馬能溢，宋英*，錢佳華
（上海市中藥研究所，201203）
摘要：目的建立丹參分散片中丹參總酚酸及丹酚酸b的測定方法。方法以丹酚酸b作對照品，採用uv法測定丹參分散片中丹參總酚酸的含量；採用hplc法測定丹參分散片中丹酚酸b的含量。
結果本品中丹參總酚酸在0.20mg~1.20mg範圍內呈良好的線性關係（r=0.
9998，n=6），平均**率為99.69%，rsd=0.97%；丹酚酸b在0.
44μg~2.20μg範圍內呈良好的線性關係(r=0.9999，n=5)，平均**率為95.
63%，rsd=1.22%。結論本方法簡便可行，重複性好，可有效控制丹參分散片的質量。
關鍵詞：丹參分散片；uv；hplc；丹參總酚酸；丹酚酸b
[所屬專業]藥劑（藥劑質量標準研究）
丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參salvia miltiorrhiza bge.的乾燥根及根莖，是中醫臨床**心腦血管疾病的常用藥材，祛瘀止痛，活血通經，對心血管系統，能擴張血管，加快血流，改善微迴圈，改變血液黏滯性[,2]。現代藥理學研究表明水溶性酚酸類是丹參的主要有效成分，其中丹酚酸b含量最高，活性最強[3,4]。
為進一步提高藥物生物利用度，因而將其製成分散片，與普通片劑相比，在崩解及溶出速率方面都大大增加。為了控制丹參分散片的質量，保證療效，本文採用uv法對丹參總酚酸進行含量測定，採用hplc法對丹酚酸b進行含量測定，方法簡便、準確、可控。
1 儀器與試藥
1.1 儀器
lc-10atvp高效液相色譜儀（島津公司）；uv-2401pc型紫外分光光度儀（島津公司）；cq型超聲波清洗器（上海滬超聲波儀器****）；ag285型電子天平（mettler公司）
1.2 試藥
所用試劑中除甲醇為色譜純，其餘試劑均為分析純。丹酚酸b對照品（中國藥品生物製品檢定所，批號
111562-200605）；丹參分散片（自製）。
2. 總丹參酚酸的含量測定
2.1 溶液的製備
2.1.1 對照品溶液的製備
精密稱取丹酚酸b對照品，加60%甲醇製成0.40mg/ml溶液，作為對照品儲備液。
2.1.2 供試品溶液的製備
取丹參分散片10片，研細，取約0.15g，精密稱定，至50ml容量瓶中，加入40ml60%甲醇，超聲30min，放冷，以60%甲醇定容，搖勻。過濾。
精密量取續濾液1ml至10ml容量瓶，以60%甲醇定容，搖勻，即得。
2.1.3 陰性樣品溶液的製備
根據處方製成不含丹參提取物的分散片，按2.1.2項下供試品溶液製備方法處理，作為陰性樣品溶液。
2.2 波長的選擇
精密量取2.1.1項下對照品儲備液2ml，至25ml容量瓶，加60%甲醇定容，搖勻，作為對照品溶液，同上述另2種溶液於紫外分光光度儀中在190nm～500nm範圍內進行掃瞄，記錄紫外吸收光譜，結果見圖1，所測得樣品與對照
品最大吸收波長為286nm，且空白樣品無干擾。
圖1 波長掃瞄圖
1 丹酚酸b對照品；2 供試品；3 陰性樣品
2.3 線性關係考察
精密量取2.1.1項下對照品儲備液0.
5，1，1.5，2，2.5，3ml分別至25ml容量瓶中，以75%甲醇定容，搖勻。
以75%甲醇為空白，在286nm波長處測定吸收度。以吸收度為縱座標、丹參總酚酸濃度為橫座標繪製標準曲線，得回歸方程：y=21.
286x-0.0082，r=0.9998，n=6。
表明丹參總酚酸在0.20mg~1.20mg範圍內呈良好的線性關係。
2.4 重複性試驗
取同一批號的丹參分散片，按2.1.2項下供試品溶液製備方法，重複進行6次平行試驗，測定吸收度，結果rsd＝1.21％，結果表明本方法重複性良好。
2.5 加樣**率試驗
稱取已知含量的丹參分散片（批號 20071208）5份，每份約0. 1g，精密稱定，至50ml容量瓶中，分別精密加入2.1.
1項下對照品儲備液5ml，按2.1.2項下方法處理，測定吸收度。
根據標準曲線計算樣品中丹參總酚酸的含量。結果見表1。
表1 uv加樣**率試驗結果
結果丹參總酚酸以丹酚酸b計平均**率為99.69%，rsd為0.97%，表明此方法的加樣**率良好。
2.6 樣品測定
取3批丹參分散片，按2.1.2項下方法製備供試品溶液，測定吸收度。根據標準曲線，得出樣品中總丹參酮的含量。結果見表2。
表2 丹參總酚酸含量測定結果
3 丹酚酸b的含量測定
3.1 色譜條件
色譜柱：zorbax ods (4.6×150mm,5μm)；流動相：
甲醇-1%乙酸(45:55)；柱溫：25℃；流速：
1.0ml/min；檢測波長：286nm。
進樣量為10μl。理論塔板數按丹酚酸b峰計算應不低於1000。此條件下分離情況良好，陰性無干擾。
見圖2、圖3、圖4。
圖2 陰性樣品色譜圖
圖3 丹酚酸b對照品色譜圖
1 丹酚酸b
圖4 供試品色譜圖 1 丹酚酸b
3.2 溶液的製備
3.2.1 對照品溶液的製備
精密稱取丹酚酸b對照品，加水製成0.22mg/ml的溶液，作為對照品溶液。
3.2.2 供試品溶液的製備
取丹參分散片10片，研細，取約0.2g，精密稱定，至50ml容量瓶，加入60%甲醇40ml甲醇，超聲30min，放冷，加60%甲醇定容至刻度，搖勻。用0.
