沙棘組織培養中褐化問題的研究
杜研李毅馬彥軍王婭麗
甘肅農業大學林學院蘭州 730070）
摘要：通過對沙棘(hippophae rhamnoides l.)組織培養中褐化問題的研究，得出以下結論：
選取沙棘水培休眠芽的腋芽做外植體,使用1/4ms培養基和0.5mg/l的6-ba，適當提高培養基硬度,無菌苗初期勤轉種並進行暗處理,降低溫度,是削弱或減輕褐化現象的有效措施.
關鍵詞:沙棘；組織培養；褐化現象
study on the browning during tissue culture of hippophae rhamnoides l.
duyan liyi mayanjun wangyali
(the forest college of gansu agriculture university)
abstract:by the study on the browning during tissue culture of hippophae rhamnoides l..the following results h**e been obtained:
taking the dormancy bud of the adult tree hippophae rhamnoides l. which brought up the water,using 1/4ms medium added with low level hormone,creasing properly the hardness of medium,explantation frequency of the explant at an early stage of culture ,dark treatment and decreasing temperature all are effective to decrease or lighten browning.
key words: hippophae rhamnoides l. tissue culture browning
沙棘(hippophae rhamnoides l.)屬胡頹子科沙棘屬的一種落葉灌木或小喬木。具有廣泛的生態效益和社會效益,它既具有防風固沙、保持水土、改善環境等作用,又具有很高的營養及藥用價值。
利用沙棘的頂芽，腋芽，幼葉等部分進行組織培養,已有很多成功的報道。但對沙棘組織培養中褐化問題的研究，還未見報道.沙棘是落葉木本植物，組織培養中褐化現象嚴重，常導致組培苗褐化死亡。
本文研究了影響外植體褐化的有關因素。
1 材料和方法
1.1 供試材料中國沙棘取自蘭州種苗繁育中心。
1.2 方法採用單因子實驗,每組實驗均設對照並重複3次.接種後30d統計褐化率.
1.2.1 不同部位的外植體材料對褐化的影響.
材料3種：①一年生幼枝上的頂芽，②二年生幼枝上的腋芽，③冬季水培後的休眠芽。以上三種外接體材料，每種接種30個芽，培養基均為1/4ms+6-ba0.
5mg/l+naa0.2mg/l,蔗糖20g/l，瓊脂4g/l，ph值為6.0，溫度25℃+2，光照15h/d，光照強度4000lx。
以下實驗條件均與此相同。
1.2.2 無機鹽濃度對沙棘褐化的影響。培養基中無機鹽濃度過高，可致使酚類物質的大量產生，導致細胞褐變；降低鹽濃度可以減少酚類外溢，從而減輕褐變。培養基3種：
①ms+6-ba0.5mg/l+naa0.2mg/l,②1/2ms+6-ba0.
5mg/l+naa0.2mg/l,③1/4ms+6-ba0.5 mg/l +naa0.
2 mg/l。
1.2.3 6-ba濃度對沙棘褐化的影響。①6-ba0.5mg/l, ②6-ba1.5mg/l, ③6-ba3.0mg/l.
1.2.4 培養基硬度對沙棘褐化的影響。培養基分為3種：①瓊脂4g/l，②瓊脂5g/l，③瓊脂6g/l。
1.2.5 轉接週期的長短對沙棘褐化的影響。分為2個處理：①每15天轉接一次，②每30天轉接一次。
1.2.6 光照和培養溫度對褐化的影響。
將培養基分2種處理：①接種後進行5d的暗處理,溫度15~18℃，然後轉入正常試驗條件；②接種後直接置於4000lx,25~28℃的溫度下培養。
1.2.7 抗氧化劑vc及活性炭對褐化的影響將培養基分為3種：①為空白對照實驗；②附加抗氧化劑vc；③附加活性炭.
2結果2.1 外植體生長狀況對褐化的影響
從表1可知,用沙棘冬季休眠芽經過2周水培後的幼芽作外植體,比用沙棘一年生和兩年生枝條上的壯芽做外植體,褐化輕,褐化率低.
