蛋白純化方法大全

蛋白純化的技術很複雜，以下就會大家熟知蛋白純化步驟。那為什麼蛋白質要純化呢，去掉蛋白質含有的一些雜質與其他蛋白質一起沉澱。那麼又要去除蛋白質的雜質又要保證蛋白質的營養不被流失，於是就要製作不同的方案來應對，稱為蛋白純化技術。

根據蛋白的相似度和差異去除蛋白中的雜質!

1、粗分級分離

當蛋白質提取液(有時還雜有核酸、多醣之類)獲得後，選用一套適當的方法，將所要的蛋白與其他雜蛋白分離開來。一般這一步的分離用鹽析、等電點沉澱和有機溶劑分級分離等方法。這些方法的特點是簡便、處理量大，既能除去大量雜質，又能濃縮蛋白溶液。

有些蛋白提取液體積較大，又不適於用沉澱或鹽析法濃縮，則可採用超過濾、凝膠過濾、冷凍真空乾燥或其他方法進行濃縮。

2樣品經粗分級分離以後，一般體積較小，雜蛋白大部分已被除去。進一步純化，一般使用層析法包括凝膠過濾、離子交換層析、吸附層析以及親和層析等。必要時還可選擇電泳法，包括區帶電泳、等電點聚焦等作為最後的純化步驟。

用於細分級分離的方法一般規模較小，但解析度很高。

3結晶是蛋白質分離純化的最後步驟。儘管結晶過程並不能保證蛋白一定是均一的，但是只有某種蛋白在溶液中數量上占有優勢時才能形成結晶。結晶過程本身也伴隨著一定程度的純化，而重結晶又可除去少量夾雜的蛋白。

由於結晶過程中從未發現過變性蛋白，因此蛋白的結晶不僅是純度的乙個標誌，也是斷定製品處於天然狀態的有力指標。

41.機械破碎法

這種方法是利用機械力的剪下作用，使細胞破碎。常用裝置有，高速組織搗碎機、勻漿器、研缽等。

2.滲透破碎法

這種方法是在低滲條件使細胞溶脹而破碎。

3.反覆凍融法

生物組織經凍結後，細胞內液結冰膨脹而使細胞脹破。這種方法簡單方便，但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜採用此法。

4.超聲波法

使用超聲波**器使細胞膜上所受張力不均而使細胞破碎。

以上就是蛋白純化的步驟，給大家了解一下。這項技術目前在國內越來越先進，去除蛋白中的雜質讓蛋白更純粹。這是一項很複雜的技術有興趣的人可以多學習，要分離蛋白中的雜質還要純化裡面的蛋白，要製作出不同的方案，所以這項技術目前不斷的發展，未來蛋白純化的技術會越來越好。