FDA PI染色精要

2022-12-27 22:51:02 字數 560 閱讀 4818

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fda/pi染色操作步驟

1、溶液配製

(1)0.65mol/l甘露醇配製:稱1.1841g甘露醇加入10ml蒸餾水。

(2)5mg/ml fda配製:稱25mgfda加入1ml丙酮酸溶解,再加入4ml甘露醇,搖勻,避光4℃儲存。

(3)2mg/ml pi配製:稱2mgpi加入1ml甘露醇,搖勻,4℃儲存。

2、染色

(1)從冰箱中取出fda及pi,復溫搖勻,fda盡量避光。

(2)取羊膜放置於有0.5 ml生理鹽水的ep管中,加入8μl pi和10μl fda,後用0.6ml生理鹽水沖洗管壁,室溫放置15min.,要求盡量避光;

(3)1.5ml pbs沖洗,取出羊膜,置於載玻片上,用鑷子整平,滴加少量pbs,蓋上蓋玻片。

3、鏡檢

(1)染色完成後,將**放於小盒中避光,迅速送去檢驗。

(2)由於螢光顯微鏡是倒置顯微鏡,所以,蓋玻片面要朝下放置。

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