第２４卷第３期
２０１１年９月
海南師範大學學報（自然科學版）
海南番木瓜總皂苷的提取工藝研究
李玉萍，賈桂雲
．（海南師範大學化學與化工學院，海南海口５７１１５８）
摘要：研究了海南番木瓜總皂苷的提取工藝．以齊墩果酸為對照品，採用紫外分光光度法在５４５ ｎｍ處測定海南番木瓜總皂苷的含量，通過單因素試驗和正交試驗確定最佳提取工藝．結果表明：用７５％的乙醇，ｐｈ＝７，溫度為７ｏ ｏｃ，提取時間為１２０ｍｉｎ，海南番木瓜總皂苷的提取率最高，為２．６６％．
關鍵詞：番木瓜；總皂苷；提取工藝；正交試驗
中圖分類號：ｔｓ ２０１．２文獻標識碼：ａ文章編號
番木瓜又名木瓜、番瓜、萬壽果等，原產於熱帶美洲和非洲，後來引種到我國ｎ，主要分布在廣東、海南、廣西、雲南、福建、台灣省等．成熟的木瓜做水果，其果肉鮮紅厚實、營養豐
開發利用海南番木瓜具有一定的科學意義．
１儀器、材料與試劑
１．１儀器
富，糖分、胡蘿蔔素、蛋白質、維生素等含量較高．除食用外，木瓜還有很高的藥用價值．據《本草綱目》、
《本草遺拾》等記載，木瓜具有舒經絡、和脾胃、易筋骨等作用，**腰膝疼痛、腳氣水腫的功效尤為顯著．
木瓜的主要成分有三萜皂苷類、有機酸類、黃
ｔｕ一１９０１雙光束紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；ｆｚ一１０２型微型植物粉碎機
（天津泰斯特儀器有限責任公司）；ｒｅ一５２ａａ旋轉
蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；ｓｂ一５２００ｄｔｄ超聲波清洗機（寧波新芝生物科技股份有限責任公司）；
ｔｐ一２１４電子天平（丹佛儀器****）．
１．２材料
酮類、鞣質類、多醣等化學成．目前研究已分離、
鑑定了三萜皂苷類的單體有：齊墩果酸、乙醯熊果
酸、３－０一乙醯坡模醇酸、樺木酸．木瓜中主要藥效
新鮮青木瓜購於海口金花市場．木瓜去籽洗
淨，切片，４０℃烘乾，粉碎為供試樣品．
１．３試劑
成分齊墩果酸，已被現代藥理學研究證明為五環三萜類皂苷元，具有護肝降酶、抗炎、促免疫、降血脂、
降血糖、抗菌、抗腫瘤等生理活性～１．
本文對海南番木瓜總皂苷成分的提取工藝，對
收稿日期通訊作者
齊墩果酸標準品（上海順勃生物工程有限公
司）；其它試劑均為國產分析純試劑．
２９８海南師範大學學報（自然科學版）
為測定波長．
２０１１正
２實驗方法與結果
２．１木瓜總皂苷含量的測定方法
２．１．１對照品溶液的製備
ｏ ｏ ｏ ０
２．１．４標準曲線的繪製和回歸方程的建立
精密吸取齊墩果酸標準溶液於具塞試管中，按２．１．３項下方法，在５４５ ａｍ處測定吸光度，以吸光度為縱座標，
精密稱取齊墩果酸標準品１０．６ ｍｇ，用無水乙醇溶解，定容至５０ｍｌ．配成濃度為２１２ 咖ｌ的齊齊墩果酸的加入量為橫座標，繪製標準曲線，見圖
墩果酸標準溶液．
２．１．２樣品溶液的製備
稱取一定量的幹木瓜粉於圓底燒瓶中，按１：
ｌ０的比例加人乙醚，水浴加熱回流脫脂兩次，每次
２ ｈ，溫度控制在４ｏ℃～５０℃．抽濾，脫脂後的木瓜粉烘乾備用．
精密稱取１．０００８ｇ脫脂後的木瓜粉，按料液比
為１：２０，加入６０％的乙醇２０ｍｌ，在６０℃水浴中浸提兩次，每次２ｈ．合併提取液、抽濾，濾液在０ ５ ｏｃ冷藏２４ｈ後，真空濃縮至膏狀．加入２５ ｍｌ水復溶，
抽濾，濾液用水飽和的正丁醇萃取，每次２５ｍｌ，反
