實驗七細菌鑑定中常用的生化實驗

2021-04-08 19:18:18 字數 935 閱讀 6625

3、儀器與用品

恆溫培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、電爐子、帶刻度搪瓷杯、玻璃棒、試管、試管架、移液管、發酵管、三角瓶、廣泛ph試紙、培養皿、吲哚試劑、乙醚、盧哥氏碘液

四、實驗方法與步驟

(一)糖發酵實驗

1、培養基的製備、分裝與滅菌 2組做乙份500ml

分裝三分之一到四分之一,同時將裝有培養液的發酵管倒置於試管中,塞好棉塞,包紮。每組裝5管,115℃/30min滅菌。

2、接種與培養採用無菌操作技術將大腸桿菌和產氣桿菌分別接種於試管中,置於37℃恆溫培養箱中培養2d,另作一空白對照。

3、觀察結果與對照管比較,顏色不變,表明該菌不能利用葡萄糖,反應結果為陰性,若培養液變黃,表明該菌能分解葡萄糖產酸,為陽性。倒置發酵管中如有氣泡,上浮,表明代謝產氣。

(二)吲哚實驗

1、培養基的製備、分裝與滅菌

2、接種與培養於試管壁上註明菌種名稱,置於37℃恆溫培養箱中培養2d.

3、觀察結果取出試管,在培養液中加入乙醚1ml,充分振盪,使吲哚溶於乙醚中,靜置片刻,使乙醚浮到培養液上層。然後再沿管壁緩慢加入吲哚試劑5滴,如有吲哚存在,則乙醚層呈現玫瑰紅色。注意:

加入試劑後,不可再搖動,否則介面液體被混合,紅色環不明顯。記錄實驗結果。

(三)澱粉水解實驗

1、培養基的製備、分裝與滅菌

將配置好的培養基分裝到2個三角瓶中,121℃/30min滅菌

2、接種與培養

將溶化後的培養基無菌操作倒平板,待冷凝後,用接種環無菌操作,挑取少許大腸桿菌點接於平板一邊,另一邊用同樣方法點接產氣桿菌。置於37℃恆溫培養箱中培養2d。

3、觀察結果

取出平板,開啟平皿蓋,滴加碘液,輕輕旋轉,使碘液均勻鋪滿整個平皿。菌落周圍如果出現無色透明圈,則說明澱粉已經被水解,表示該菌具有分解澱粉的能力。可以用透明圈大**明測試菌種水解澱粉能力的強弱。

五、實驗作業

列表記錄實驗結果。

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