醣類蛋白質脂肪鑑定的**性實驗
實驗原理：
某些化學試劑能夠使生物組織中的有關有機化合物產生特定的顏色反應。可溶性糖中的還原糖（如葡萄糖、果糖），與班氏試劑發生作用，可以生成磚紅色的氧化亞銅沉澱。脂肪可以被素檀iii染成橘黃色。
蛋白質與雙縮脲試劑發生作用，可以產生紫色反應。因此，可以根據與某些化學試劑所產生的顏色反應，鑑定生物組織中糖、脂肪或蛋白質的存在。
目的要求：
初步掌握鑑定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。
材料用具：
一、實驗材料
1、做可溶性還原糖的鑑定實驗，應選擇含糖量較高、顏色為白色或近於白色的植物組織（如蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿蔔等）。
2、做脂肪的鑑定實驗，應選擇富含脂肪的種子，以花生種子為最佳，實驗前需浸泡3-4h。
3、做蛋白質的鑑定實驗，可用雞蛋蛋白或用浸泡1-2d的黃豆種子（或豆漿）。
二、儀器和試劑
1、儀器水果刀、鑷子、試管、試管夾、試管架、大小燒杯、量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網、火柴、載玻片、蓋玻片、吸水紙、研缽、石英砂、紗布、顯微鏡
2、試劑班氏試劑、蘇丹iii染劑、雙縮脲試劑、體積分數為20%的酒精溶液、蒸餾水
方法步驟：
一、可溶性還原糖的鑑定
1、製備生物組織樣液
為節省實驗時間，教師在上課之前準備好蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿蔔的組織樣液（具體方法參照課本中有關內容）。
2、實驗操作方法和觀察
（1）取a、b編號的2支試管，分別注入2ml組織樣液和2ml蒸餾水。
（2）向2支試管內分別加入5—6滴班氏試劑。振盪試管，使溶液混合均勻，此時溶液呈藍色。
（3）將2支試管放進盛有開水的大燒杯中，用酒精燈加熱煮沸2min左右。在對試管加熱煮沸過程中，隨時仔細觀察並對比2支試管中溶液的顏色變化。
3、教學建議
（1）將學生分成4個小組，分別選用蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿蔔的組織樣液進行實驗，比較這些植物組織中含糖量的高低，從而增加實驗的**性。另外，也可選用同一種植物的不同品種的某器官作為實驗材料，以比較它們含糖量的高低，如用不同品種的柑橘果實。
（2）課外**：尿糖的定性檢測
有興趣的同學可根據還原糖與班氏試劑的顏色反應，檢測自己的尿液中是否含有尿糖（葡萄糖）。具體方法附後。
4、說明：
（1）實驗操作中增加了乙個對照組，目的是為了排除加熱使班氏試劑顏色變化的可能性。
（2）鑑定試劑改為班氏試劑，主要是考慮班氏試劑配製後能長期使用，不需使用時再臨時配製，從而簡化實驗操作。
二、脂肪的鑑定
1、製備生物組織樣本
取2-3粒浸泡過的花生種子去皮，置於研缽中研磨呈泥狀待用。
2、實驗操作方法和觀察
（1）用鑷子取少許泥狀花生種子組織於載玻片上，滴2-3滴素檀iii染液，染色2-3min。
（2）用吸水紙吸去組織周圍的染液，再滴上2滴體積分數為20%的酒精溶液，洗去浮色。
（3）用吸水紙吸去組織周圍的酒精，再滴上1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，壓片製成臨時裝片。
（4）在低倍鏡下尋找組織附近已著色的圓形小顆粒。為了觀察得更清楚，可以用高倍鏡進行觀察。
3、說明：
（1）徒手切取花生子葉薄片難度較大，也有一定的危險性。因此改用研磨成泥狀的花生子葉。另外考慮到本實驗的時間較緊張，花生泥可由教師在實驗之前製備好。
（2）製備花生種子組織樣本時，研磨要充分；製片時，應盡量使花生泥呈一薄層均勻分布在蓋玻片下，以便於觀察。
三、蛋白質的鑑定
1、製備生物組織樣液
（1）取幾粒浸泡過的黃豆，去皮，切成薄片。
（2）將黃豆薄片放進研缽中，加少許石英砂和5ml蒸餾水，充分研碎。
（3）將玻璃漏斗插入試管中，在漏斗上墊上一層紗布，過濾黃豆組織研磨液。
2、實驗操作方法和觀察
（1）取2支試管，分別向2支試管加入豆漿和蒸餾水各2ml，再分別向2支試管中加入2ml雙縮脲試劑a（質量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液），搖盪均勻，注意觀察溶液的顏色變化。
（2）再向2支試管加入3-5滴雙縮脲試劑b（質量濃度為0.01g/ml的硫酸銅溶液）搖勻，注意觀察溶液的顏色變化。
3、教學建議
（1）為節省實驗時間，可見現成的食用豆漿作為黃豆組織研磨液使用：也可將實驗分成幾個小組，分別用不同廠家生產的牛奶（可選用本校小賣部**的幾種牛奶）作為實驗材料，以比較它們的蛋白質含量。
（2）課外**：尿蛋白的定性檢測
有興趣的同學，可根據蛋白質具有變性和沉澱反應的化學特性，檢測尿液中蛋白質的含量，具體方法附後。
4、說明：實驗操作中增加了乙個對照實驗，目的是為了排除雙縮脲試劑a和雙縮脲試劑b反應造成顏色變化的可能性，從而增強了說服力。
有關試劑的配製：
1、班氏試劑的配製：
（1）600ml蒸餾水溶解173g檸檬酸鈉和100g碳酸鈉，冷卻後稀釋到850ml（a液）。
（2）100ml蒸餾水溶解17.4g無水硫酸銅，冷卻後稀釋到150ml（b液）。
（3）將b液緩緩倒入a液中，邊倒入邊攪拌，如有沉澱產生，可過濾沉澱物，長期使用。
2、蘇丹iii溶液的配製：
稱取0.1g蘇丹iii乾粉，溶於100ml酒精的體積分數為95%溶液中，待全部溶解後再使用。
3、雙縮脲試劑的配製：
取10g氫氧化鈉放入量筒中，加水至100ml，待充分溶解後倒入試劑瓶中，配成質量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液，為雙縮脲試劑a。
取1g硫酸銅放入量筒中，加水至100ml，待充分溶解後倒入試劑瓶中，配成質量濃度為0.01g/ml的硫酸銅溶液（藍色），為雙縮脲試劑b。
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