液相色譜儀操作流程

島津液相色譜儀操作流程（lc16）

單幫浦4幫浦頭

1. 準備流動相

1.1、甲醇、高純水（或二次蒸餾水），分別用有機系和水系0.45vm濾膜抽濾，超聲波15-20min，更換流動相。或者根據實驗方法選擇流動相。

1.2、注意：切勿讓水系濾膜接觸到有機相，會發生溶解。

2.根據方法檔案選擇換上合適的色譜柱。（注意色譜柱的方向）

2. 開機及排氣泡

2.1、接通電源，依次開啟幫浦、檢測器、lcsolution工作站。

2.2排氣泡

2.21、通過軟體設定沖洗條件。

開啟lc系統後，啟動【lc實時分析】工作站後，確保分析儀器的所有單元（幫浦、柱溫箱和檢測器）都已連至系統控制器。確保所有單元上都沒有顯示任何錯誤訊息。

開啟spd 新建方法檔案常規低壓梯度洗脫根據需要設定需要沖洗的幫浦頭（例：只沖洗幫浦a，設等度洗脫即可。同時沖洗幫浦a、幫浦b，則選擇低壓梯度洗脫，幫浦b設50%。

） **。

2.22、然後將排液閥旋鈕逆時針旋轉180°，以開啟排液閥，按「purge」鍵執行，開始沖洗。等待儀器，自動結束沖洗程式。關閉排液閥。

3. 設定儀器引數：

3.1【新建方法檔案】：根據實驗方法，可以在其中輸入分析條件，

流速、波長、流動相配比（如果是單幫浦單幫浦頭，需手動配製流動相。多幫浦頭可根據流動相配比設定百分比）、柱溫（若實驗方法未註明則是室溫，柱溫箱可設25攝氏度，若室內有溫控可關閉柱溫箱選項）、lc停止時間（未知保留時間表樣，或複雜成分樣品，選最大時間，或出現目標峰後基線平穩，無雜峰的最小時間）。

3.2設定好實驗條件後，單擊「**」將設定傳輸到儀器，使用新名稱儲存方法檔案。

3.3設定進樣資訊：確保顯示【就緒】，且【色譜圖檢視】中的基線穩定後（一般約需15～30分鐘）。

單擊【lc實時分析】視窗助手欄上的「單次執行」圖示，出現「單次執行」螢幕，設定樣品名、樣品id、資料檔案、資料描述、進樣體積等，然後單擊【確定】。

3.4檢測器調零：點選「檢測器a零點」圖示，使檢測器數值調零。等基線、壓力穩定後可進樣。

3.5 進樣：

3.51 吸取不少於60μl的樣品（定量閥為25vl,進樣體積為定量閥體積的2-3倍），放在進樣口，向左開啟進樣閥，將樣品全部打入進樣口，向右打下進樣閥，系統即自動開始採集資料。單次分析開始，並且【lc實時分析】視窗中的狀態從【就緒】變為【執行】。

3.52當達到【儀器引數檢視】中指定的檢測器的【結束時間】時，自動終止資料採集。

3.53 如設定的【結束時間】要修改，可以單擊【採集】助手欄中的【停止】圖示，也可以在【資料採集】選單的【更改分析時間】專案中，在資料採集過程更改結束時間。一旦開始資料採集，【儀器引數檢視】設定變為唯讀，並且不能在【儀器引數檢視】中更改結束時間。

4.資料處理

4.1 單擊「lcsolution 16c」中的「再解析」，「lc再解析」開始。

4.12選擇【檔案】選單中的「選擇專案資料夾」，然後選擇**定的資料檔案，資料檔案即開啟。

4.13單擊助手欄中的【嚮導】圖示，單擊「program」點選【下一步】，設定正確的積分引數。

4.14記錄要識別的峰的保留時間，單擊【下一步】輸入所需峰的詳細內容，然後單擊【完成】。單擊化合物表右上角【檢視】按鈕，檢視【結果】。

4.15單擊【lc資料】助手欄中的【應用到方法】圖示，出現螢幕，提示指定方法檔名。命名方法檔案並單擊【儲存】。

5.列印報告：在【lc資料分析】點選左下角的【報告格式】出現「操作人」名，選定「操作人」雙擊。然後點選左下角【資料】，從【資料】中拖動【資料檔案】進行列印報告。

6. 清洗和關機

6.1分析完畢後，設定沖洗條件，再用適當經濾過和脫氣的溶劑清洗色譜系統，一般用先用25～30%甲醇沖洗，然後用純甲醇沖洗。25～30%甲醇一般沖洗15～30分鐘，純甲醇沖洗不得少於30分鐘，特殊情況應延長沖洗時間。

先關色譜工作站和檢測器最後關閉幫浦電源。

6.2關斷電源，作好使用登記，內容包括日期，檢品，儀器完好狀態等。