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雲南雲科藥業****
a： 驗證方案
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雲南雲科藥業****
目錄1． 驗證專案名稱
2． 驗證組織
3． 概述
4． 驗證目的
5． 參照標準
6． 驗證程式
7． 驗證報告、評價及批准
1． 驗證專案名稱：培養基適用性檢查方法的驗證
2． 驗證組織：
3． 概述：
通過驗證以確認所採用的方法適合於培養基適用性檢查。根據培養基及菌的特性制訂檢驗方法和檢驗條件，按制定的方法進行試驗，根據驗證結果判斷是否符合驗證標準。若符合，按驗證的方法和條件進行培養基適應性檢查；若不符合，重新建立制訂檢驗方法和檢驗條件，再進行驗證，直至驗證結果符合設立的驗證標準。
4． 驗證目的：
細菌、黴菌及酵母菌計數用培養基應進行培養基的適用性檢查。驗證的目的是確認營養瓊脂培養基和玫瑰紅鈉瓊脂培養基適合細菌、黴菌及酵母菌數測定。（確認所採用的方法適合於培養基適應性檢查，為了保證檢驗結果的準確性，對現有的檢驗方法進行驗證。
）5． 參照標準：
2023年版《中國藥典》二部附錄ⅺj 計數培養基的適用性檢查。
6.驗證程式：
6.1適用範圍：適用於培養基適用性檢查。
6.2被驗證產品：營養瓊脂培養基和玫瑰紅鈉瓊脂培養基。
6.3試驗材料：
6.4試驗菌株：
6.5合格標準：被檢培養基上的菌落平均數不小於對照培養基上的菌落平均數的70%，且菌落形態大小與對照培養基上的菌落一致。
6.6驗證方法：
培養基在使用前應進行適用性的檢查，通過對被檢培養基上的菌落與對照培養基上的菌落比較，以確認所採用方法的可行性。
6.6.1菌液的製備：
6.6.1.
1 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基中，於30～35℃培養18～24小時。取上述營養肉湯新鮮培養物1ml加入9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-5～10-7約為50～100cfu/ml
的菌懸液備用。
6.6.1.
2接種白色念珠菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基中，於23～28℃培養24～48小時。取上述改良馬丁新鮮液體培養物1ml加入9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-5約為50～100cfu/ml的菌懸液備用。
6.6.1.
3接種黑麴黴的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基上，於23～28℃培養5～7天，加入3～5 ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。
然後，採用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內，用0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液製成每1ml含孢子數50～100cfu/ml的孢子懸液備用。
6.6.2菌液的計數：（每種菌液接種2個平皿）
6.6.2.1分別接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各2皿，每皿接種1ml菌液（含菌50～100cfu），傾注營養瓊脂培養基，凝固後於30～35℃倒置培養48小時。
6.6.2.2分別接種白色念珠菌2皿，每皿接種1ml菌液（含菌50～100cfu），傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養基，凝固後於23～28℃倒置培養72小時。
6.6.2.3菌落計數結果（2個平皿計數取平均值）見下表：
菌落計數結果（cfu/ml）
6.3適用性檢查
6.3.1營養瓊脂培養基
6.3.2玫瑰紅鈉瓊脂培養基
6.3.3膽鹽乳糖培養基
6.3.4結果（見下表）
6.4結論
培養基適用性檢查驗證記錄
試驗時間年月日試驗時間年月日
複核人試驗人
新版GMP培養基適用性檢查驗證方案
培養基適用性檢查 驗證方案 檔案編號 vmp vv 501 00 起草人審核人 批准人 批准日期 年月日 驗證立項申請表 驗證方案審批表 1.概述 通過驗證以確認所採用的培養基適合於細菌 黴菌及酵母菌的測定及控制菌的檢查，根據特性制訂檢驗方法和檢驗條件，按制定的方法進行試驗，根據驗證結果判斷是否符合...
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