1、實驗題目：培養基的製備與滅菌
2、實驗目的：
1、明確培養基的配置原則，掌握配置方法。
2、了解滅菌的原理，學習掌握滅菌器的使用方法。
三、實驗器材：
1、藥品：牛肉膏、蛋白腖、氯化鈉、水、瓊脂。
2、儀器：三角瓶、培養皿、試管、線繩、棉花、燒杯、報紙、移液管、試管架、鐵針、量筒。
四、實驗原理：
1、培養基的製備
包括一下幾種成分：
（1）水分：主要成分。
（2）n源：包括無機氮和有機氮。
（3）c源：主要是含碳有機物、碳氫化合物等。
（4）無機鹽：如nacl、kh2po4等。
微量元素：cu、k、mg、s、p、zn。
有些還需要新增「生長因子」，通常是維生素類、某些氨基酸或核酸等。
2、培養基配置的原則
根據不同的培養物件及培養目的，選用不同的培養基，但有機物總量不得超過15%，鹽類一般不超過1%。
培養基有以下分類：
按成分：天然培養基、合成培養基、半合成培養基
按狀態：固體培養基、半固體培養基、液體培養基
按用途：基礎培養基、營養培養基、鑑別培養基、選擇培養基
培養基配好後應立即滅菌，防止營養物質中的微生物富集。
3、滅菌：
用理化手段殺滅一切微生物的營養體，包括芽孢和孢子，在實驗中應對所有儀器、操作場所、藥品及培養基滅菌或消毒。
（1）高壓蒸汽滅菌：將物品放入封閉的加壓滅菌器，加熱使滅菌鍋套間的水沸騰產生蒸汽，將冷空氣排盡，壓力上公升，使水沸點變高，導致菌體蛋白質變性，一般0.1mpa、121℃、15~30min可以徹底滅菌，本次實驗滅菌20min。
若是含糖培養基，110℃、30min。
（2）乾熱滅菌：微生物細胞內蛋白質因高溫而凝固變性。因高溫，所以含水量小，不利於蛋白質受熱變性，所以溫度高，時間長。
（3）紫外滅菌：誘導胸腺嘧啶二聚體形成抑制dna複製。
（4）過濾除菌：實驗室中用微孔濾膜（孔徑一般為0.22μm）。除病菌需更小。
5、實驗步驟：
1、牛肉膏蛋白腖培養基的製備
依次準確稱取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白腖、0.
5gnacl放入燒杯，加入100ml水，用玻璃棒攪勻溶解，移入三角瓶，並加入1.5g瓊脂。加上棉塞，迅速拔出能發出清脆聲響即可，用報紙包住並繫好麻繩。
2、包移液管和培養皿
（1）包一包培養皿（一包五個）：用手壓緊、塞好，折出稜角，包好後搖晃沒有培養皿相互碰撞的聲音即可。
（2）包2支移液管：用棉花塞好移液管尾部，露出1~2cm即可。取長條報紙，一端折90°角，緊密嚴實沿30°角卷好移液管，尾部疊好防止散開。
3、高壓蒸汽滅菌
（1）滅菌前要先看水位是否合適。
（2）將包好的待滅菌物品放入內層鍋，不要裝得太擠，棉塞不應染上培養基。
（3）加蓋，兩兩對稱旋緊螺栓。
（4）設定條件：0.1mpa、121℃、20min，進行加熱。
（5）先開啟排氣閥，待空氣排盡後，關上排氣閥。
（6）結束後，自然降溫，壓力降為0後，開啟排氣閥取出物品。
4、乾熱滅菌
（1）將包好的待滅菌物品放入電熱乾燥箱內，關好門箱。
（2）設定條件：160~170℃，恆溫2h。
（3）結束後，切斷電源，自然降溫，降到70℃以下後開箱取物。
六、思考題：
1、你配製的是什麼培養基？
選擇培養基。
2、選擇培養基與鑑別培養基的區別？這兩種培養基的應用情況。
選擇培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選效率。如以纖維素作唯一碳源的培養基可分散到分解纖維素的微生物分散酵母菌或黴菌時，可新增適量的青黴素、四環素或鏈黴素，以抑制細菌和放線菌的生長。
鑑別培養基是在成分中加入有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑，從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養基，此類培養基一般用於鑑定不同微生物。如emb即伊紅美乳糖造就基。大腸桿菌分解乳糖產生大量混合酸，可染上酸性伊紅，伊紅和美蘭結合，菌落被染成深紫色，從菌落外貌的發射光中還可以看到綠色金屬發光。
3、查溫度=時間滅菌表，並繪製。
實驗一培養基的製備與滅菌
一 實驗目的 1.了解配製培養基的一般方法和步驟 掌握牛肉膏蛋白腖培養基 馬鈴薯葡萄糖 蔗糖 培養基的製備方法。2.了解滅菌的原理，掌握高壓蒸氣滅菌的操作方法。二 實驗器材 1.藥品 牛肉膏 蛋白腖 氯化鈉 葡萄糖 蔗糖 瓊脂 1n naoh 1n hcl等。2.儀器及其他 試管 錐形瓶 量杯 玻璃...
實驗一培養基的製備和滅菌
3 細菌加銅培養液 在細菌培養液的基礎上加入終濃度分別為0 100 200 300的銅。2 溶化 在上述燒杯中可先加入少於所需要的水量，用玻棒攪勻，然後，在石棉網上加熱使其溶解。待藥品完全溶解後，補充水分到所需的總體積。3 調ph 在未調ph前，先用精密ph試紙測量培養基的原始ph值，如果ph偏酸，...
實驗一微生物培養基的製備與滅菌
一 目的要求 1 學習配製微生物培養基的一般方法和步驟。2 掌握高壓蒸汽滅菌的原理和操作方法。二 基本原理 正確掌握培養基的配製方法是從事微生物學實驗工作的重要基礎。由於微生物種類及代謝型別的多樣性，因而用於培養微生物的培養基的種類也很多，它們的配方及配製方法雖各有差異，但一般培養基的配製程式卻大致...