微生物培養基質量控制措施

2022-04-04 06:14:35 字數 2577 閱讀 2077

1 概述

培養基質量是微生物檢測工作的基礎,事關檢測結果的準確性、可靠性,本規範依據gb/t 27405《實驗室質量控制規範食品微生物檢測》,結合實驗室實際情況,明確了培養基的購置、貯存、製備、效能測試等過程的質量控制措施,以確保培養基質量滿足檢測要求。

2 適用範圍

本規範適用於侯馬分中心對微生物檢測中所使用培養基的質量控制。

3 職責

3.1 試劑管理員負責驗證**商資訊,以及對培養基的初步驗收;

3.2 微生物檢測人員負責完成培養基的效能測試和使用過程中的質量控制和確認;

3.3 技術負責人負責不合格品的資訊和採取相應措施的確認。

4 控制措施

4.1 培養基的購置和驗收

4.1.1 培養基的購置

試劑管理員在接到批准的採購資訊後,從合格**商中選擇廠商採購,同時要求廠商提供每批培養基的批號、使用前的ph值、儲藏資訊、有效期、效能評價記錄(包括測試菌株、技術資料清單、質控證書及必要的安全危害資料)。

4.1.2 培養基的驗收

購買培養基到貨後,由試劑管理員和微生物檢測人員共同核對生產企業提供的資料、培養基名稱、規格數量、外觀特徵、批號、保質期是否符合要求。驗收符合要求後,交由檢測人員接受保管,並在每瓶培養基上加貼資訊標籤。

4.2 培養基的儲存

乾粉培養基應儲存在陰涼乾燥處,要避免陽光直射;開瓶後的乾粉培養基易吸濕,應注意防潮並在有效期或6個月內用完。應每月對儲存中的培養基進行常規檢查,如容器密閉性複查、首次開封日期、內容物的感官檢查,如果培養基發生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用,將檢查記錄填寫在資訊標籤上。

4.3 培養基的使用

4.3.1 培養基用水

培養基製備用水應使用電阻率不小於30萬ωcm的蒸餾水或與其同質的水,最好不使用離子交換器生產的去離子水。

4.3.2 稱量

稱量時要用專用的角匙,避免交叉汙染而影響檢驗結果;乾粉培養基易吸潮,如房間環境濕度較大時,應提高稱量速度,完畢後及時蓋緊瓶蓋。

4.3.3 覆水

覆水時應注意以下事項:

a)不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養基中,影響微生物的生長;

b)容器的大小需大於覆水後培養基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過程中,培養基溢位;

c)加熱培養基時一定要進行攪拌,特別是瓊脂類培養基;

d)為避免燒焦和沸騰溢位,對於少量的培養基最好使用沸水浴進行加熱;

e)含有瓊脂粉的培養基,在加熱溶解之前可以浸泡數分鐘;

f)對於瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,最多只能加熱兩次,第二次再融化後仍未用完的培養基應棄去;

g)燒糊的培養基營養物質被破壞,並可產生有毒物質,如發現焦化,或未溶解均勻前培養基有溢位,該培養基即不能使用,應重新製備。

4.3.4 滅菌

培養基採用高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌),通常是121℃15min,含糖或特殊培養基,按照國家標準或生產商提供的說明滅菌。已配製好的培養基必須在15分鐘內滅菌,避免微生物生長繁殖而消耗養分,改變培養基的酸鹼度。

為避免高溫破壞培養基的營養成分,降低瓊脂的凝膠強度,必須嚴格控制滅菌溫度和時間,不可重複滅菌。

4.3.5 ph測定

在初次使用每批培養基時,均需隨同檢測配製乙個測試培養基,在滅菌或消毒後應在25℃溫度下採用精密酸度計進行ph值測量,並判斷是否符合要求;使用過程中,如果需要調整培養基的ph,應用1mol/lnaoh或lmol/lhcl調整,注意不可反覆調ph,否則會影響培養基的滲透壓。

4.3.6 配製好的培養基標識和儲存

滅菌以後培養基應該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間儲存在滅菌鍋內,造成過度滅菌,影響培養基的營養成分或選擇性效果。並應加貼標識,標註:名稱、配置日期、成分、ph值等資訊。

同時應注意以下情況:

a)所配製的培養基的量,應該是在最長儲存期限內正好使用完;

b)含染料的培養基應閉光儲存;

c)倒好的瓊脂平板如果配製的當天未使用完,應於冷藏儲存,如果儲存時間超過2天,應將其放入密封的塑膠袋中儲存;

d)配好的肉湯類培養基如果儲存時間超過2個星期,應將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發。

4.4 培養基的效能測試

4.4.1 外觀控制

製備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉澱。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。

4.4.2 汙染控制

從每批製備好的培養基中選取部分進行汙染測試(無菌試驗),確定無微生物生長方可使用。

4.4.3 定量定性測試

測試菌株選擇測試菌株是具有其代表種的穩定特性並能有效證明實驗室特定培養基最佳效能的一套菌株,應來自國際/國家標準菌種保藏中心atcc標準菌株,菌株的選擇參考sn/t 1538.2-2007《培養基製備指南第2部分:培養基效能測試實用指南》。

5 相關檔案

5.1 《合格**商評價程式》shxl206g

5.2 《試劑、菌種和易耗品管理程式》shxl207g

5.3 gb/t 27405《實驗室質量控制規範食品微生物檢測》

6 相關記錄

6.1 《試劑、玻器、器械臺帳》shxl400-q-0015

6.2 《培養基資訊標籤》shxl408-t-0006

6.3 微生物檢測原始記錄

路基質量控制措施

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