細菌內毒素檢查方法概述

（一）本法系利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝集的反應機理，以判斷供試品中細菌內毒素的限量是否符合規定的一種方法。　　細菌內毒素標準品系自大腸桿菌提取精製得到內毒素。以細菌內毒素國際標準品為基準物，以過協作標定，使標準品單位與國際標準品單位含義一致。

用於標定細菌內毒素工作標準品和促裁鱟試劑靈敏度。　　細菌內毒素工作標準品系以細菌內毒素標準品為基準物進行標定，確定基重量的相當效價。每1mg工作標準品效價應不小於2eu，不大於50eu，並具備均一性和穩定性的實驗資料。

效價測定方法如下：每批工作標準品至少取4支樣品，使用同一批號鱟試劑、同1支標準品。每支工作標準品按重量、標準品按單位，分別用內毒素檢查用水＊稀釋製備一系列2倍稀釋度的內毒素溶液，與鱟試劑反應，當4支工作標準品的反應終點的對數均值的標準差（s）小於0.

365時，計算4支工作標準品的反應終點的幾何平均值（以ng/mg表示）及標準品的反應終點值以（以eu／mg表示），按下式計算。　　（二）試驗準備本法所用的器皿需經處理，除去可能存在的外源性內毒素常用250℃乾烤30分鐘或180℃乾烤2小時，也可用其他適宜方法。試驗操作過程應防止微生物的汙染。

　　試驗前需核對使用批號鱟試劑的靈敏度標示值，應符合規定。裝量加入配帶的鱟試劑溶劑。溶解後，為鱟試劑溶液，備用。

　　供試品的稀釋：使用批號鱟試劑的靈敏度標示值小於供試品的內毒限量時，按下式計算，用內毒素檢查用水＊將供試劑品稀釋後進行檢查。　　供試品的稀釋倍數＝x／λ 　　x：

供試品的內毒素限量內毒素限量（eu／ml）　　λ：供試品鱟度劑靈敏度標示值（eu／ml）　　(三)檢查裝有0.1ml鱟試劑溶液的10×75mm試管（或0.

1ml／支規格的鱟試劑原安瓿）4支，其中2支加入0.1ml供試品作為試品管，1支加入2λ內毒素工作標準品0.1ml作為陽性對照管，1支加入配帶的鱟試劑溶液0.

1ml作為陰性對照管。將試管輕輕混勻後，封閉管口，垂直放入37±1℃水浴中，保溫60±2分鐘。保溫過程和拿取試管要小心，避免因受到振動造成陰性結果。

　　（四）結果判斷將試管從水浴中輕輕取出，緩緩倒轉1800時，管內凝膠不變形，不從管壁滑脫者為陽性記錄為（＋）凝膠不能保持完整並從管壁滑脫者為陰性，記錄為（一）。供試品2管如為（一），應認為符合規定，不再進行熱原檢查法（家兔法）試驗。如2管均為（＋），應認為不符合規定。

如2管中1管為（＋），1管為（一），按述方法另取4支供試品管複試，4管中有1管為（＋）即認為不符合規定。除正文另有規定外，有符合規定的供試品應再以熱原檢查法（家兔法）試驗，並根據的結果判定。　　供試品細菌內毒素的限量應符合各品種正文下的規定。

　　陽性對照為（一）或陰性對照為（＋），試驗無效。　　附滅菌注射用水、注射用水、氯化鈉注射液、5％和10％葡萄糖注射液細菌內毒素檢查。　　【細菌內毒素】取本品，依法檢查，供試品細菌內毒素的限量不應超過1eu／ml。

如超過1eu／ml，需經熱原檢查法（家兔法）判定。