2.2.4.5 融合蛋白的親和層析純化及洗脫
首先將沉澱懸浮於pbs溶液中，加入5%的甘油和終濃度為1mm的pmsf混勻，接著按novagen蛋白純化試劑盒的操作指南進行非變性純化，收集洗脫下來的目的蛋白。具體步驟如下:
1 裝柱
1) 溫和混勻瓶中組氨酸標籤樹脂，將勻漿轉移至柱中，樹脂在重力作用下沉積，使沉積後的樹脂體積達到2.5-3ml。
2) 待柱中液體降到柱床頂部，用下面的順序的洗滌液填充和平衡柱子：
3) 3倍柱體積無菌去離子水。
4) 5倍柱體積1×charge buffer。
5) 3倍柱體積1×binding buffer。
6) 20％乙醇4℃儲存
2 親和層析純化融合蛋白
1) 1×binding buffer引流至柱頂。
2) 加入樣品，流速控制在每小時10個柱體積。
3) 10倍柱體積1×binding buffer洗脫雜蛋白。
4) 6倍柱體積1×wash buffer 洗脫雜蛋白。
5) 6倍柱體積1×elute buffer洗脫目的蛋白。
3 樹脂的再生
當柱子流速變慢或者加入charge buffer後樹脂不是很藍，這時需要徹底清洗樹脂，步驟如下：
1) 2倍柱體積6m鹽酸胍、0.2m乙酸。
2) 2倍柱體積去離子水。
3) 1倍柱體積2％sds。
4) 1倍柱體積25％乙醇。
5) 1倍柱體積50％乙醇。
6) 1倍柱體積75％乙醇。
7) 5倍柱體積100％乙醇。
8) 1倍柱體積75％乙醇。
9) 1倍柱體積50％乙醇。
10) 1倍柱體積25％乙醇。
11) 1倍柱體積去離子水。
12) 5倍柱體積100mm edta，ph 8.0。
13) 3倍柱體積去離子水。
14) 3倍柱體積20％乙醇。貯存於4℃。
2.2.4.6 目的蛋白的脫鹽
按照蛋白純化儀中的脫鹽程式進行脫鹽，收集蛋白液。
2.2.4.7 純化的重組chifn-γ原核表達蛋白濃度的測定
測定純化重組chifn-γ原核表達蛋白的濃度，按考馬斯亮蘭蛋白測定試劑盒（南京建成生物工程研究所）操作說明，具體步驟如下表：
混勻，靜置10min，於595nm處，1cm光徑，蒸餾水調零，測各管od值。
計算公式如下：
2.2.4.8 重組chifn-γ原核表達蛋白純化產物sds-page分析
取純化產物5μl進行sds-page分析。
FA VD 001純化水處理系統確認方案
純化水處理系統 確認方案 1 目的 建立純化水系統再確認方案，考察純化水處理系統經過長期執行並部分改造後各項效能指標是否符合設計要求，理化 微生物檢驗是否符合規定。2 範圍 適用於製劑室純化水系統的執行確認和效能確認。3 人員 質量控制組負責驗證過程的取樣 檢驗及結果報告 生產部門負責編制裝置使用標...
前處理員工崗位職責
1 服從上級工作安排。2 在裝框上架前，每批工件要分清楚工程名稱 顏色編號 批次，不要混裝。3 在裝框上架時，工件與工件之間正面要墊鋁條，以防無法進水耍返除油。4 在裝框上架時，檢查工件有無膠漬 大頭筆印，如有用天那水擦掉。5 除油前，請參閱除油工藝流程操作。6 根據實驗室對油缸檢測出的ph值，按照...
中藥提取前處理車間培訓
第一章藥劑衛生 一 藥品衛生標準 1 口服藥品 1g或1ml不得檢出大腸桿菌，含動物及臟器的藥品同時不得檢出沙門菌，不得檢出活蟎。2 外用藥品 1g或1ml不得檢出綠膿桿菌金黃色葡萄菌，其中創傷 潰瘍用製劑不得檢出破傷風桿菌，不得檢出活蟎。3 其它藥品 1 膜劑 細菌數及黴菌數每10cm2不得超過1...