用。次牛磺酸、牛磺酸以及維生素c對胚胎發揮外部抗氧化效應。
2. 體細胞共培養
將胚胎與某些型別的體細胞共同培養可以有效的克服發育阻滯，這些與胚胎共同培養的細胞稱為飼養層細胞。飼養層細胞的作用可能與產生胚胎營養因子與抗培養環境中胚胎毒性物質有關。
細胞培養基本方法
一 準備和安裝過濾器 清洗好過濾器，乾燥，放入一張孔徑0.22 m的微孔濾膜，用布包裝好，15磅20 min進行高壓滅菌處理。在超淨台內開啟過濾器架好，膠管一端接入濾幫浦再插入待除菌的液體中，出口端膠管深入到已消毒好的瓶子中。用幫浦過濾，過濾後要檢查濾膜是否完好無損。二 合成培養基的配製 1 根據細...
細胞培養室的建立
細胞培養室的設定 裝置和準備工作 一 細胞培養實驗室的設定及裝置 一 細胞培養實驗室的設定 組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在於要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。目前，超淨工作台的廣泛使用，很大程度上方便了組織細胞培養工作，並使一些常規實驗室有可能用於進行細胞培養。細胞...
原代細胞培養和傳代培養的方法及其
初代培養 原理 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶 常用胰蛋白酶 螯合劑 常用edta 或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存 生長和繁殖，這一過程稱原代培養。儀器 材料及試劑 儀器 培養箱 調整至37 培養瓶 青黴素瓶 小玻璃漏斗 平皿 吸管 移液管 紗布 手術...