實驗原理
質粒dna或重組dna粘附在細菌細胞表面，經過42°c短時間的熱擊處理，促進吸收dna.然後在非選擇培養基中培養一代，待質粒上所帶的抗菌素基因表達，就可以在含抗菌素的培養基中生長。
一、實驗材料準備
1. 器材
旋渦混合器，微量移液取樣器，移液器吸頭，1.5 ml 微量離心管，雙面微量離心管架，乾式恆溫氣浴（或恆溫水浴鍋），製冰機，恆溫搖床，培養皿（已鋪好固體lb-amp），超淨工作台，酒精燈，玻璃塗棒，恆溫培養箱。
2. 試劑
培養基（不加抗菌素），lb培養基（加抗菌素），無菌ddh2o，iptg，x-gal。
3. 材料處理
無菌ddh2o，1.5 ml 離心管裝入鋁製飯盒（滅菌）、移液器吸頭裝入相應的吸頭盒（滅菌），20%iptg（m/v），2% x-gal（m/v，用n,n-二甲基甲醯胺配）。
二、操作步驟
1. 事先將恆溫水浴的溫度調到42℃。
2. 從-70℃ 超低溫冰櫃中取出一管（100 μl）感受態菌，立即插入冰上，冰浴5~10 min。
3. 待感受態菌融解後，加入5 μl 連線好的質粒混合液（dna含量不超過100 ng），輕輕**後放置冰上30 min。
4. 輕輕搖勻後插入42℃水浴中1 min進行熱休克，然後迅速放回冰中，靜置3~5 min。
5. 在超淨工作台中向上述各管中分別加入500 μl lb培養基（不含抗菌素）輕輕混勻，然後固定到搖床的彈簧架上37℃**1 h。
6. 將培養好的離心管中的菌12000g離心1min，去上清（大概剩餘100μl後用槍打均勻）。在超淨工作台中取上述轉化混合液100μl，分別滴到含合適抗菌素的固體lb平板培養皿中，用滅過菌的玻璃塗佈棒塗佈均勻。
7. 如果載體和宿主菌適合藍白斑篩選的話，滴完菌液後再在平板上滴加40 μl 2% x-gal，8 μl 20% iptg，用滅過菌的玻璃塗佈棒塗佈均勻。
8. 在塗好的培養皿上做上標記，並用封口膜封好。先放置在37℃恆溫培養箱中30~60 min 直到表面的液體都滲透到培養基裡後，再倒置過來放入37℃恆溫培養箱過夜。
9. 在被細菌汙染的桌面上噴灑70%乙醇，擦乾桌面，寫實驗報告。
10. 一天後，觀察平板上長出的菌落轉殖，以菌落之間能互相分開為好。
參觀一大會址感想
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