第3章蛋白質
.氨基酸的等電點（isoeletric point）計算
1.側鏈不含離解基團的中性氨基酸，其等電點是它的pk』1和pk』2的算術平均值：pi = (pk』1 + pk』2)/2
2.對於側鏈含有可解離基團的氨基酸，其pi值也決定於兩性離子兩邊的pk』值的算術平均值。
酸性氨基酸： pi = (pk』1 + pk』 r-coo- )/2
鹼性氨基酸： pi= pi= (pk』2 + pk』r-nh2 )/2
2. phpi時，aa帶負電，電場中向正極移動
phpi時，帶正電， 向負移動
phpi時，不帶電， 不移動
構象（conformation）由單鍵旋轉產生的各種立體結構，指在立體異構體中取代原子或基團在空間的取向。兩種構型間的轉變需要共價鍵的斷裂和重組。
構型（configuration ）指取代原子或基團當單鍵旋轉時可能形成的不同立體結構。這種空間位置的改變不涉及共價鍵的斷裂,是通過改變共價鍵形成的結構 。
α螺旋結構形成的限制因素:
（1）凡是有pro存在的地方,不能形成。因pro形成的肽鍵n原子上沒有h,不可能形成氫鍵。
（2）靜電斥力。若一段肽鏈有多個glu或asp相鄰,則因ph=7.0時都帶負電荷,防礙α螺旋的形成;同樣多個鹼性氨基酸殘基在一段肽段內,正電荷相斥,也防礙α螺旋的形成。
（3）位阻。如asn、leu側鏈很大，防礙α螺旋的形成。
蛋白質**結構的特點:
1. 整個分子緊密、結實2. 常含有結構域（domain）3.許多在一級結權上相差很遠的aa鹼基在**結構上相距很近。
蛋白質四級結構特點：1.分子具有對稱性； 2.亞基間以非共價鍵締合
同源蛋白質(homologous protein):在不同生物體中行使相同或相似功能的蛋白質為同源蛋白質。
同源蛋白質的特點：
①多肽鏈長度相同或相近。②不變殘基，不變殘基高度保守，是必需的。③可變殘基。
通過比較同源蛋白質的氨基酸序列的差異可以研究不同物種間的親緣關係和進化，親緣關係越遠，同源蛋白的氨基酸順序差異就越大。
說明:生物功能是由一級結構決定的;蛋白質一級結構中保守氨基酸對蛋白質的生物功能致關重要.
常用的蛋白質分離純化方法有哪些?各自的作用原理是什麼?
常用的分離純化蛋白質的方法主要有：鹽析、丙酮沉澱、透析、電泳、離子交換層析、分子篩層析、 超速離心等方法。
鹽析是應用中性鹽加入蛋白質溶液，破壞蛋白質的水化膜，中和了電荷，使蛋白質聚集而沉澱析出。
丙酮沉澱是向蛋白質溶液中加入丙酮使蛋白質沉澱。
透析法是利用僅能通透小分子化合物的半透膜，使大分子蛋白質和小分子化合物分離，達到濃縮蛋白質或除去小分子化合物目的。
電泳法是根據蛋白質在一定 ph溶液中可帶電荷，成為帶電顆粒，在電場中向相反的電極方向移動。由於蛋白質的質量和電荷量不同，在電場中的泳動速率也不同，從而將蛋白質分離成泳動速率快慢不等的條帶。
離子交換層法是利用離子交換樹脂或離子交換纖維素將蛋白質分離的方法。在某一 ph條件下，蛋白質顆粒帶有電荷，可與離子交換樹脂顆粒表面的相反電荷吸引，然後用鹽溶液洗脫，蛋白質帶電多少不同，隨洗脫液鹽濃度的變化而先後被洗脫，達到分離的目的。
分子篩層析是根據蛋白質顆粒大小不同而進行分離的一種方法。層析柱內填充帶網狀的凝膠顆粒，小分子蛋白質可進入顆粒內，大分子蛋白質不能進入，因此分子量不同的蛋白質在層析柱內滯留時間不同，流出層析柱先後不同，可將蛋白質按分子量大小而分離。
超速離心法是利用蛋白質的密度和形態不同，在超速離心力作用下沉降速度不同而分離的方法。
分析多肽鏈的n-末端和c-末端。
常用於n－末端的測定方法：1. dnfp法（桑格反應）2. pitc法（艾德曼反應）3. 氨肽酶法（專一性的從氨基末端將肽鍵切斷）
常用於c－末端測定方法：1. 肼解法2. 還原法（硼氫化鋰）3. 羧肽酶法（專一性的從羧基末端將肽鍵切斷）
第四章核酸的化學
1.dna分子形成超螺旋的生物學意義
1. 超螺旋dna在形狀上比鬆弛的更緊密，因此，超螺旋dna可能對dna的包裝有作用。
2. 超螺旋可以影響雙螺旋的解旋程度，從而方便它與其它分子間的相互作用。
2.核小體
核小體：由dna和組蛋白共同構成。 核心：組蛋白—h2b ,h2a ,h3 ,h4
組蛋白核心(八聚體):h2a, h2b, h3, h4各2個分子；dna以左手螺旋在組蛋白核心上纏繞1.8圈,共146bp;核小體由連線dna （54bp）相連;h1結合在連線dna上.