復萃取至正丁醇層呈無色為止．合併正丁醇層，用
少量水洗滌２次，真空濃縮至幹．用無水乙醇定容
ｌｏ０ｍｌ．
２．１－３檢測波長的確定
分別吸取０．２ ｍｌ齊墩果酸標準液和樣品溶液於具塞試管中，７０℃水浴揮幹溶劑．加入新配製的
５％的香草醛一冰乙酸溶液０．２ｍｌ，再加入０．８ｍｌ高
氯酸溶液，於７０℃水浴中加熱１５ ｒａｉｎ，取出，流水冷卻１０ａｒｉｎ，使之反應完全．加入４ｍｌ乙酸乙酯【８１，搖勻．以隨行試劑作空白，在４５０～６００ａｍ波長範圍
內進行掃瞄，確定最大吸收波長．結果見圖１．
／－、、√
波長／ｎｍ
圖１波長掃瞄曲線圖
從圖ｌ可知，在５４５ ａｍ處，齊墩果酸標準溶液有最大吸收峰，樣品有較強吸收．故選擇５４５ ａｍ作
２．，＿、
、－／０
２０４０
６０８０
齊墩果酸加入量／ｕｇ
圖２齊墩果酸標準曲線圖
回歸方程一０．００２５８相關係數方程在０—１４０ｕｇ範圍內有良好線性關係．２．１．５總皂苷含量的測定
精密吸取ｏ．２ｍｌ樣品溶液於具塞試管中，按
２．１．３項下的方法在５４５ ｎｍ處ｉ貝０吸光度，根據回歸方程計算樣品溶液中總皂苷濃度為按下式計算其提取率．
提取率：
×１００％
ｙｙ式中：ｃ為總皂苷濃度為提取液的總體積（ｍｌ）；ｗ為所用脫脂木瓜粉的質量（ｇ）．２．２方法考查
２．２．１穩定性實驗
精密吸取０．２ｍｌ樣品溶液，每隔ｌ０ｍｉｎ測一次吸光度，計算ｒｓｄ（結果見表１）．
表１穩定性試驗
第３期李玉萍等：海南番木瓜總皂苷的提取工藝研究２９９
結果表明，在ｌｈ內樣品的吸光度變化不大，基本穩定精密度實驗
精密吸取０．２ｍｌ齊墩果酸標準溶液，共５份，測吸光度，計算ｒｓｄ值（結果見表２）．
表２精密度試驗
６０８０１００
序號吸光度ａ
計算表明該方法的精密度好．
２．２．３加樣**率實驗
吸採樣品溶液５份，分別加人０．１
齊墩果酸標準溶液測吸光度，計算濃度，並按下式計算**率和ｒｓｄ值（結果見表３）．
表３加樣**試驗
力ⅱ樣**率＝ 孚 ｊｉ百×１ｏｏ％
計算平均**率為該
方法的測定結果可靠．
２．３海南木瓜總皂苷的提取工藝研究
影響皂苷提取主要因素的有：溫度、時間、溶劑濃度、料液比、ｐｈ值等．為研究各個因素對總皂苷提取率的影響，進行單因素試驗和正交試驗．２．３．１溫度對提取率的影響
精確稱取１．０００ｇ脫脂幹木瓜粉５份，按料液比
１：２０加入６０％乙醇，分別在下浸提９０ｍｉｎ，溫度對總皂苷的提取率的影響見圖３．
從圖３可以看出，隨著溫度的公升高，皂苷的提
取率逐漸增大，在７０℃時達到最大，繼續增加溫度，皂苷的提取率有所下降．最佳提取溫度為７０℃．
溫度／℃
圖３溫度對提取率的影響
２．３．２浸提時間對提取率的影響
精確稱取１．０００ｇ脫脂幹木瓜粉５份，按料液比１：２ｏ／ｊ￣人６０％乙醇，在７０℃下分別浸提３０ｍｉｎ、６０
及１５０ｍｉｎ．浸提時間對總皂苷
的提取率的影響見圖４．
量時間／ｍｉｎ
圖４浸提時間對提取率的影響
從圖４可以看出，隨著時間的延長，總皂苷的
提取率不斷增加，１２０ｍｉｎ時達到最大，之後總皂苷的提取率趨緩緩下降．最佳提取時間為１２０ａｒｉｎ．
２．３．３乙醇濃度對提取率的影響
精確稱取１．０００ｇ脫脂幹木瓜粉５份，分別加人
濃度為及９０％的乙醇，料液比
為１：２０，在７０℃下分別浸提１２０ ｍｉｎ．乙醇濃度對總皂苷的提取率的影響見圖５．
從圖５可以看出，隨著乙醇濃度的增加，皂苷