45m微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。
3.2.3 空白樣品溶液的製備
根據處方製成不含丹參提取物的分散片，按3.2.2項下供試品溶液製備方法處理，作為陰性樣品溶液。
3.3 線性關係考察
精密吸取3.2.1項下丹酚酸b對照品溶液2、4、6、8、10μl，按上述色譜條件測定，以峰面積積分值為縱座標，丹酚酸b量為橫座標繪製標準曲線，計算得回歸方程：
y=1259252x-14333(r=0.9999，n=5)，表明丹酚酸b量在0.44μg~2.
20μg範圍內具有良好的線性關係。
3.4 精密度試驗
精密吸取3.2.1項下丹酚酸b對照品溶液10μl，重複進樣5次，測定峰面積，結果rsd為0.78%，表明此方法精密度良好。
3.5 穩定性試驗
精密吸取3.2.2項下供試品溶液，分別在0，1，2，4，5，6h進樣10μl，測定峰面積積分值，結果rsd為1.09％(n=6)，表明供試品溶液分別在6h內穩定。
3.6 重複性試驗
取同一批樣品精密稱取約0.15g，按供試品溶液製備法處理，進行6次平行試驗，測定丹酚酸b含量，結果其rsd為0.91%，表明此方法重複性良好。
3.7 加樣**率試驗
稱取已知含量的丹參分散片（批號 20071208，含量為1.98%）5份，每份約0. 1g，精密稱定，至50ml容量瓶中，分別精密加入2.
1.1項下對照品儲備液4ml，按3.2.
2項下方法處理，測定丹酚酸b的含量，計算**率。結果見表3。
3 hplc加樣**率試驗結果
結果丹酚酸b平均**率為95.63%，rsd為1.22%，表明此方法的加樣**率良好。
3.8 樣品測定
取3批不同批號丹參分散片，按3.2.2項下方法製備供試品溶液，按上述色譜條件進行測定，以外標法計算樣品中丹酚酸b的含量。結果見表4。
表4 丹酚酸b含量測定結果
4 討論
4.1 溶劑的選擇
在供試品溶液的製備過程中，由於輔料等因素可能會對目標成分的溶出度產生影響，能否最大程度的提取出藥品中的目標成分，將影響到含量測定的準確性。按3.2.
2項下方法，本文採用不同溶劑超聲提取，進行含量測定，結果見表5，表明60%甲醇為最佳的提取溶劑。
表5不同溶劑超聲後丹酚酸b含量的比較
4.2 超聲處理時間選擇
丹酚酸b具有熱不穩定性[5]，加熱時間越長降解越多。因此，採用超聲對樣品進行處理，方法簡單，同時避免了丹酚酸b因熱不穩定性而降解。在超聲的時間確定上，本文對比了超聲15min、30min、45min後所測得的丹酚酸b含量，見表6。
結果表明超聲30min的效率最高。
表6不同超聲時間丹酚酸b含量比較
4.3 丹參水溶性成分具有抗心肌缺血與缺氧的作用，其主要是由酚酸類物質組成的，而丹酚酸b又是酚酸類中含量最多，藥理活性最強的成分。因此，同時將丹參總酚酸及丹酚酸b作為指標成分，能夠很好的控制丹參分散片的質量。
參考文獻
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[5]程良嵩．hplc法測定健骨通膠囊中丹酚酸b的含量[j]．海峽藥學，2007，19(10)：50．
丹參的妙用
10 丹參片功效與作用 功效與作用 丹參片是臨床常用的一種中成藥，它是由單味丹參浸膏後提取而成的。丹參屬於中藥中的常用藥，以往對丹參作用的研究多集中在心腦血管方面，它在 冠心病 腦梗死等疾病上的理想療效已是家喻戶曉。丹參的作用 心血管系統的作用 強心加強心肌收縮力 改善心臟功能，不增加心肌耗氧量 對...
丹參的作用與功效
一 心血管系統的作用 1.強心加強心肌收縮力 改善心臟功能，不增加心肌耗氧量 2.對血管作用擴張冠脈，增加心肌血流量 擴張外周血管，血流增加 腦血流量下降 3.抗血栓形成提高纖溶酶活性 延長出 凝血時間 抑制血小板聚集 提高血小板內camp水平抑制txa2合成 改善血液流變學特性 血粘度降低 紅細胞...
丹參茶的功效與作用
丹參茶是一種常見的補品，它主要是用來活血調經以及養血安神的，這對於很多女性朋友的月經期是有很好療效的。我們在平時適當的喝一些丹參茶可以更好的 月經不調 閉經以及痛經，所以對於廣大的女性朋友，特別是哪些容易出現痛經的朋友，你們應該要適當的去吃一些丹參茶，減少痛經的影響。對於女性每乙個月的月經期，她們的...