如何去除內毒素

2022-03-23 23:22:52 字數 949 閱讀 2816

3.2.1原本法用於去除實驗用玻璃器皿上的內毒素。

將玻璃器皿置於烤箱中,加熱到250℃,持續30min,即可去除內毒素。 3.2.

2方法與步驟 1、內毒素去除效率的評估(1)製備濃度分別為1000和1000eu/ml的cse溶液。按內毒素測量方法檢測這些溶液。(2)向所有待去除內毒素的玻璃器皿滴入1ml的cse溶液。

(每種型別的玻璃器皿至少有3eu的cse)。(3)將玻璃器皿置放烤箱中,在60℃下,乾烤持續30min,烘乾,然後在烤箱中,250℃下,乾烤30min。(4)加入適量的lal水,劇烈振盪5min,以清洗玻璃器皿,然後測量清洗後的lal水中的內毒素的濃度。

(5)比較原來的內毒素含量和現存的內毒素濃度。當內毒素含量至少減少了3—log時,該方法有效。必要時,重複操作,去除內毒素。

用鱟度驗法計算內毒素去除的百分比。 2、去除實驗玻璃器皿上的內毒素確定可使內毒素玻璃器皿上的內毒素對於用來配置無同一內毒素溶液的玻璃器皿,重複操作,直至內毒素含量下降3—log。 (例如,1000 ieu和10000 10eu)數個加熱迴圈後,用前述的鱟試驗法,測定內毒素含量。

3、對照陰性對照:用只盛有lal水的玻璃器皿,在250℃下,乾烤30min並用lal法測量內毒素的含量。陽性對照:

乾燥(60℃,30min)每種玻璃器皿中的內毒素溶液,不經過乾烤(250℃,30min)去內毒素的操作,然後測定其內毒素質量。 3.2.

3質控與提示 (1) 保烤箱散熱均勻,為此,在操作過程中,可將玻璃器皿放置在烤箱中的每一層上,當溫度在 250℃後,溫度的波動不要超過±15℃。(2)用含100eu的內毒素過行的檢測,可用來確定去內毒素的效率。用含10000eu的內毒素進行的檢測,可用來確定對內毒素含量較高的器皿去除內毒素的效率。

(3)如果如果不理想,可增加每一次操作的時間和操作次數。(4)其他技術適用於培養基的內毒素,例如,超濾,反向滲透,但比較昂貴。選取有效的濾過膜,確保去內毒素後,培養基的營養成分不丟失並且內毒素含量下降3—log。

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