重組蛋白g(recomb protein g)已經除去了與白蛋白及細胞表面結合位點，減少了交叉反應和非特異性結合。因此，它比天然蛋白g和蛋白a有更大的親和力。可以代替二抗，廣泛應用於免疫化學等領域。
在親和力、穩定性等方面好。
本產品將我公司自主設計和生產的新型重組蛋白g偶聯到環氧活化的瓊脂糖凝膠6b上，成為用於抗體分離純化的親和層析介質
本產品穩定性好，基團脫落少，使用壽命長，使用方便，可從腹水或培養液中直接分離純化抗體。
由於採用了環氧活化的方法，與溴化氰活化方法相比，可獲得長短更適合的結合臂，使抗體純化獲得更好的效果。並且這種方法活化的瓊脂糖凝膠沒有離子交換的作用，因而其死吸附少。
二、 親和介質特性：
三、 適用範圍
protein a和protein g的相對結合強度
++++ =強結合，++ =中等結合，- =弱或不結
四、 緩衝液配製
建議採用磷酸緩衝液，洗脫後不影響下游的標記。
a緩衝液1mol/l na2hpo4.12h2o(mw358.14)……………… 358.14g
1500 mm nacl l(mw68.08g/mol87.7g
溶於1公升水，濾膜過濾
b緩衝液 1mol/l nah2p04 (mw156.01156.01g
1500 mm nacl l(mw68.08g/mol87.7g
溶於1公升水，濾膜過濾
c吸附和洗滌緩衝液
根據所需ph值，按下錶3配製。按照所列比例量取後混合，然後再加9倍體積的水，稀釋成應用溶液。
如果洗脫下的抗體有些雜帶，可加吐溫-20至終濃度0.05%
d中和緩衝液:a液77.4ml 、b液22.6ml；兩液混合成ph7.4的中和緩衝液
e洗脫液 0.1mol/l nah2p04 (mw156.0115.601g
150 mm nacl l(mw68.08g/mol8.77g
溶於1公升水，濾膜過濾，hcl調整ph至3.0
五、應用舉例
a實驗名稱：從小鼠腹水中分離純化igg2a
1、 重組蛋白g 瓊脂糖凝膠裝柱，柱床體積為1ml，流盡20%乙醇溶液；
2、以緩衝液c平衡5-10個床體積，流速為1ml/min；（緩衝液c配製方法：取a液35.2ml、b液64.8ml，再加900ml水，混合後ph6.5）.
3、 將0.2ml小鼠腹水用緩衝液c稀釋到2ml，0.45μm 濾膜過濾，上樣。流速為1ml/min；
4、 用緩衝液c再洗5-10 個床體積，流速為1ml/min；
5、 用洗脫液e,洗脫3體積。
6、在洗脫液加入0.2體積中和緩衝液，以ph試紙確認溶液為中性。溶液太酸，會損傷抗體活性（中和緩衝液配製方法：
a液77.4ml 、b液22.6ml；兩液混合成ph7.
4的中和緩衝液
7、 將分離純化的igg2a 與對照品同時進行sds-page 電泳分析。
8、 用純水流洗10個柱床體積，再用20%的乙醇流洗10 個柱床體積，流速為2ml/min，
柱子置於+4~8℃環境中儲存
表三，25℃下0.1mol/l磷酸鈉緩衝液的配製
根據比例量取混合，然後在加9倍體積的水，稀釋成應用溶液。
b免疫沉澱(immunoprecipitation, ip)：
（1）蛋白樣品的準備：
1）對於10厘公尺細胞培養皿中的貼壁細胞，吸除細胞培養液，pbs洗滌一次，然後加入500微公升至2毫公升細胞裂解液裂解細胞。
3） 對於組織樣品參考貼壁細胞使用裂解液的比例進行裂解。
4）對於懸浮細胞，離心收集細胞後，pbs洗滌一次，然後參考貼壁細胞的裂解方法進行裂解。
注：詳細的裂解方法參考不同裂解液的詳細使用方法。對於不同的培養器材，參考10厘公尺培養皿的裂解液的用量進行裂解。
如果裂解獲得的蛋白樣品濃度過高，可以用裂解液或pbs適當稀釋，如果蛋白樣品濃度過低，在以後的裂解過程中宜適當減少裂解液的用量。
（2）.去除非特異性結合(可選做)：
1）. 取200微公升至1毫公升蛋白樣品，蛋白量約為200微克至1毫克，加入約1微克和免疫沉澱時使用的igg種屬相同的普通igg和20微公升充分重懸的protein a+g agarose，4℃緩慢搖動30分鐘至2小時。
2）. 2500rpm(約1000g)離心5分鐘，取上清用於後續的免疫沉澱。
注：所謂種屬相同的igg是指，例如後續免疫沉澱時用的是小鼠igg，則在本步驟中可以加入normal mouse igg，如無normal igg可以加入其它不影響後續檢測的其它mouse igg型別的抗體。通過和normal igg和protein a+gagarose的孵育，可以充分降低非特異性的結合，降低背景。
（3）.免疫沉澱：
1）. 加入0.2-2微克用於免疫沉澱的一抗，4℃緩慢搖動過夜。
2）. 再加入20微公升充分重懸的protein a+g agarose，4℃緩慢搖動1-3個小時。(為方便後續的洗滌操作可以把加入充分重懸的protein a+g agarose的量調整為40微公升。
)3）. 2500rpm(約1000g)離心5分鐘，或瞬時高速離心，小心吸除上清，注意寧可留下少量上清也不能吸掉protein a+gagarose。
4）. 用準備蛋白樣品時的裂解液或pbs洗滌沉澱5次，裂解液或pbs的用量每次為0.5-1毫公升。洗滌時離心條件和吸除上清的要求同上面的步驟c3。
5）. 完成最後一次洗滌後，去除上清，加入20-40微公升1xsds-page電泳上樣緩衝液vortex重懸沉澱，瞬時高速離心把樣品離心至管底。
6）. 100℃或沸水浴處理3-5分鐘，取部分或全部樣品用於sds-page電泳，暫時不用的樣品可以-20℃儲存。
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