黃芩的調節性提取工藝研究

作者：徐曉英，安睿，王新巨集，張國明

【摘要】　　目的尋找一種能調節黃芩中的黃芩苷與黃芩素比例的提取方法。方法利用黃芩藥材中共存酶特性，運用正交設計篩選酶解引數，以高效液相色譜法測定黃芩苷和黃芩素，並計算其收率。結果控制酶解條件，可製備黃芩苷與黃芩素按預設要求的黃芩提取物。

結論在設定的酶解條件下，可以平衡提取黃芩中的黃芩苷與黃芩素。該研究為靈活提取黃芩提供了有益參考。

【關鍵詞】黃芩；黃芩苷；黃芩素；酶解

1 儀器與試藥

1.1 儀器色譜工作站：agilent 1100 series，agilent g1354a hplc四元幫浦，agilent dad g1315a 檢測器，g1313a 自動進樣器。

電子天平mettler toledo。

1.2 藥品與試劑黃芩藥材；黃芩苷對照品，批號：110715-200212；黃芩素對照品，批號：

434913/1 14902355，購自fluka chemie gmbh；乙腈（hplc級）購於中國醫藥（集團）上海化學試劑公司，甲酸為分析純，水為重蒸去離子水。

2 方法

2.1 正交實驗設計採用l9(3)4正交表，考察酶解溫度，酶解時間和加水量（指對生藥的體積倍數量）三因素對提取物中黃芩苷和苷元的提取比例的影響。正交實驗因素水平見表1。

表1 l9(3)4正交實驗因素水平表（略）

按表1設計9組實驗，取黃芩飲片500 g，粉碎使過20目篩，分別稱取10 g，按正交表安排分別進行溫浸，溫浸結束，立即加入適量乙醇，使之成為60%乙醇溶液，加熱回流1 h，放冷過濾，濾液濃縮至幹，得幹浸膏。樣品編號為1～9。

2.2 有效成分的測定

2.2.1 色譜條件色譜柱為inertsil ods-3 (4.

6mm×250mm，5μm)；保護柱為phenomenex c18(ods),4mm×3.0mmid；檢測波長280nm；流動相 a為乙腈∶水∶甲酸＝17∶83∶1, 流動相b為乙腈∶水∶甲酸＝80∶20∶1 ；流速1.0ml·min-1；洗脫時間90 min；　　梯度條件：

0～30 min，a(100～70 %)， b(0～30 %)；　　30～70 min a(70-0 %)， b(30～100 %)；　　70～90 min a(0-0 %)， b(100～100 %)

2.2.2 對照品溶液的製備用甲醇配置單標溶液，混合制得混標溶液，其中含黃芩苷（0.12 mg/ml）、黃芩素（0.08 mg/ml）。

2.2.3 樣品溶液的製備取「2.

1」項下的浸膏粉末約0.04g，精密稱定，加70％乙醇90 ml，置100 ml容量瓶中，超聲30 min，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，即得。進樣前經0.

45 μm濾膜過濾。