核小體：約200bp的dna與組蛋白組成的珠狀結構,直徑約110a,高55a。
3.如何區分相對分子質量相同的單鏈dna與單鏈rna？
答：（1）用專一性的rna酶與dna酶分別對兩者進行水解。2）用鹼水解，rna能夠被水解，而dna不被水解。
（3）進行顏色反應，二苯胺試劑可以使dna變成藍色； 苔黑酚（地衣酚）試劑能使rna變成綠色。（4）用酸水解後，進行單核苷酸的分析（層析法或電泳法），含有u 的是rna，含有t的是dna。
4.分子雜交技術的應用
研究dna之間的親緣關係；發現基因的缺失或突變；測定某種遺傳資訊的量；鑑定某種基因等
以分子雜交為基礎建立起的分子生物學研究技術有：
用於鑑定dna的southern印跡技術；用於鑑定rna的northern印跡技術；原位雜交技術；基因晶元技術等； western blot
第7章生物催化劑—酶
酶活性部位的主要特徵
1. 相對酶整個體積來說，活性部位佔據的空間很小；
2. 活性部位是乙個三維空間結構；
3. 結合底物的特異性取決於活性部位中精確的原子排列；
4. 大多數底物都是通過相對弱的力與酶結合；
5. 酶活性部位含有結合底物部位和參與催化將底物轉化為產物的氨基酸殘基；
6. 活性部位通常位於酶蛋白的兩個結構域或亞基之間的裂隙（clefts或crevices），或位於蛋白質表面的凹槽；
7. 活性部位是多肽鏈摺疊形成的乙個特殊的空間結構。酶的活性部位與底物的相互作用有兩種模式：
（1）.直接契合（direct fit）模式，酶和底物的關係就象鎖與鑰匙那樣的剛性關係；
（2）.誘導契合（induced fit）模式，是指活性部位需要進行一些構象的變化來適應底物的結合。
不可逆抑制特點：
1.此類抑制劑一般是非生物** ；2.抑制劑與酶的活性中心的必需基團（－oh， －sh）以共價鍵結合如低濃度的重金屬離子hg2+、ag+、as3+ 可與酶分子sh結合，使酶活抑制。
3. 抑制反應不可逆
可逆抑制作用特點：
1.一些抑制劑與酶和（或）酶－底物複合物以非共價鍵結合；2.抑制作用可逆
競爭性抑制劑特點 :
1. 抑制劑與底物結構相似,與底物結合在酶的同一位點; 2. 酶能夠形成es的比例取決於s和i的相對濃度和酶對它們的親和性。
3. 抑制作用可被高濃度的底物減低以至消除; 4. km增大，vmax不變。
競爭性抑制動力學特點：
①無論競爭抑制劑濃度多少，各直線在縱軸截距都相同，即vmax不受抑制劑的影響。
②橫軸截距表示的km右移，說明有抑制劑時km大於無抑制劑的km值，有抑制劑時的km稱為表觀km（不是酶的真正的km）。即競爭性抑制劑可使酶的表觀km增大。
非競爭性抑制特點：
1.抑制劑與酶活性中心外的必需基團結合；2.抑制劑既與e結合，也與es結合，但生成的esi複合物是死端複合物，不能釋放出產物。
非競爭性抑制動力學特點：
①隨抑制劑濃度增加各直線在縱軸上的截距增加，說明該酶促反應的vmax因抑制劑的存在而降低。②抑制程度與抑制劑濃度有關，增加底物濃度不能使抑制程度減少。③各直線交於橫軸上同一位點，說明非競爭性抑制不改變酶促反應的km。
正協同效應
大多數別構酶具有正協同效應（酶分子結合一分子底物或效應物後，酶的構象發生變化，這種新的構象有利於後續分子與酶的結合，大大促進後續分子與酶的親合性），其初速度與底物濃度的關係呈s形的v-[s]曲線。
