山大微生物實驗報告 黴菌的形態觀察

2022-05-07 11:03:02 字數 1762 閱讀 4298

作者:喻曙光學號班級:生院2010級生命基地

生北周五第四組同組者

1、學習並掌握觀察黴菌形態的基本方法

2、了解四類常見黴菌(麴黴、毛黴、青黴、根黴)的基本形態特徵

黴菌黴菌可產生復什分枝的菌絲體,分基內菌絲和氣生菌絲,氣生菌絲生長到一定階段分化產生繁殖菌絲,由繁殖菌絲產生孢子。黴菌菌絲體(尤其是繁殖菌絲)及孢子的形態特徵是識別不同種類黴菌的重要依據。黴菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多(約 3~10μm ),常是細菌菌體寬度的幾倍至幾十倍,因此,用低倍顯微鏡即可觀察。

觀察方法

觀察黴菌的形態有多種方法,常用的有直接製片觀察法、載玻片培養觀察法和玻璃培養觀察法三種方法,本次實驗採用載玻片培養觀察法(小室培養法)。

載玻片培養觀察法(小室培養法)

用無菌操作將培養基瓊脂薄層置於載玻片上,接種後蓋上蓋玻片培養,黴菌即在載玻片和蓋玻片之間的有限空間內沿蓋玻片橫向生長。培養一定時間後,將載玻片上的培養物置於顯微鏡下觀察。這種方法既可以保持黴菌自然生長狀態,還便於觀察不同發育期的培養物。

1.菌種:麴黴 (aspergillus sp.) ,青黴,根黴 (rhizopus sp.) ,毛黴(mucor sp.),培養 7d 的馬鈴薯瓊脂平板培養物

2.培養基:馬鈴薯培養基(簡稱pda)(配方見附表)

3.儀器或其他用具:平皿,載玻片,蓋玻片,無菌吸管,u 型玻棒,解剖刀,鑷子,50%乙醇,20%甘油,顯微鏡,接種環,酒精燈等

1.載玻片培養觀察法(小室培養法)

(1).培養小室的滅菌:在平皿底鋪一張略小於皿底的圓濾紙片,再放一u形玻棒,其上放一潔淨載玻片和兩塊蓋玻片,蓋上皿蓋,包紮後於110℃滅菌20~30分鐘,烘乾備用。

(2).瓊脂薄片的製作:取已滅菌的馬鈴薯瓊脂培養基各6~7ml 注入另兩個滅菌平皿中,使之凝固成薄層。

通過無菌操作,用解剖刀將其切成 1cm x 1cm的瓊脂塊,並將其移至上述培養室中的載玻片上(每片放兩塊 )。

(3).接種:通過無菌操作,用接種環從斜面培養物上挑取很少量的孢子,接種於培養小室中瓊脂塊的邊緣上,用無菌鑷子將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上。

(4).培養:通過無菌操作,在培養小室中的圓濾紙上加 2~3ml 滅菌的20 %的甘油(用於保持平皿內的濕度 ) ,蓋上皿蓋,27 ℃ 正置培養一周。

(5).鏡檢:根據需要可以在不同的培養時間內取出載玻片置低倍鏡下觀察,必要時換高倍

鏡。【實驗結果與分析】

表(一)四種黴菌形態特徵表

繪圖表示各種黴菌

圖1根黴圖2毛黴

圖3麴黴圖4青黴

小小室培養法圖示

【實驗圖示】

圖5根黴菌圖6根黴菌假根

圖7曲黴菌 10*10圖8分生孢子梗及假根10*40

圖9 球狀頂囊及孢子梗10*40圖10毛黴菌10*10

圖11毛黴菌區域性放大圖12 青黴菌圖13青黴菌

【注意事項】

載玻片培養觀察中,注意無菌操作,接種量要少,同時盡可能將分散的孢子接種在瓊脂塊邊緣上,否則培養後菌絲過於稠密影響觀察 。

1. 黑麴黴和黑根黴在形態特徵上有什麼區別?

答:根黴菌無隔,有匍匐菌絲和假根,假根周生處有直立的向上孢子囊梗,其頂端膨大成孢子囊,孢子囊地步有半球形囊軸。黑麴黴菌絲有隔,且菌絲體分枝,氣絲分化成分生孢子梗,頂端膨大形成球型頂囊,頂囊表面輻射出一層或兩層小梗,小梗上有一串串分生孢子。

【附表】馬鈴薯培養基配方(pda)(1000ml)

馬鈴薯去皮,切成塊煮沸20~30min,然後用1層及6層紗布過濾,再加糖及瓊脂,溶化後補水至所需量,110℃滅菌20~30min。

(這份報告質量不是很好哦)圖示不是很正確

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