的提取率也在增加，乙醇濃度達到７５％時浸出率最大，但濃度繼續增大皂苷的提取率反而會下降．這
主要與木瓜皂苷的極性有關，根據相似相容原理，
宜選擇７５％的乙醇為最佳提取劑濃度．
２．３．４料液比對提取率的影響
精確稱取１．０００ｇ脫脂於木瓜粉５份，分別按料
３００海南師範大學學報（自然科學版）２０１１年
液比加人７５％的乙時間．最佳提取條件為：ｃ：ｄａ：ｂ，，即溫度７ｏ℃，時
間１２０ｍｉｎ，乙醇濃度為７５％，ｐｈ＝７．在此條件下做醇，在７０℃下分別浸提１２０ ｒａｉｎ，料液比對總皂苷的提取率的影響見圖６．４ｓ
鬟 ２１０
乙醇濃度，％
圖５乙醇濃度對提取率的影響
褂料液比
圈６料液比對提取率的影響
從圖６可以看出，隨著料液比的增加，皂苷的提取率有所增加，但增加的幅度不大．料液比過大，消耗溶劑多，濃縮工藝中也會更耗時耗能，因此最佳料液比１：２０．
２．３．５ ｐｈ對提取率的影響
精確稱取１．０００ｇ脫脂幹木瓜粉５份，按料液比
１：２０加入７５％的乙醇，分別調節ｐｈ為浸提１２０ｍｉｎ．ｐｈ對總皂苷的提取率的影響見圖７．
圖７可以看出，ｐｈ對皂苷提取率的影響很大，ｐｈ＝７時，皂苷提取率最高．
２．３．６正交試驗優化工藝引數
為考察各個因素的影響程度和互動作用，選擇對皂苷提取影響較大的四個因素，每個因素選擇三
個水平，進行 （３ ）正交試驗．因素水平見表６，正
交試驗結果見表７．
由正交試驗結果可知，對海南番木瓜總皂苷提取影響程度為：ｃ＞ｄ＞ａ＞ｂ，即乙醇濃度＞ｐｈ＞溫度＞驗證實驗，得提取率為２．６６％．褂２
４６８１０
１２１４
ｐｈ值圖７ ｐｈ對提取率的影響
表４因素水平表
一一～一一一一一一一一一
３結論本實驗先用乙醚將木瓜粉脫脂，再用正丁醇反
復萃取，從而減少了木瓜中其它成分的干擾．用紫
外分光光度法進行了比色分析，由於比色法對於結
構相近的物質，顯色靈敏度高，操作簡便，而且重現
性較好，故適用於總皂苷的含量測定．
（下轉第３０６頁）
一一３０６海南師範大學學報（自然科學版）２０１１鉦
【ｌ９】司徒鎮強，吳軍正．細胞培養【ｍ】．西安：世界圖書出版社
西安公司
［２０１韓銳．腫瘤化學預防及藥物**【ｍ】．北京：北京大學和
中國協和醫科大學聯合出版社
責任編輯：畢和平
（上接第３００頁）
海南番木瓜的化學成分較複雜，具有多種生物
【３】郭學敏，洪永福，章玲，等．皺皮木瓜化學成分的研究【ｊ】．
活性，故對海南番木瓜的有效部位總皂苷的研究具中草藥
有較大意義．本研究通過單因素實驗和正交試驗［４］路景濤，徐德祥，孫美芳，等．木瓜苷的致畸毒性研究【ｊ】．法，篩選出海南番木瓜總皂苷的最佳提取工藝，為癌變，突變
進一步開發海南番木瓜皂苷的藥用價值提供了依
【５】唐春紅．木瓜中齊墩果酸測定方法的研究【ｊ】．天然產物
據．研究與開發
【６】李敏，費曜，李麗霞，等．天冬中總皂普含量測定方法的**【ｊ】．成都中醫藥大學學報
參考文獻：
【７］黃榮華，唐麗華，游本剛，等．正交試驗法優化珍珠菜中總［１】汪國興．番木瓜的綜合利用現狀【ｊ】．資源開發與保護
皂苷提取工藝［ｊ】．抗感染學
［８】高俠，黎雲詳，蔡凌雲，等．超生輔助溶劑法提取白勒葉總
『２］吳虹，魏偉，吳成義．木瓜化學成分及藥理活性的研究［ｊ】
皂苷的工藝研究【ｊ】．食品科學
安徽中醫學院學報
責任編輯：畢和平
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