當底物濃度發生很小的變化時，別構酶就極大地控制著反應速度。在正協同效應中使得酶反應速度對底物濃度的變化極為敏感。
（2）負協同效應
另一類別構酶具有負協同效應（酶分子結合一分子底物或效應物後，酶的構象發生變化，這種新的構象不利於後續分子與酶的結合），其動力學曲線在表現上與雙曲線相似，但意義不同。
具有負協同效應的酶在底物濃度較低的範圍內酶活力上公升快，但再繼續下去，底物濃度雖有較大的提高，但反應速度公升高卻較小。使得酶反應速度對底物濃度的變化不敏感
酶的共價修飾有如下特點：
①酶有高（有）或低（無）活性兩種形式，共價修飾可使兩種形式互變。②酶分子出現共價鍵的變化，從而使酶結構改變影響活性。③蛋白質磷酸化需atp提供磷酸，即酶蛋白每個磷酸化位點磷酸化需要消耗乙個 atp的高能磷酸鍵，是耗能反應。
④共價修飾是酶促反應，一分子酶可催化許多其它酶蛋白發生磷酸化，因此有放大效應（級聯效應 cascade）。⑤有些酶具有別構與化學修飾雙重調節。
簡述酶的分離提純的步驟?
提示：①選材：應選擇酶含量高，易於分離的組織或材料；②破碎細胞；③抽提：
溫度一般控制在0～4℃，選擇適宜的ph值，通常在緩衝系統中進行；④分離提純：將粗提液中的雜質去除，可根據酶的性質進行；⑤儲存：分離純化後將酶製品濃縮、儲存，一般在-20℃以下長期儲存。
第8章糖代謝
糖的生理功能
① 氧化供能：醣類是人體最主要的供能物質，佔全部供能物質供能量的70%；與供能有關的醣類主要是葡萄糖和糖原，前者為運輸和供能形式，後者為貯存形式。
② 作為結構成分：醣類可與脂類形成醣脂，或與蛋白質形成醣蛋白，醣脂和醣蛋白均可參與構成生物膜、神經組織等。
③作為核酸類化合物的成分：核醣和脫氧核醣參與構成核苷酸，dna，rna等。
④轉變為其他物質：醣類可經代謝而轉變為脂肪或氨基酸等化合物。
葡糖–6–磷酸特點:
(1)分子不穩定，易參與進一步的代謝反應。(2)帶負電，不能自由通過細胞膜逸出細胞被保留在細胞內，利於參與代謝反應。
課件內容大綱
通過學習，提高對工程資料編制 收集 歸檔的工作能力，能準確 規範編制工程資料，整理好施工圖紙以及造價資料，掌握施工技術質量資料的歸檔要求，熟悉工程竣工資料的歸檔程式。工程資料編制流程 開工前後資料內容 1.1 招標檔案 1.2 中標通知書 1.5 圖紙會審記錄 1.6 施工組織設計 1 施工組織設計...
課件流程與內容
光的折射 教學目標 一 知識與技能 1 知道光的折射現象 2 知道光的折射現象的初步規律及在折射現象中光路可逆 3 能夠應用光的折射解釋生活中的一些簡單現象。二 過程與方法 1 使學生初步掌握正確觀察折射現象以及對實驗現象進行分析和歸納的方法 2 使學生體驗通過實驗 折射現象 歸納出規律的過程。三 ...
監理細則內容補充
六 監理實施程式與工作流程 1 施工階段監理工作總程式圖 2 施工組織設計 施工方案 審批工作流程圖不同意，修改後 再報同意 3 開工申請簽認工作流程圖 返回重報 4 工程測量定線簽認工作流程圖 不不不合格 5 建築材料 建築構配件 裝置質量控制工作流程圖6 單位工程質量控制工作流程圖 7 現澆砼澆...