表1 外植體生長狀況對褐化的影響
tab.1 effect of the hippophae rhamnoides of explant on the browning
2.2 無機鹽濃度對褐化的影響
從表2可知，用1/4的ms培養基，降低無機鹽濃度，可以減輕褐化現象，降低褐化率。
表2 無機鹽濃度對褐化的影響
tab.2 effect of the concent ration of inorganic salt on the browning
2.3 6-ba濃度對褐化的影響
從表3可知，6-ba濃度低，可以減輕沙棘的褐化，降低褐化率。
表3 6-ba濃度對褐化的影響
tab.3 effect of the 6-ba concentration on the browning
2.4培養基硬度對褐化的影響
從表4可知，瓊脂用量大,培養基硬度大,褐化率低.隨瓊脂用量的減少,培養基硬度減小,褐化重,褐化率高。
表4 培養基硬度對褐化的影響
tab.4 effect of the hardness of medium on the browning
2.5轉接週期的長短對褐化的影響
從表5可知，轉接週期越短，褐化率越低，可見在芽接種後的前期短期轉接可以有效地抑制褐化。
表5 轉種週期長短對褐化的影響
tab.5 effect of the length of cycle of moving plants on the browning
2.6光照和培養溫度對褐化的影響
從表6可知，低溫和暗處理可以降低沙棘的褐化率。
光照和培養溫度對褐化的影響
tab.6effect of the temperature and light on the browning
2.7抗氧化劑vc及活性炭對褐化的影響
從表7可知,vc及活性炭的使用能有效減弱褐化,但苗生長緩慢.
表7抗氧化劑vc及活性炭對褐化的影響
tab.7effect of the antiox idant vitamine and charcoal on the browning
3 討論
木本植物沙棘，在組織培養中褐化現象嚴重。其組織創傷面的酚類物質，一旦接觸空氣便氧化為醌類有毒物質，這些有毒物質積累在培養基中，而使培養材料中毒死亡[2,3]。
外植體的生理狀況，對無菌苗的建立起重要作用。褐變一般隨著培養材料的年齡和組織木質化程度的提高而加劇[5]。生長旺盛的芽，水分含量高，代謝速度快，但褐化較重，對消毒液極敏感。
經過水培以後的沙棘幼芽，耐消毒，褐化較輕，做苗成功率高.
在無菌苗初期進行勤轉種，較為重要，它能有效防止褐化死亡，消除褐化產物的積累。無菌苗在培養瓶中經多次轉種訓化，適應瓶中的環境後,再延長轉種週期，對褐化幾乎無影響。轉種後3~5d內進行低溫及暗處理，能有效防止褐化的產生，減弱褐化。
這主要是由於低溫暗處理減弱了代謝速度,減少了醌類物質的形成.
沙棘的繁殖與管理
2006 7 19 17 04 26 人氣 425 沙棘，又名醋柳 酸刺 黑刺，屬胡頹子科沙棘屬，是具有共生固氮能力的落葉灌木。植株高達3公尺至10公尺，具粗壯棘刺，幼枝密被褐鏽色鱗片。葉互生或近對生，長2厘公尺至6厘公尺，寬0.4厘公尺至1.2厘公尺，兩端鈍尖，背面密被談白色鱗片。花淡黃色，花小，...
延安沙棘資源的報告A
清華德人西安幸福製藥關於開發延安沙棘資源的報告 尊敬的姚書記 我公司是與清華大學醫學院組建的現代化製藥高科技企業，主要以現代中藥和保健藥品為主。企業依託清華大學醫學院 西安交通大學醫學院 第四軍醫大學 中國中醫科學院 陝西省中醫藥研究院 陝西中醫學院 西安醫學院的科研力量，致力於產學研相結合以開發 ...
水稻褐飛蝨危害等級的模型預報
摘要以1987 2006年泰州地區水稻褐飛蝨危害程度為研究物件,在月平均氣溫 月降水量 月降水日數 0.1mm日數 月平均相對濕度 月日照時數等因子中,選取相關係數較高且穩定性好的 因子,在逐步回歸分析方法的基礎上,整合建立了水稻褐飛蝨危害程度的農業氣象預報模型。經過回報檢驗,顯示該模式簡單 實用,...