HBcAb操作規程

2022-12-21 15:24:02 字數 2340 閱讀 7314

B型肝炎病毒核心抗體診斷試劑盒

時間分辨免疫螢光分析法

標準操作規程

檔案編號編寫者審核者批准者

醫院醫院:科:室:1.原理

B肝病毒核心抗體診斷試劑盒版本:時間分辨免疫螢光分析法

執行日期:

共3頁第1頁

標準操作規程

抗—hbc診斷試劑盒(trfia)是應用中和抑制時間分辨螢光免疫分析法,採用單轉殖抗-hbcab包被反應板,用銪標記單轉殖抗—hbc,定量加入持測樣本及hbcab中和抗原後,若標本中有抗-hbc-igg時,hbcab將被中和,最後形成的抗-hbc-hbcab-銪標記抗-hbc複合物減少。增強液(β—nta)將標記在抗體上的eu3+解離到溶液中,eu3+和增強液中的有效成分形成高螢光強度的鰲合物,螢光強度和樣本中的抗—hbc濃度成反比。通過測定螢光強度,測定血清樣本中的乙性肝炎病毒核心抗體。

2.樣本處理

血液樣本盡快送實驗室,室溫下離心分離出血清,置於潔淨離心管中儲存。

3.試劑

本科室使用蘇州新波生物技術****B肝病毒核心抗體(hbcab)時間分辨螢光免疫法診斷試劑盒,試劑盒主要組分如下:

a.陽性對照:1瓶(0.5m1)b.陰性對照:1瓶(0.5m1)

c.銪標記物:1瓶(0.2m1),使用前按需求量做1:100倍稀釋d.中和抗原:兩瓶(藍色,3.0ml*2)

e.濃縮洗液:1瓶(40 m1),使用前用去離子水做1:25倍稀釋f.增強液:1瓶(20 m1)

g.微孔反應板:一塊(12*8,包被有抗-hbc的單轉殖抗體)h.吸頭:20支i.封片:3片(封板用)

j.銪標本稀釋液:一瓶(20ml)k.說明書:1份l.線性參比品:1份

醫院:科:室

4.儀器(使用者自備)4.1時間分辨螢光分析儀;4.2微孔洗滌機;4.3微孔振盪器;5.操作步驟

B肝病毒核心抗體診斷試劑盒時間分辨螢光免疫分析法

版本:執行日期:

共3頁第2頁

標準操作規程

5.1試劑的準備:洗滌液做1:25倍稀釋,使用前一小時內將銪標記物按所需量1:

100倍稀釋並一次用完(使用一次性的塑料容器來配製)。5.2將試劑及所需數量的微孔反應條置室溫(20—25℃)平衡

5.3吸取50ul陰、陽性對照及稀釋了20倍的待檢樣本,按順序加入微孔反應條小孔

中,各孔再加入hbcag中和抗原50ul並加貼封片。5.4在室溫下,用振盪器緩慢**孵育l小時。

5.5在第一次孵育結束後,用微孔洗滌機洗滌4次後拍幹。5.6每孔加入100u1已稀釋的銪標記物工作液,並加貼封片。5.7同操作步驟5.4。

5.8第二次孵育結束後,重複用微孔洗滌機洗滌6次後拍幹。

5.9每孔中加入增強液100u1(加樣過程中避免碰到小孔邊緣或其中的試劑,盡量避

免汙染),並加貼封片。5.10

微孔反應條用振盪器輕搖5分鐘,檢測(在半小時內完成)。

6.計算

cutoff=counts(陰性對照)/2,如果cutoff與被測標本的螢光計數值(counts)的比值≥l .0,則判斷為陽性,否則為陰性。7.臨床意義

高滴度抗—hbc是肝內B肝病毒複製的指標,低滴度為既往感染,幾乎所有個體在感染hbv後總能產抗體

醫院:科:室

8.參考值0.1ncu/ml9.注意事項

B肝病毒核心抗體診斷試劑盒時間分辨螢光免疫分析法

版本:執行日期:

共3頁第3頁

標準操作規程

9.1理解說明書,不要混用不同批號的試劑,不要使用過期的試劑。

9.2盡量建立乙個乾淨無塵的實驗室環境,對實驗的成功起到決定性作用。(因為塵

土中含有很多金屬離子,會影響實驗結果)。9.3試劑盒與被測樣本使用前必須達到室溫。

9.4振盪器按照《2510變頻振盪器標準操作規程》設定需要的振盪頻率。9.5微孔洗滌機按照《egate2310全自動微孔洗滌機標準操作規程》在每天使用前應

進行校正注液量和殘自量,注意管道是否暢通。洗滌時,確認每孔必須是幹的,洗滌液都注滿微孔。洗滌後,每個孔必須是幹的,如果仍有水則需拍幹。

9.6吸取增強液和銪標記物時,請使用乾淨的吸頭,避免塵土等不必要的汙染。加增

強液時探頭應懸空,避免碰到小孔邊緣或其中試劑。9.7使用醫用蒸餾水或去離子水配製洗液。

9.8宜用乾淨的一次性容器配製銪標記物,應避免銪標記稀釋液進入標記物原液中。9.9封片不能重複使用。9.109.11

如需稀釋標本,請用小牛血清稀釋。

所有的樣本和本試劑盒應作為潛在的傳染原看待,按傳染病實驗室檢查規程

操作。9.129.13

如對實驗結果有疑問,應重複試驗。

膽紅素800u mol/l,甘油三脂20 mol/l,血紅蛋白18g/dl對本試劑盒無干

擾作用。9.14

本試劑盒應置2—8℃儲存,以產品批號日期起有效期為一年。

調壓計量操作規程操作規程

1 檢查和準備 1.1檢查各閥門是否按規定的工藝流程要求開閉。1.2安全附件是否有效。1.3管道有無洩漏。1.4 連線部位是否有效連線 無鬆動。2 調壓操作 2.1關閉放散和排汙閥門。2.2緩慢開啟進口過濾器前截斷閥充氣直至壓力平衡。2.3檢查調壓器前壓力表的讀數,最終壓力表的讀數應接近所期望的壓力...

操作規程清單

永鑫實業集團 操作規程清單 1 推焦裝煤車司機崗位操作規程 2 搗固機司機崗位操作規程 3 攔焦車司機崗位操作規程 4 熄焦車司機崗位操作規程 5 環保車司機崗位操作規程 6 機焦側爐門工崗位操作規程 7 上公升管工崗位操作規程 8 測溫工崗位操作規程 9 交換機崗位操作規程 10 調火工崗位操作規...

崗位操作規程

目的 規範炒製崗位標準操作。範圍 適用於炒製的操作。責任 生產車間烘炒崗位操作人員負責實施。內容 1 車間領料員根據生產技術部的生產通知單,按品名數量 加上一般損耗率的數量 及時到倉庫領料。2 領料員必須與倉庫保管員如實核對數量,並檢查是否有偽 劣 次 蟲 霉變等情況,並向質量部門匯報做出使用或退倉...