細菌培養取樣方法

**室工作環境監測

各類環境空氣、物體表面、醫務人員手細菌菌落總數衛生學標準如下：

消毒液的取樣及檢查方法

取樣方法：用無菌吸管吸取使用中的消毒液1ml，置於備好的試管內及時送檢，送檢時間不超過4時，必要時試管中加中和劑。

取樣前準備：洗手，手套，口罩，無菌吸管，試管，酒精燈，打火機，無菌剪刀

浸泡使用的消毒液細菌培養：用於滅菌的消毒液沒有檢出任何微生物為合格；用於消毒物品的消毒液其染菌量﹤100cfu/ml.未檢出致病菌或細菌生長均為合格;

空氣取樣及檢查方法

檢查原則：每個月一次，空氣消毒結束後進行，一般不超過消毒後4小時，取樣後必須盡快對樣品進行相應指標的檢測，送檢時間不得超過4h。未檢出致病菌為合格，不得檢出乙型溶血性鏈球菌，金黃色葡萄球菌，沙門氏菌等其它致病菌，不得超過規定區域所執行的標準引數；

空氣取樣及檢查方法：

取樣時間：選擇消毒處理後與進行醫療活動之前期間取樣；

採祥高度：與地面垂直高度80－150cm；

布點方法：室內面積≤30m2，設一條對角線上取3點，即中心一點、兩端各距牆1m處各取一點;室內面積》30m2，設東、西、南、北、中 5點，其中東、西、南、北點均距牆1m，注意取樣時不走回頭路，不得逆行；

取樣方法：用9cm直徑普通營養瓊脂平板在取樣點暴露5min後送檢培養。

取樣前準備：洗手，戴口罩，培養皿（看取樣面積大小準備）；

物體表面取樣及檢查方法

取樣時間：選擇消毒處理後4小時內進行取樣；

取樣面積：被採表面<100cm2，取全部表面；被採表面≥100cm2,取100cm2；

取樣方法：用5×5cm2的標準滅菌規格板；放在被檢物體表面，用浸有無菌生理鹽水平樣液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返各塗抹5次；並隨之轉動棉拭子。連續取樣1-4個規格板面積；剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝10ml取樣液的試管中送檢。

不規則樣物品如門把手等小型物體則採用棉拭子直接塗抹物體的方法取樣。

取樣前準備：試管，酒精燈，無菌生理鹽水，棉拭子，打火機，無菌剪刀，手套，口罩，無菌規格板

醫護人員手取樣及檢查方法

取樣時間：在接觸病人、從事醫療活動前進行取樣。

取樣面積及方法：被檢人五指併攏，將浸有無菌生理鹽水取樣液的棉試子一支在雙手指曲面從指根到指端來回塗擦各兩次（乙隻手塗擦面積30cm2〕，並隨之轉動取樣棉試子，剪去手接觸部位；將棉試子放入裝有10ml取樣液的試管內這位。取樣面積按平方厘公尺（cm2）計算。

取樣前準備：試管，酒精燈，無菌生理鹽水，棉拭子，打火機，無菌剪刀，手套，口罩

滅菌後無菌物品取樣及檢查方法

在無菌操作下按物體表面取樣方法取樣，放入肉湯試管中培養；

將嗜熱脂脈桿菌片放於用專用毛巾製成的測試包中，打包成規格為23*23*15大小的標準測試包中，放於排汽口上方，經過乙個滅菌週期後，在無菌操作下取出嗜熱脂肪桿菌片放於培養皿中，經過48小時56℃培養箱培養後觀察結果。

物品準備：培養皿，二把無齒鑷